宮頸高級(jí)別病變HPV感染型別分析

吳德群，劉 艷，陳 劍

(揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬揚(yáng)州市婦幼保健院，江蘇 揚(yáng)州225000)

宮頸癌是一類常見的發(fā)生于女性生殖道的惡性腫瘤，在全球的女性惡性腫瘤中發(fā)病率較高，僅次于乳腺癌，嚴(yán)重威脅著廣大女性的健康和生命。宮頸癌的發(fā)生過程是多種因素，以及多種基因長(zhǎng)期持續(xù)作用的結(jié)果，而HPV的持續(xù)性感染是導(dǎo)致發(fā)生宮頸病變及癌變的重要原因[1-3]，也是目前唯一可以預(yù)防的一種癌癥疾病[4]，目前已經(jīng)知道的HPV型別有120多余種，本文對(duì)近年來在江蘇省揚(yáng)州市婦幼保健院就診的宮頸高級(jí)別病變病人其HPV感染情況進(jìn)行調(diào)查，以分析HPV型別感染與宮頸高級(jí)別病變之間關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

2017年1月至2018年6月于本院婦科就診并已被確診為宮頸高級(jí)別病變的患者287人，患者年齡在20-70歲，均有性生活史，無全子宮切除史，所有檢查患者處于非月經(jīng)期，在檢查前2 d內(nèi)無性生活，未使用陰道藥物。登記患者的年齡，HPV檢查結(jié)果等，本研究經(jīng)過患者本人的知情同意，我院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)會(huì)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1標(biāo)本采集 進(jìn)行樣本采集時(shí)，在取樣前先用棉簽輕輕拭去宮頸表面的分泌物，然后用HPV專用宮頸刷置于宮頸口，輕輕搓動(dòng)宮頸刷使其順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3-5圈。慢慢取出宮頸刷，將其放入裝有細(xì)胞保存液的樣品管中。在管口處將多余的刷柄折斷，將刷頭留在樣本管中，旋緊管蓋，做好標(biāo)記并保持樣本管直立放置，送檢。

1.2.2HPV分型檢測(cè) 利用HPV基因分型檢測(cè)試劑盒(YZB/國(guó)6157/2014，廣東凱普生物科技股份有限公司)，采用PCR體外擴(kuò)增結(jié)合DNA反向點(diǎn)雜交技術(shù)對(duì)37種HPV型別(分別為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、26、73、82，34、40、42、44、43、55、54、57、61、67、69、70、71、72、83、84、6、11、CP8304)進(jìn)行檢測(cè)，具體操作步驟根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作，此檢測(cè)方法靈敏度高，準(zhǔn)確性好，可重復(fù)性好。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

使用SPPS20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用感染率進(jìn)行表示，采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染單一型別比較結(jié)果

全組HPV感染257例中，按單一型別統(tǒng)計(jì)共計(jì)408例中， 檢測(cè)到30種HPV亞型感染程度由高到低分別為HPV16型131例(50.97%)，HPV52型48例(18.68 %)，HPV58型45例(17.51%)，HPV33型32例(12.45 %)，HPV31型22例(8.56 %)，HPV18型17例(6.61%)，HPV39型16例(6.23%)，HPV51型13例(5.06 %)，HPV53型11例(4.30%)，HPV68型9例(3.50%),結(jié)果表明，不同HPV單一亞型感染的感染占比之間存在顯著差異，見表1。

2.2 HPV型別單一與多重感染檢測(cè)結(jié)果

全組HPV不同型別感染共257例數(shù)中，單一型別感染159例(61.87%)，二重型別感染69例(26.85%)，三重型別感染20例(7.78%)，四重型別感染5例(1.95%)，更多重型別感染4例(1.56%)，結(jié)果表明不同型別感染占比之間具存在差異，見表2。

2.3 不同年齡段HPV型別感染檢測(cè)結(jié)果

全組HPV感染共257人中，結(jié)果表明不同年齡段占比以31-50歲占絕大多數(shù)(64.21%)，見表3。

表1 HPV單一亞型感染例數(shù)及感染率

表2 HPV型別單一與多重感染例數(shù)及構(gòu)成比

表3 不同年齡段HPV型別感染例數(shù)及構(gòu)成比

2.4 針對(duì)三種疫苗中所檢出HPV型別病人感染情況比較

本調(diào)查結(jié)果中單獨(dú)感染HPV 16和/或 HPV 18亞型病人例數(shù)共有141例(54.86%)，感染HPV6、HPV11、HPV16和HPV18亞型中的一種或多種病人例數(shù)共有142例(55.25%)，感染HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33亞型中的一種或多種例數(shù)共有237例(91.51%)，其他亞型感染例數(shù)共有80例(31.13%)，見表4。

表4 不同HPV疫苗類型中HPV型別感染例數(shù)及感染率

3 討論

根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報(bào)道，全球女性每年新患宮頸癌患者約46萬例，在中國(guó)女性中每年新患宮頸癌患者約13萬例，占全球比例的29%，位居首位，嚴(yán)重威脅我國(guó)廣大女性的健康和生命[5]。宮頸癌作為目前唯一能夠通過篩查進(jìn)行早期確診和人為預(yù)防的惡性腫瘤，有效的進(jìn)行篩查可以顯著降低宮頸癌的發(fā)病率及死亡率，有著十分重要的意義。Wolf H[6]，Walboomers[7],Bosch[8]通過研究均指出HPV型別感染與宮頸癌有重要相關(guān)性，HPV的持續(xù)性感染可導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生。WHO對(duì)于診斷宮頸癌的標(biāo)準(zhǔn)中，HPV感染作為一種必要感染因素[9]，因此進(jìn)行HPV檢測(cè)在宮頸癌的篩查中有著重要作用。

HPV上的L1殼蛋白的高度表達(dá)或缺失都能夠引發(fā)相關(guān)病變，HPV上的E2蛋白是一種特殊的結(jié)合蛋白，通過E2基因進(jìn)行表達(dá)，對(duì)于病毒的復(fù)制有一定的抑制作用，E2基因斷裂后E6、E7基因不受抑制后發(fā)生過度蛋白表達(dá)，結(jié)合P53形成復(fù)合體，P53是一種抑癌基因，被形成復(fù)合體后失活，從而導(dǎo)致宮頸癌病變[10,11]。

HPV不同型別感染有一定的地域相關(guān)性，地理環(huán)境以及所處的社會(huì)區(qū)域的差異使得HPV感染型別存在差異，不同的感染型別具有不同的致病性[12]，在本研究HPV單一亞型感染中，發(fā)現(xiàn)HPV16亞型在揚(yáng)州市地區(qū)是所有單一亞型感染占比例最高的亞型，其次是HPV52、HPV58亞型。國(guó)外研究表明HPV16型別感染與宮頸高級(jí)別病變以及宮頸癌病變關(guān)系最為密切，致癌性最高。

多數(shù)研究報(bào)道HPV占比例最高的為單一型別感染，其次是二重型別感染，三重、四重及多重所占比例較低[13,14]。本研究中與以往的研究報(bào)道相符，單一型別的感染率最高，其次是二重型別感染。關(guān)于HPV感染的型別數(shù)與宮頸癌的病變的關(guān)系說法不一，有研究表明，多重型別感染會(huì)增加宮頸癌病變的風(fēng)險(xiǎn)[15]，但也有研究表明型別感染數(shù)與其沒有太大關(guān)系[16]，此項(xiàng)還需進(jìn)行進(jìn)一步研究。

近年來，宮頸癌病變的發(fā)生越來越趨于年輕化女性，這與整體社會(huì)對(duì)性觀念的認(rèn)識(shí)和改變，HPV感染率增加有關(guān)，本研究中年齡段在31-50歲的女性HPV感染占比最高，可以看出HPV感染在年輕婦女比較普遍，建議30-50歲的女性及時(shí)進(jìn)行HPV檢測(cè)，早早做好預(yù)防工作。

目前HPV疫苗有三種類型，分別是葛蘭素史克公司(GSK)的HPV 2價(jià)疫苗(HPV 16和HPV 18)，默沙東公司(Merck)的HPV 4價(jià)疫苗(HPV6、HPV11、HPV16和HPV18)，默沙東公司(Merck)的HPV 9價(jià)疫苗[17](HPV 6、 HPV 11、 HPV 16、 HPV 18、HPV 52、 HPV 58、 HPV 45、 HPV 31和 HPV 33)，本調(diào)查結(jié)果中二價(jià)疫苗所包含的型別感染例數(shù)為141例(54.86%)，四價(jià)疫苗所包含的型別感染例數(shù)為142例(55.25%)，九價(jià)疫苗所包含的型別感染例數(shù)共有237例(91.51%)，其它亞型感染例數(shù)共有80例(31.13%)，可見針對(duì)揚(yáng)州市女性而言九價(jià)疫苗更能有效的預(yù)防HPV感染和宮頸癌疾病的發(fā)生。值得注意的是，通過統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，在三種疫苗所包含的亞型以外，其他HPV亞型感染率也較高，建議考慮在疫苗范圍內(nèi)適當(dāng)增加HPV亞型。

綜上， HPV16型別感染對(duì)高級(jí)別病變及宮頸癌病變的影響最大，因此需要高度重視，對(duì)于HPV感染應(yīng)及早檢查。目前，三種類型的疫苗接種有一定年齡范圍限制，二價(jià)疫苗的年齡范圍為9-25歲，四價(jià)疫苗的適用年齡范圍為20-45歲，九價(jià)疫苗的年齡范圍為9-45歲，建議有條件的女性及早接種九價(jià)疫苗進(jìn)行預(yù)防。