三亞地區健康兒童血清堿性磷酸酶參考區間調查

陳垂婉，賈碧野，王槐甲，尤 昕*

(1.三亞市婦幼保健院 檢驗科，海南 三亞572000；2.延邊大學附屬醫院 檢驗科)

堿性磷酸酶是人體中普遍存在的酶，是骨骼和肝膽疾病的重要生物標志物[1-2]。通過參考區間，在個體內和個體間變異的允許范圍內進行臨床診斷。由于生長、骨代謝以及肝膽系統的變化導致兒童時期堿性磷酸酶活性的明顯升高，并具有年齡和性別依賴性的變異，特別是在嬰兒期和青春期時期。在建立堿性磷酸酶活性的參考區間時，必須考慮這些因素，以區分生理發育還是疾病所引起的變化。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取三亞市婦幼保健院2015年2月-2019年5月兒科門診體檢兒童，其體格檢查正常，近期無治療性服藥，無肝-骨-腎疾病、營養不良或肥胖的健康兒童作為研究對象。根據美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)及國際臨床化學聯合會(IFCC)聯合發布的C28-A3文件，建立本實驗室健康兒童血清ALP的參考區間。考慮到兒童血清ALP水平因隨著生長發育和青春期的變化導致不同的性別和年齡特異性，按各年齡層分組且最小可靠觀測數為120例。本研究共檢測4388名，其中男2278名，女2110名。

1.2 儀器和試劑

采用貝克曼AU 680全自動生化分析儀以及相關配套試劑、校準品和質控品檢測血清堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)。通過使用IFCC推薦標準化的比色法測定血清ALP水平，以對硝基苯基磷酸酯為底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇為緩沖液。

1.3 標本采集及檢測

空腹采集靜脈血3 ml于促凝管內，3 000 r/min離心10 min分離血清，1 h內送檢，3 h內完成檢測，剔除黃疸、乳糜、溶血標本。

1.4 統計分析

采用SPSS24.0統計軟件進行統計分析，使用Dixon法判斷離群值，將疑似極大(或極小)值與相鄰值的差D和包括極值在內的數據全距R相除，如D/R≥1/3則該極值為離群值，應棄之。如分布的一側出現2個以上疑似離群值時，選擇極值中的最小值計算，如D/R≥1/3則剔除所有疑似離群值，反之則保留。繪制分布圖以判斷資料是否服從正態分布，并采用獨立樣本t檢驗比較不同性別兒童之間ALP差異，利用單因素方差分析比較不同年齡段兒童ALP的組間差異，并判斷是否需按年齡、性別分組；將不需分組的進行合并，并確定實際分組。用非參數方法計算各分組參考區間的2.5和97.5百分位數(90%置信區間)。

2 結果

2.1 各年齡段血清ALP參考區間

本實驗研究對象共計4388名健康兒童，其中男2278名，女2110名，對各年齡段兒童血清ALP水平檢測并統計分析各個年齡段男孩、女孩參考區間(P2.5、P50、P97.5)，見表1。分別繪制各年齡階段男孩、女孩ALP水平分布圖，女孩血清ALP水平隨著年齡增長，在11歲時達到高峰，隨后呈下降趨勢；男孩在12歲時血清ALP平均水平達最高，且12-14歲期間，男孩血清ALP平均水平均高于女孩，見圖1-圖3。

圖1 各年齡段(0-14歲)男孩的血清ALP水平分布圖

圖2 各年齡段(0-14歲)女孩的血清ALP水平分布圖

圖3 各年齡段(0-14歲)男孩與女孩的血清ALP水平均值分布圖

表1 各年齡段兒童血清ALP參考區間(U/L)

2.2 三亞地區兒童堿性磷酸酶參考區間

對以年齡分組進行差異比較后進行參考區間合并。結果顯示，兒童血清堿性磷酸酶水平受年齡及性別的影響，尤其是在青春期兒童(12-14歲)血清ALP水平受性別影響有顯著差異(P<0.001)，見表2。

表2 三亞地區堿性磷酸酶參考區間(U/L)

3 討論

血清ALP的參考區間易受受性別、年齡、生長發育、飲食結構、人群所在地域等諸多因素的影響。盡管衛生部已發布了我國成人檢驗項目的參考區間[3]，多年來一直沿用成人ALP的參考區間，這影響了血清ALP在兒童中的臨床應用，尤其時兒童肝膽疾病以及骨代謝疾病的診斷。因此，建立本地區、本實驗室健康兒童人群ALP的參考區間是十分必要的。

本實驗研究對象共計4388名健康兒童，其中男2278名，女2110名，對各年齡段兒童血清ALP水平檢測并統計分析各個年齡段男孩、女孩參考區間每組樣本數均超過 120 例，符合C28-A3 要求。三亞地區0-11歲兒童ALP水平性別無顯著差異，12歲后逐漸出現性別差異。ALP水平在2-3歲兒童略低，4-11歲兒童升高并相對穩定。12-14歲兒童ALP水平逐漸呈下降趨勢，而同年齡段男孩ALP平均水平高于同齡女孩。按年齡、性別合并后的參考區間包括<1個月127-382U/L、1-12月122-413 U/L、2-3歲105-344 U/L、4-11歲113-354 U/L、12歲(男) 137-470 U/L、12歲(女) 102-360 U/L、13歲(男) 112-457 U/L、13歲(女) 75-349 U/L、14歲(男) 96-389 U/L、14歲(女) 50-285 U/L。與相關研究比較，中國兒童[4]、長春地區[5]及韓國兒童[6，7]等ALP水平變化趨勢基本一致，青春期ALP水平高于成人水平2-3倍，且維持1-2年。考慮與青春期骨骼生長有關[8]。目前我國女性的ALP參考區間為1-12歲<500 U/L，15 歲以上40-150 U/L[5]，本研究證明兒童的不同生長時期， ALP水平也不斷變化。本實驗不足之處，0-1歲的嬰兒期血清ALP水平變化需再擴充相關數據，進行更系統的數據分析，以及需進一步研究15-18歲ALP水平，使其從出生到成年整個生長發育過程，血清ALP活性水平變化。

根據性別和年齡變化，我們提供從出生到14歲的兒童堿性磷酸酶活性水平的百分位圖表。這些圖表可以準確地了解堿性磷酸酶隨年齡的變化，為兒科臨床診斷提供有力依據。