PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的臨床研究

陳亥　許夢潔　陳楊芳　許鍇

【摘? 要】目的：探究PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的臨床價值。方法：選取溫州市人民醫院收治的48例細菌性陰道炎患者，均通過PCR檢驗法（PCR組）、細菌培養法（細菌培養組）進行檢驗， 對比兩組陽性檢出率和細菌檢出率。結果：陽性檢出率比較，PCR組高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細菌檢出率，均高于細菌培養組，無顯著差異（P>0.05）。結論：在進行陰道細菌檢驗時，PCR檢驗法的陽性檢出率和細菌檢出率比細菌培養法高，值得在臨床應用。

【關鍵詞】細菌性陰道炎;陰道細菌檢驗;PCR檢驗法;細菌培養法

【中圖分類號】R446;R711????? 【文獻標識碼】A?????? 【文章編號】1672-3783（2020）01-0038-02

陰道炎屬女性常見炎性疾病，由陰道細菌感染所致，發病率較高，病情嚴重時可造成嚴重后果，如不孕、異位妊娠、慢性盆腔炎等，危害患者身體健康，影響其正常的生活和工作^[1]。因此，必須予以患者有效的診斷方法，為下一步治療奠定好基礎。基于此，本次研究將以溫州市人民影院收治的48例患者為例，均進行PCR檢驗法和細菌培養法進行陰道細菌檢驗，報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

本次研究由溫州市人民醫院倫理委員會批準，選取在2017年1月～2019年2月期間，我院收治的細菌性陰道炎患者48例，符合臨床診斷標準。患者均知情同意參與本次研究，并簽署研究知情書其基線資料：（1）年齡：最小年齡28歲，最大年齡46歲，平均年齡（35.68±2.25）歲;（2）病程：最短病程4個月，最長病程20個月，平均病程（12.65±3.67）個月;（3）細菌類型：加特納菌7例，棒狀桿菌16例，腸球菌25例。

1.2方法

在患者陰道后穹窿部，用無菌棉簽，采集陰道分泌物，并用生理鹽水貯存。

1.2.1PCR組

行PCR檢驗，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，取出1000μL，放于離心機中，采用12000r/min，時間為15min進行離心分離。取出上清液制成DNA模板，再放入PCR儀進行循環處理，并分析所具有細菌類型。

1.2.2細菌培養組

行細菌培養法，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，均勻涂抹在瓊脂培養基上，并放在二氧化碳恒溫培養箱內，進行培養，培養時間3d，當菌落長成后，選擇光滑、灰色、半透明、“露滴”型的細菌，進行生化檢驗。采用全自動微生物鑒定儀，鑒別細菌的種類。

1.3觀察指標

觀察并記錄兩組陽性檢出率，以及細菌檢出率。PCR陽性檢驗標準：1mm以內的條帶寬度，整齊條帶邊緣，無藥斑和引物二聚體的背景。細菌培養法陽性診斷標準：長出典型菌落，經生化儀鑒定。

1.4統計學方法

利用SPSS21.0統計學軟件，對計數資料進行數據處理，X²檢驗，率表示，P<0.05，表顯著差異。

2 結果

PCR組檢出情況：加特納菌7（14.58%）例，棒狀桿菌14（29.17%）例，腸球菌23（47.92%）例。細菌培養組檢出情況：加特納菌5（10.42%）例，棒狀桿菌12（25.00%）例，腸球菌20（41.67%）例。PCR組陽性檢出率為91.67%（44/48），細菌培養組陽性檢出率為77.08%（37/48）。陽性檢出率比較，PCR組高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細菌檢出率，均高于細菌培養組，無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

在健康女性的陰道內，寄生菌群處于相對平衡狀態，以維持內環境穩態，若出現失衡狀況，大量死亡維持細菌平衡的重要細菌，使病菌迅速繁殖，并消耗大量營養物質，導致酸堿平衡紊亂，最終引起細菌性陰道炎的發生^[2]。

細菌培養法是一種檢測細菌性陰道炎的方法，操作簡單，普遍使用率較高，但應用中細菌培養法卻暴露出較多的弊端。如：（1）在操作過程中，對實驗室的器皿、無菌環境等要求較高，且檢驗過程較為復雜，易受到外來因素的影響，造成培養失敗;（2）細菌培養時間較長，大都為3d左右，易延誤患者病情;（3）在進行檢驗時，易受到認為因素的影響，使培養失敗，延長檢驗時間^[3]。

而PCR檢驗法，一種新型的細菌性陰道炎檢驗方法，不僅具備PCR敏感性，還具有DNA雜交的特異性^[4]。且對環境要求低、樣本需求量少，還可當天得出檢測結果，為醫師提供診斷幫助。PCR具體操作流程為：（1）標準雙鏈DNA在高溫條件下，氫鍵斷裂變為單鏈DNA;（2）單鏈DNA降溫并與引物結合，形成局部雙鏈DNA;（3）在活動最佳狀態下，延伸并形成模板互補的DNA鏈，使引物DNA鏈增長，突顯DNA雜交特異性，提高PCR敏感性。雖PCR檢驗法具有陽性檢出率高，操作簡單，檢測時間短等特點，但也會存在一定的漏診率^[5]。因此，在檢測期間更應注意：（1）在取樣期間，盡量多選取位置，避免對診斷結果帶來影響。（2）即使操作簡單，也要注意操作手法，以降低人為因素造成的影響。因此，醫生需提高自我業務能力和專業素質，提升陽性檢出率。

在本次研究的結果顯示，PCR組陽性檢出率，顯著高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。表明在檢驗陰道細菌檢驗時應用PCR檢驗法比細菌培養檢驗，陽性檢出率高，提供臨床診斷幫助，使患者盡早獲得對癥治療。另外，PCR組細菌檢出率明顯高于細菌培養組，進一步說明PCR檢驗法能夠為患者爭取更多的治療時間，有利于患者恢復健康。

綜上所述，在陰道細菌檢驗時，選擇PCR檢驗的陽性檢出率高，細菌檢出高，能夠為臨床診斷提供幫助，值得推薦應用。

參考文獻

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[5]????? 李美珠，李煒煊.PCR法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果對比[J].臨床檢驗雜志（電子版），2019，8（1）：162-163.