艾克拜爾·依明,賽福丁·阿不拉,陳 凱,艾米娜什·哈力別克,李 昊,尼加提·吾布力
(新疆農業大學動物醫學學院,烏魯木齊 830052)
近年來,牧場飼養成本的限制,羊由放牧向舍飼養轉變,飼養方式日趨集約化和規模化。目前舍飼養殖所采用的技術管理措施,不僅改變了羊長期以來的生存環境,而且降低了羊抵抗氧化應激和疾病的能力[1]。動物高的生長速度和營養需求及高代謝率是自由基增加、氧化應激和免疫功能下降的主要原因[2]。正常情況下,機體產生的自由基會在抗氧化系統的清除下處于相對平衡的狀態,但當自由基的產生速率超過機體的清除能力時,機體抗氧化系統的平衡就會被破壞[3]。舍飼飼養方式下,由于集約化程度較高,羔羊的生長代謝相對旺盛,容易產生大量不能及時清除的自由基而造成氧化應激,引起脂質和蛋白質的損傷,破壞機體的平衡[4]。圈舍環境質量差、飼養密度大等因素會引起羔羊氧化應激,降低羔羊的生長發育,破壞機體的免疫屏障[5]。雖然使用抗生素可以降低疾病的發生率,但副作用非常大,因此益生菌發酵飼料作為抗生素的替代品來提高動物抗氧化及免疫功能已成為當前研究的熱點。黃靈等研究報道,虎龍斑基礎飼料中添加芽孢桿菌和光合細菌可使總抗氧化能力(TAOC)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化氨酶(GSH-Px)活性顯著提高(P<0.01),丙二醛(MDA)水平顯著降低(P<0.05)[6]。徐俊杰試驗結果表明,益生菌能夠顯著提高仔豬的抗氧化性能和腸道免疫功能[7]。本試驗主要通過研究復合益生菌發酵棉源飼料對羔羊生長性能和血清抗氧化能力的影響,初步探討復合益生菌發酵棉源飼料對育肥羔羊機體健康的影響,為推廣復合益生菌發酵棉源飼料提供科學依據。
復合益生菌由新疆艾維拉農業科技發展有限公司提供,發酵樣為新疆阿克蘇阿瓦提縣拜什艾日克鎮代熱亞博依村農民家的棉花秸稈、棉籽殼、棉籽餅等棉源飼料。
棉花秸稈、棉籽殼或棉籽餅70%,麩皮15%,麥稈10%,玉米4%,紅糖0.4%,尿素0.2%,鹽0.1%,每種原料分別設1%、2%和3% 3 個復合益生菌添加水平,料水比1:0.6,將復合益生菌液按添加量接種到發酵底物,攪拌均勻后裝入發酵袋嚴格厭氧,溫度在30~35 ℃,發酵21 d。
在新疆阿克蘇阿瓦提縣拜什艾日克鎮代熱亞博依村農民家選擇羔羊進行試驗。選擇健康和發育良好的5 月齡阿瓦提縣雜交羔羊24 只,體重25.58±1.2 kg,隨機分成4組,分別為對照組和試驗組,每組6只,試驗組每種原料分別設1%、2%和3%3個復合益生菌添加水平,分為1%發酵組、2%發酵組、3%發酵組。試驗期為60 d,預試期7 d。
采用圈養,試驗期間每天飼喂2 次,自由采食,自由飲水。傳統方式飼喂對照組,經過復合益生菌發酵棉源飼料飼喂實驗組,即發酵后的棉花秸稈和棉籽殼為粗飼料,發酵后的棉籽餅為精飼料。發酵后的棉花秸稈、棉籽殼、棉籽餅飼喂羊的比例分別為1:1:0.53。
復合益生菌發酵飼料飼喂的第15、30、45、60 天,對24 只羔羊進行頸靜脈采血5~10 mL,標記好,以3 500 r·min-1離心15 min,取血清3~5 mL放入離心管內-20 ℃保存備用。
1.7.1 生長性能指標的測定
在試驗期間,提前斷料,分別于試驗開始與試驗結束進行稱重,記錄試驗期間的育肥羔羊的增重情況。
1.7.2 血清抗氧化指標的測定
主要包括GSH-Px、MDA、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、T-AOC、CAT,采用比色法,試劑盒由武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司提供,測定儀器為UV1900 紫外可見光分光光度計(上海菁華科技儀器有限責任公司)。
試驗數據用Excel 處理,采用SPSS19.0 軟件進行統計分析,用One-way AVOVA 比較各組間的差異顯,采用Duncan's法進行多重比較,試驗結果用“平均值±標準誤”表示。
復合益生菌發酵棉源飼料對羔羊生長性能的影響見表1。異不顯著(P>0.05)。

試驗結果從表1 可看出,飼喂第60 天,2%發酵組與對照組之間有差異顯著(P<0.05),與對照組相比,3%和1%發酵組羔羊體重雖有提高,但差
復合益生菌發酵棉源飼料對羔羊血清抗氧化指標MDA、T-AOC、CAT、T-SOD、GSH-Px 能力的影響見表2。

表1 復合益生菌發酵飼料對羔羊生長性能的影響kg

表2 復合益生菌發酵棉源飼料對育肥羔羊血清抗氧化指標的影響
由表2 可知,2%、3%發酵組與對照組相比血清中MDA 含量差異顯著(P<0.05);3%發酵組與對照組相比血清中T-AOC活力差異顯(P<0.05),1%和2%發酵組與對照組相比血清中T-AOC 活力均有提高,但差異不顯著(P>0.05)。2%發酵組與對照組相比血清中CAT活力差異極顯著(P<0.01);3個發酵組與對照組相比血清中的T-AOC差異不顯著(P>0.05);2%發酵組與對照組相比血清中GSH-Px活力差異顯著(P<0.05),1%發酵組與對照組相比血清中GSHPx活力均有提高,但差異不顯著(P>0.05)。
棉源飼料來源豐富,產量高,成本低,含有多種營養成分。棉源飼料經過復合益生菌發酵后,可以提高飼料在動物體內的利用率,從而提高動物的生長性能。王婷研究結果表明,塔賓曲霉、巨大芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌作為復合菌劑用于發酵麥稈,可以提高綿羊的生產性能[8]。高飛用EM 菌發酵玉米秸稈、未發酵玉米秸稈、青玉米秸稈分別飼喂陜北白絨山羊,飼喂發酵玉米秸稈組日增重顯著高于其他組[9]。上述試驗結果表明,通過發酵可以改變飼料中的粗飼料水平,可促進反芻動物唾液分泌與反芻,改變瘤胃微生物菌群并提高飼料利用效率[10]。劉瑞麗等研究報道,飼料經過復合益生菌發酵之后,其對肥育豬的日增重均有增加趨勢,且超過了常規的玉米豆型日糧對照組[11]。本試驗結果表明,飼喂第60 天,2%發酵組與對照組之間差異顯著(P<0.05),與對照組相比,3%和1%發酵組羔羊體重均有提高,但差異不顯著(P>0.05);此外,經過復合益生菌發酵的棉源飼料具有成本低、生產價值高、發酵工藝簡易等優點,同時可以有效利用本地豐富的飼料資源,解決本地草畜不平衡的問題。棉源飼料經過復合益生菌發酵后質地變得柔軟,并具有芳香味,可以提高飼料的適口性,增加羔羊的采食量。
MDA 是反映細胞膜過氧化作用強弱的一個指標,也是細胞膜脂質過氧化終產物,其含量越高,表明機體受到的氧化損傷越強,可間接反映動物細胞的損傷程度以及動物機體的抗逆性,從而反映動物機體的抗氧化能力。T-AOC 能體現機體抗氧化能力總水平的一項指標,其含量與細胞的抗氧化能力呈正相關,能直接作用在自由基上或自由基的前體物上來阻止氧化應激的形成[12]。抗氧化能力被認為是血液和體液中所有抗氧化劑的累積效應[13]。CAT 是生物防御系統中的關鍵酶之一,可以清除體內過氧化氫,保護細胞免受H2O2侵害[14]。T-SOD 是生物體主要的酶抗氧化劑,是細胞避免氧化損傷的重要屏障,也是清除O2-的第一道防線[15]。GSH-Px 是一類抗氧化酶,通過還原谷胱甘肽(GSH)來還原過氧化氫物。
付曉政等研究表明,高劑量益生菌組血清過氧化氫酶水平則極顯著高于對照組(P<0.01),丙二醛含量極顯著低于對照組(P<0.01)[16]。田浪等研究表明,不同劑量的復合益生菌使黃羽肉雞血清中的T-AOC、T-SOD、CAT 的含量水平顯著提高(P<0.05),其中,中劑量組和高劑量組的T-AOC、TSOD同時顯著高于低劑量組(P<0.05),但兩組間差異不顯著[17]。徐秀景等研究報道,乳酸菌發酵飼糧顯著提高了生長育肥豬血清的T-SOD、CAT、GSHPx 和T-AOC 能力,顯著降低血清MDA 含量(P<0.05)[18]。
本試驗結果表明,棉源飼料經過復合益生菌發酵后能夠顯著提高3%發酵組羔羊血清T-AOC 能力,2%發酵組羔羊血清CAT 活力和GSH-Px 活力。本試驗結果跟前人研究結果一致。棉源飼料經過復合益生菌發酵后能夠提高反芻動物機體的抗氧化能力。
本試驗結果表明,復合益生菌發酵棉源飼料能夠提高育肥羔羊生長性能及對血清中的MDA、TAOC、CAT、T-SOD、GSH-Px 等抗氧化指標有一定的促進作用,提高育肥羔羊的抗氧化功能。總體來說,2%復合益生菌發酵棉源飼料對育肥羔羊體重和抗氧化能力促進作用最佳。