血清同型半胱氨酸，胱抑素C，超氧化物歧化酶對(duì)2型糖尿病腎病的早期診斷價(jià)值

廣圣芳，翟榮榮，王 璐，孫 磊，李存玫

(六安市人民醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科；2.腎內(nèi)科，安徽 六安237005)

糖尿病作為全世界患病人數(shù)最多的內(nèi)分泌疾病，在全世界影響著近5億人口[1]，我國(guó)更是世界第一糖尿病大國(guó)，糖尿病患者占全世界患者的1/3，隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展及人口的老齡化，我國(guó)糖尿病患病情況必然還將愈演愈烈[2]。糖尿病腎病是2型糖尿病的最常見的并發(fā)癥，也是造成終末期腎臟病的主要原因，有20%-40%的糖尿病患者將發(fā)展為糖尿病腎病，我國(guó)2011年起糖尿病腎病就取代腎小球腎炎成為慢性腎臟病最主要的病因[3,4]。糖尿病腎病最主要的早期表現(xiàn)為微量白蛋白尿，但其靈敏度與特異度均欠佳，患者腎臟結(jié)構(gòu)的改變多早于蛋白尿的出現(xiàn)，且許多患者雖有腎小球?yàn)V過率的下降但并不出現(xiàn)白蛋白尿[5]，因此,開發(fā)診斷效能更高的新型標(biāo)志物或聯(lián)合診斷指標(biāo)勢(shì)在必行，同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)及胱抑素C(cystatin C,Cys C)對(duì)糖尿病腎病的診斷價(jià)值已見諸多報(bào)道[6-8]，但其診斷效能尚待進(jìn)一步提高。鑒于此，本研究擬聯(lián)合血清Hcy、Cys C、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)三者對(duì)糖尿病腎病進(jìn)行早期診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2015年5月-2019年4月間在我院就診的糖尿病患者120例作為研究對(duì)象，并且根據(jù)尿白蛋白排出率在30-300 mg/d分為糖尿病腎病組68例和<30 mg/d單純糖尿病組52例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合我國(guó)糖尿病防治指南制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；無引起血糖或腎功能損害藥物服用史；排除標(biāo)準(zhǔn)：尿白蛋白排出率>300 mg/d的嚴(yán)重腎功能損害者；伴有嚴(yán)重臟器功能不全者；1型糖尿病；惡性腫瘤患者；其他內(nèi)分泌疾病可能影像血糖者；其他引起腎功能損害的疾病如自身免疫疾病等；有服用影響血Hcy的藥物如甲鈷胺、葉酸及其他影響Cys C及SOD的藥物；急慢性感染患者。同期選擇健康體檢者50例作為健康對(duì)照，兩組年齡、性別等基線資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 血清學(xué)檢驗(yàn)所有受試者于清晨空腹采血5 ml，離心分離血清待檢。胱抑素C檢測(cè)試劑盒(浙江伊利康生物技術(shù)有限公司 浙械注準(zhǔn)20142400156)以膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)血清Cys-C水平；同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒(北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司 京械注準(zhǔn)20172400928)以酶循環(huán)法檢測(cè)血清Hcy水平，超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒(福建福緣生物科技有限公司 閔械注準(zhǔn)20172400020)以鄰苯三酚自氧化比色法檢測(cè)血清SOD水平，所用儀器設(shè)備為BECKMAN COULTER AU5800全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，其中計(jì)數(shù)資料以百分率表示，計(jì)量資料用均值和標(biāo)準(zhǔn)差表示。計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)后使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較兩組間差異，方差不齊時(shí)使用t’檢驗(yàn)比較兩組間差異，使用敏感度、特異度及準(zhǔn)確度評(píng)估診斷效能。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糖尿病患者與對(duì)照組的血清Hcy、Cys C、SOD水平糖尿病患者的Hcy、Cys-C分別為(15.65±4.33) μmol/L、(1.45±0.38)mg/L，高于健康對(duì)照的(8.12±2.90) μmol/L、(0.84±0.21)mg/L，而SOD為(124.23±18.29)U/mL，低于對(duì)照組的(107.28±20.71)U/mL，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 兩組受試者血清Hcy、Cys-C、SOD水平

2.2 Hcy、Cys-C、SOD對(duì)糖尿病的診斷效能根據(jù)表1結(jié)果，以Hcy>15.00 μmol/L為陽(yáng)性，Cys-C>1.03 mg/L為陽(yáng)性，SOD<129.00 U/mL為陽(yáng)性，以上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，Hcy、Cys-C、SOD診斷糖尿病的靈敏度分別為68.3%、66.7%、64.2%，特異度分別為86.0%、84.0%、88.0%，準(zhǔn)確度分別為73.5%、71.8%、71.2%，并聯(lián)診斷的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度分別為80.0%、82.0%及80.6%，見表2。

表2 血清Hcy、Cys-C、SOD的診斷效能

2.3 單純糖尿病患者與糖尿病腎病患者的血清Hcy、Cys C、SOD水平糖尿病腎病患者的Hcy、Cys-C分別為(25.11±3.23) μmol/L、(3.12±0.42) mg/L，高于單純糖尿病患者的(12.65±3.12) μmol/L、(1.22±0.35) mg/L，而SOD為(106.20±21.64)U/mL，低于單純糖尿病患者的(117.58±16.83)U/mL，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3 兩組受試者血清Hcy、Cys-C、SOD水平

2.4 Hcy、Cys-C、SOD對(duì)糖尿病腎病的診斷效能根據(jù)表3結(jié)果，以Hcy>15.77 μmol/L為陽(yáng)性，Cys-C>1.57 mg/L為陽(yáng)性，SOD<100.75 U/mL為陽(yáng)性，以上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，Hcy、Cys-C、SOD診斷糖尿病腎病的靈敏度分別為91.2%、92.6%、88.2%，特異度分別為61.5%、67.3%、67.3%，準(zhǔn)確度分別為78.3%、81.7%、79.2%，串聯(lián)診斷的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度分別為85.3%、82.7%及84.2%，見表4。

表4 血清Hcy、Cys-C、SOD的診斷效能

3 討論

Hcy在體內(nèi)通過一系列依賴維生素B6的反應(yīng)轉(zhuǎn)化為半胱氨酸或甲基化為蛋氨酸，其水平與肌酐的形成密切相關(guān)，并且在腎功能受損的患者尤其是終末期腎病患者中升高，因此可以作為腎功能損害的診斷標(biāo)志物[9,10]，而Cys-C為一種低分子量的蛋白酶抑制劑，由人體內(nèi)有核細(xì)胞產(chǎn)生，因此其產(chǎn)生速度不受年齡、性別、飲食和肌肉組織含量的影響，是比肌酐更優(yōu)越的指示腎功能的標(biāo)志物[11,12]，已有許多研究探討了兩者在糖尿病腎病中的診斷價(jià)值，而SOD是機(jī)體代謝超氧化物所需要的酶，其是依賴Fe，Mn，Ni或Cu等輔助因子來催化超氧化物歧化為氧氣和過氧化氫的金屬酶家族[13]，近年來的研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激參與了糖尿病腎病幾乎所有的病理變化包括腎素-血管緊張素系統(tǒng)的信號(hào)傳導(dǎo)，慢性炎癥和腎小球及腎小管基膜增厚，足細(xì)胞功能紊亂，直至腎纖維化，而SOD在其中對(duì)腎臟結(jié)構(gòu)及功能的保護(hù)發(fā)揮了舉足輕重的作用[14]，因此其水平的下降被認(rèn)為與腎臟功能的損害有關(guān)[15]。

在本研究中，我們首先比較了糖尿病患者與健康對(duì)照血清中的的Hcy、Cys-C、SOD水平，發(fā)現(xiàn)糖尿病患者的Hcy及Cys-C水平高于健康對(duì)照而SOD低于健康對(duì)照，接下來的診斷效能分析發(fā)現(xiàn)Hcy、Cys-C、SOD診斷糖尿病的靈敏度分別為68.3%、66.7%、64.2%，特異度分別為86.0%、84.0%、88.0%，可見三者診斷糖尿病的特異度較好，但敏感度欠佳，而糖尿病屬于常見慢性疾病，更側(cè)重于對(duì)其的篩查，因此需要提高其診斷靈敏度，因此我們使用三者的并聯(lián)診斷試驗(yàn)，將其靈敏度提升至80.0%，而特異度僅降至82.0%，準(zhǔn)確度達(dá)到80.6%，可見并聯(lián)試驗(yàn)在盡量保持特異度的前提下大大提高了診斷的靈敏度。此外，我們根據(jù)Mogenson分期選取了早期糖尿病腎病患者及單純糖尿病患者[16]，進(jìn)一步探討了在糖尿病患者中三者對(duì)早期糖尿病腎病的診斷價(jià)值，發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病患者的Hcy及Cys-C水平高于單純糖尿病患者而SOD低于單純糖尿病患者，診斷效能分析發(fā)現(xiàn)Hcy、Cys-C、SOD診斷糖尿病腎病的靈敏度較好而特異度欠佳，與糖尿病的篩查相反，糖尿病腎病對(duì)患者的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單純糖尿病，需要盡可能排除陰性患者以早期對(duì)腎病患者進(jìn)行干預(yù)，因此我們使用三者的串聯(lián)診斷試驗(yàn)，使其特異度升至82.7%，極大提高了診斷試驗(yàn)的特異度及準(zhǔn)確度。

綜上，血清同型半胱氨酸、胱抑素C、超氧化物歧化酶的并聯(lián)試驗(yàn)對(duì)于糖尿病有較好診斷價(jià)值，而其串聯(lián)試驗(yàn)則更有助于糖尿病腎病的早期診斷。