多項血清自身免疫抗體及紅細胞分布寬度對自身免疫性肝炎鑒別診斷價值分析

譚洪輝，邱振華，蕭 飛，龍則平

（1.高州市人民醫院檢驗科，廣東高州 525200；2.茂名市人民醫院檢驗科，廣東茂名 525000）

自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH)是一種出現氨基轉移酶升高，高水平γ-球蛋白及高濃度循環自身抗體，以肝門靜脈淋巴細胞浸潤以及肝臟纖維化為病理特征，以女性為多發的慢性、進行性肝臟壞死性炎癥[1-3]。AIH發病機制現尚未明確，目前研究推測是一種由免疫、遺傳、環境等多種因素間相互作用引起的慢性肝臟炎癥性疾病[4-5]。研究發現，AIH通常起病隱匿,在臨床癥狀上類似普通病毒性肝炎，但兩者治療方式不同。長期得不到正確治療的AIH患者的肝臟慢性炎癥可

發展為肝衰竭[6]，因而AIH若能得到早期鑒別診斷，正確治療，對控制AIH發展及預后有重要意義[7]。過去的AIH研究，主要是分析患者肝功能和自身免疫抗體，本課題研究主要嘗試對慢性肝炎癥狀的患者在已進行自身免疫抗體分析的基礎上，再聯合分析紅細胞分布寬度（red blood cell distribution width，RDW）水平，探討RDW及免疫抗體AIH鑒別診斷價值。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象 AIH組選自2015年1月～2019年10月在高斗市人民醫院住院的被診斷為AIH的患者73例（所選AIH病例均肝炎病毒標志陰性，診斷符合AIH 相關指南[8]），其中男性13例，女性60例，年齡61.24±13.05歲。病毒性肝炎（viral hepatitis，VH）組選自同時期收治的慢性病毒性肝炎患者80例，包括慢性乙肝40例和慢性丙肝40例，其中男性15例，女性65例，年齡60.14±14.25歲。對照組選自同期健康體檢者80例（所選對照組肝功能正常，肝炎病毒標志陰性，無自身免疫性疾病），其中男性15例，女性65例，年齡60.56±10.45歲，三組研究對象的年齡、性別和血紅蛋白含量無差異，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 儀器和試劑 血細胞檢測采用希森美康XT-4000i全自動血細胞分析儀及配套試劑進行檢測。肝功能采用日立7602全自動生化分析儀及美康生物生化試劑進行檢測。自身免疫抗體的檢測儀器及試劑盒均購自德國EUROMMUN醫學診斷公司。

1.3 檢測方法 所選研究對象均進行血細胞檢測，肝功能和四項自身免疫抗體（包括抗肝特異性胞漿抗原Ⅰ型抗體（anti hepatospecific cytoplasmic antigen type Ⅰ antibody,LCI），抗核抗體（antinudear antibody ANA），抗平滑肌抗體（anti smooth muscle antibody,ASMA），抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗體（anti soluble liver antigen/anti hepatopancreas antigen antibody,SLA/LP）檢測。LC1和SLA/LP應用免疫印跡法進行測定，結果在 EUROlineScan分析軟件中讀取，以半定量(+)為陽性。ANA和ASMA采用間接免疫熒光法進行測定，血清以1∶100，1∶320，1∶1 000用稀釋液進行倍比稀釋，檢測結果通過熒光顯微鏡進行觀察判斷。抗體滴度以≥1∶100為陽性，抗體核型根據組織或細胞內出現特征性綠色熒光進行判斷。

1.4 統計學分析 采用SPSS軟件進行統計學分析。計數資料以例數及檢出率[n（%）]表示，采用R×C表χ2檢驗。用K-S檢驗檢驗計量資料的正態性，符合正態分布的計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析；非正態分布計量資料以M（P25，P75）表示，組間差異采用Mann-WhitneyU秩和檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象四項自身免疫抗體檢測結果比較 見表1。AIH組四項自身免疫抗體檢出率均高于非AIH組，其中ANA，ASMA和SLA/LP 三項組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

表1 四項自身抗體陽性率比較[n（%）]

2.2 三組研究對象ANA抗體滴度檢出率比較 見表2。對照組和病毒肝炎組均以低滴度(≤1∶100)為主，而AIH組則以高滴度(≥1∶320)為主,三組對象高滴度(≥1∶320) ANA檢出率比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

表2 ANA滴度檢出率比較[n（%）]

2.3 三組研究對象ANA抗體核型檢出率比較 見表3。三組患者ANA抗體核顆粒型和核均質型差異有統計學意義（P＜0.05），而核仁型和胞槳型差異無統計學意義（P＞0.05）。

表3 ANA核型檢出率比較[n（%）]

2.4 三組研究對象Hb及RDW檢測水平比較 見表4。三組對象Hb差異無統計學意義（P＞0.05），有可比性。AIH組患者與非AIH組患者RDW差異有統計學意義（P＜0.05）。

表4 Hb及RDW檢測水平比較（±s）

表4 Hb及RDW檢測水平比較（±s）

項 目 AIH組（n=73）VH組（n=80）對照組（n=80）F P Hb(g/L) 119.18±15.83 121.36±16.56 123.79±15.37 1.60 0.20 RDW(%) 14.65±2.01 13.15±1.18 11.95±0.46 76.740.00

3 討論

AIH疾病呈慢性炎癥進程，通常發病隱匿，大部分AIH早期缺乏特異性臨床癥狀，AIH的臨床診斷和治療仍然面臨巨大挑戰[9]。目前未完全明了AIH發病機制，但免疫耐受機制失衡，過度自身免疫反應在其發病中作用已日漸明確[2]，AIH患者血清中出現多種高水平的自身抗體[10]引起機體過度的自身免疫反應，肝臟免疫平衡被打破，多種免疫細胞、免疫分子被激活，各類炎癥細胞和趨化因子釋放至肝臟[11-12]引起免疫性肝損傷，導致自身免疫性肝炎。

AIH患者出現自身免疫抗體是其一個顯著臨床特征[13]，LC1，ANA，ASMA和SLA/LP均是AIH的主要自身抗體[10]，但和其他自身免疫疾病一樣，AIH靠單一自身抗體檢測，無法兼顧敏感度和特異度。四項自身抗體聯合檢測，敏感度和特異度能較好互補，可以較好地診斷AIH與非AIH。其中ANA作為一種無器官種屬特異性的自身抗體，在非自身免疫疾病患者和健康人群也能被檢測出，但AIH與非AIH兩者ANA滴度及核型檢出率有統計學差異，分析ANA的滴度和核型可以作為鑒別AIH和非AIH的重要指標。

近年來，RDW作為紅細胞形態參數，被認為是一種炎癥指標，可用于指征機體系統性炎癥狀態[14]。其水平的升高與許多疾病的炎癥水平呈正相關[15]。RDW也被應用于自身免疫性疾病中，可反映機體炎癥和貧血情況，可監測疾病的發生及病情的活動[16]。AIH作為一種慢性炎癥進程疾病[9]，肝功能受損及機體炎癥狀態導致造血功能低下，同時肝臟儲備功能差，原材料缺乏使血細胞成熟障礙，生成大量不成熟的小體積紅細胞[1]，使RDW明顯升高，因此RDW對AIH具有潛在的鑒別診斷或預后價值。

綜上所述，ANA，ASMA，SLA/LP和LC1 4項自身抗體及RDW聯合檢測，分析四項自身免疫抗體檢出率并分析ANA抗體滴度及核型，同時分析RDW水平，對AIH具有鑒別診斷價值。