PSMA和PSA在前列腺癌早期診斷中的價(jià)值

祁蕙燕，唐玲，郭劍

1西寧市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，西寧810000

2青海省第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，西寧8100000

前列腺癌的發(fā)病率和病死率均較高，早期癥狀不明顯，早診斷和早治療較困難[1]。相關(guān)研究顯示[2]，前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）、前列腺特異性膜抗原（prostate-specific membrane antigen，PSMA）均是廣泛應(yīng)用于臨床診斷的前列腺癌腫瘤標(biāo)志物，是中國前列腺癌診斷指南中首選的檢測(cè)項(xiàng)目。與PSA相比，PSMA檢測(cè)前列腺癌的靈敏度、特異度更高，已成為前列腺癌腫瘤標(biāo)志物的熱點(diǎn)之一[3]。此外，相關(guān)研究顯示[4]，PSMA作為一種前列腺癌細(xì)胞的膜蛋白，血清含量較低，在患者的血清中不易檢測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）是檢測(cè)PSMA的主要方法。PSMA在前列腺癌的早期診斷、基因治療、預(yù)后評(píng)估中的作用也越來越重要[5-6]。本研究旨在探討PSMA對(duì)前列腺癌早期診斷價(jià)值及臨床意義分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年6月至2019年6月西寧市第一人民醫(yī)院收治的76例前列腺癌患者和31例前列腺炎患者，分別作為前列腺癌組和前列腺炎組。納入標(biāo)準(zhǔn)：前列腺癌患者均經(jīng)病理診斷確診，前列腺炎患者根據(jù)病史、癥狀、直腸指診、前列腺液檢查及四杯試驗(yàn)等檢查確診。排除其他腫瘤患者。前列腺癌組患者年齡 51～82歲，平均（71.24±8.43）歲。前列腺炎組患者年齡53～84歲，平均（69.98±8.39）歲。同期選取在我院進(jìn)行健康體檢的35例健康男性作為對(duì)照組，年齡51～83歲，平均（67.45±7.84）歲。3組受試者年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法和觀察指標(biāo)

抽取所有受試者靜脈血5 ml，3000 r/min離心分離血清，-10℃保存待檢。采用ELISA法檢測(cè)血清PSMA和PSA水平，嚴(yán)格按照說明書操作。以PSA≥3.5 μg/L，PSMA≥4 μg/L為表達(dá)陽性。

蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測(cè)76例前列腺癌患者PSA、PSMA蛋白表達(dá)情況。經(jīng)直腸B超引導(dǎo)下取前列腺癌患者前列腺癌穿刺標(biāo)本及手術(shù)切除標(biāo)本，固定、脫水、包埋、切片、染色制成切片。采用BIU-2000系統(tǒng)光學(xué)顯微鏡放大100倍攝取圖像，對(duì)圖像進(jìn)行灰度變化分級(jí)，每例前列腺癌患者的前列腺癌組織取4張切片，每張切片隨機(jī)選4個(gè)視野，測(cè)量灰度值，計(jì)算PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量。

依據(jù)美國武裝部隊(duì)病理研究所（Armed Forces Institute of Pathology，AFIP）標(biāo)準(zhǔn)[7]評(píng)估前列腺癌組患者Gleason分級(jí)及評(píng)分，由病理科醫(yī)生分別閱片并進(jìn)行Gleason評(píng)分及分級(jí)，Gleason評(píng)分≤4分為分化程度良好，5～7分為分化程度中等，8～10分為分化程度差。比較不同Gleason評(píng)分及不同分化程度前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較比較采用LSD-t檢驗(yàn)，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PSMA和PSA水平的比較

前列腺癌組患者血清PSA和PSMA水平均高于對(duì)照組受試者和前列腺炎組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1 3組受試者血清PSMA和PSA水平的比較（μg/L，±s）

表1 3組受試者血清PSMA和PSA水平的比較（μg/L，±s）

注：*與前列腺癌組比較，P＜0.05

組別對(duì)照組（n=35）前列腺炎組（n=31）前列腺癌組（n=76）F值P值PSA 1.81±0.25*1.93±0.27*17.39±2.71 1065.777 0.000 PSMA 2.18±0.36*4.13±0.54*23.19±3.83 894.277 0.000

2.2 PSMA和PSA蛋白陽性表達(dá)率的比較

前列腺癌組患者PSA和PSMA陽性表達(dá)率均高于對(duì)照組受試者和前列腺炎組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表2 3組受試者血清PSMA和PSA蛋白陽性表達(dá)情況的比較[ n（%）]

2.3 不同Gleason評(píng)分前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較

依據(jù)AFIP標(biāo)準(zhǔn)，Gleason評(píng)分4分3例，5分8例，6分6例，7分25例，8分16例，9分8例，10分10例，將Gleason評(píng)分4～6分患者作為一組，結(jié)果顯示，隨著Gleason評(píng)分的增高，前列腺癌患者前列腺癌組織PSMA蛋白的相對(duì)表達(dá)量逐漸升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而PSA蛋白的相對(duì)表達(dá)量無明顯變化，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表3）

2.4 不同分化程度前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較

依據(jù)AFIP標(biāo)準(zhǔn)，分化程度良好3例，分化程度中等39例，分化程度差34例，將分化良好和中等作為一組，結(jié)果顯示，分化程度差的前列腺癌患者的PSMA蛋白相對(duì)表達(dá)量高于分化良好/中等的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表4）

表3 不同Gleason評(píng)分前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較(±s）

表3 不同Gleason評(píng)分前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較(±s）

注：a與Gleason評(píng)分4～6分組比較，P＜0.05；b與Gleason評(píng)分7分組比較，P＜0.05；c與Gleason評(píng)分8分組比較，P＜0.05；d與Gleason評(píng)分9分組比較，P＜0.05

Gleason評(píng)分4～6（n=17）7（n=25）8（n=16）9（n=8）10（n=10）F值P值PSMA 92.16±9.75 98.18±11.35 108.78±13.26a b 121.41±17.54a b c 138.72±19.23a b c d 24.342 0.000 PSA 110.30±17.83 116.09±18.02 113.28±16.94 115.94±18.03 103.83±19.85 0.972 0.428

表4 不同分化程度前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較（±s）

表4 不同分化程度前列腺癌患者前列腺癌組織中PSMA和PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量的比較（±s）

分化程度良好/中等（n=42）差（n=34）t值P值PSMA 95.75±10.32 120.56±16.38 8.046 0.000 PSA 113.75±15.38 111.13±14.28 0.762 0.448

2.5 Gleason評(píng)分與PSMA和PSA蛋白表達(dá)的相關(guān)性

Pearson相關(guān)系數(shù)分析顯示，Gleason評(píng)分與PSMA蛋白相對(duì)表達(dá)量呈正相關(guān)（r=0.869，P＜0.01），與PSA蛋白相對(duì)表達(dá)量無相關(guān)性（r=0.235，P＞0.05）。

3 討論

前列腺癌好發(fā)于老年男性，發(fā)病隱匿，多患者確診時(shí)已屬于晚期，甚至少部分患者確診時(shí)已出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重影響患者的生命健康[8]。流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，隨著中國人口老齡化進(jìn)程的不斷加快，前列腺癌的發(fā)病率與病死率迅速升高[9]，早期診斷前列腺癌對(duì)改善患者的預(yù)后有重要意義[10]。

PSMA是一種Ⅱ型跨膜糖蛋白，由11號(hào)染色體短臂基因組成，主要由葉酸水解酶和神經(jīng)肽酶構(gòu)成[11]。研究顯示，PSMA蛋白表達(dá)于正常前列腺組織外，還可在子宮內(nèi)膜、腎小管、膀胱、胃腸道的神經(jīng)干細(xì)胞及腦組織等中表達(dá)[12-13]，但濃度比前列腺組織要低2～3個(gè)數(shù)量級(jí)[14-15]。國外研究顯示，前列腺癌組織中的PSMA蛋白與前列腺癌的進(jìn)展和復(fù)發(fā)密切相關(guān)，可依據(jù)PSMA蛋白的相對(duì)表達(dá)量來評(píng)估前列腺癌的病情狀態(tài)，是評(píng)估前列腺癌的進(jìn)展獨(dú)立指標(biāo)[16-17]。PSMA蛋白通過促進(jìn)腫瘤血管生成而促進(jìn)前列腺癌的發(fā)生發(fā)展，且還涉其他基因的調(diào)控的作用[18]。因此，PSMA作為一種重要的前列腺癌特異性膜蛋白，在前列腺癌的相關(guān)研究中具有重要作用，對(duì)前列腺癌的早期診斷、病情判斷、治療及預(yù)后均有重要臨床意義[19]。PSA是一種前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物，廣泛應(yīng)用于臨床診斷中。研究顯示，PSA主要由前列腺上皮細(xì)胞分泌，屬于激肽酶家族蛋白，主要存在于男性的前列腺組織和精液中，在血清中的含量較低[20]。

本研究結(jié)果顯示，分化程度差的前列腺癌患者的PSMA蛋白相對(duì)表達(dá)量高于分化良好/中等的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明PSMA蛋白可作為分化程度較差的前列腺癌鑒別診斷的重要依據(jù)。此外，Gleason分級(jí)是判斷前列腺癌分化程度的重要指標(biāo)。前列腺癌組患者血清PSA水平均高于對(duì)照組受試者和前列腺炎組患者，但不同Gleason分級(jí)前列腺癌組患者血清PSA水平無明顯變化，表明PSA在前列腺癌的各期診斷判定中價(jià)值不高，但對(duì)評(píng)估前列腺癌的臨床療效、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移情況等具有重要的價(jià)值。

綜上所述，PSMA在前列腺癌的早期診斷、治療、病情評(píng)估方面具有較高實(shí)用價(jià)值，可作為前列腺癌早期診斷的特異性標(biāo)志物，具有一定的臨床意義。