廣東清遠地區兒童呼吸道感染患者三種病毒RNA檢測結果分析

羅金秀，鄒海珊，祝少鳳，胡新年，龍 輝

（清遠市婦幼保健院 a.優生與遺傳實驗診斷中心；b.檢驗科,廣東清遠 511500）

急性呼吸道感染(acute respiratory infection，ARI)是兒科常見的呼吸道傳播疾病[1-2]，嚴重威脅兒童健康，其中呼吸道病毒是ARI常見的病原體，以呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)、副流感病毒(parainfluenza virus，PIV)和腺病毒(adenovirus，ADV)最為常見。而病毒的流行具有一定的地域、季節、年齡分布[3],已有大量報道[4-6]提示不同地域病毒檢出情況存在差異，其中有相當數量的患兒感染兩種以上病毒，即混合感染，以ADV+PIV類型最常見[7],但大部分報道[8-10]都是檢測病原體的抗原或抗體。本文采用核酸雙擴增法[double amplification method (DAT) 是目前最新的呼吸道病原體檢測方法，直接檢測病原體RNA，檢出率高、準確性好]對三項病毒進行檢測，并對結果進行統計學和流行病學分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2017年3月1日～2019年2月28日清遠市婦幼保健院呼吸道疾病患兒7 007例，年齡1個月～14歲，男性4 393例，女性2 614例。

1.2 試劑與儀器 試劑采用武漢中幟生物科技有限公司研發的三項呼吸道病原體核酸檢測試劑盒。儀器為CLIA 200全自動化學發光免疫分析儀，生物安全柜，PCR擴增儀。

1.3 方法 采用核酸雙擴增法（DAT）同時檢測呼吸道疾病患兒咽拭子標本中的RSV RNA，PIV RNA和ADV RNA，當陰性對照熒光值＜1 000時，標本熒光值大于陰性10倍，判斷為陽性；陰性對照熒光值≥1 000時，標本熒光值大于陰性5倍，判斷為陽性。具體操作按試劑盒說明書。對檢測數據分年份、季度、性別、不同年齡組、不同疾病進行統計分析。

1.4 統計學分析 采用SPSS17.0進行統計學分析，當P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2017年與2018年三項呼吸道病毒RNA陽性檢出率結果 見表1。2017年和2018年（按農歷）三項呼吸道病毒RNA檢測總陽性率達25.09% (1 758/7 007)，RSV RNA陽性率最高（11.06%,775/7 007),PIV RNA次之(8.58%,601/7 007)，AID RNA最低（3.67%,257/7 007)。兩年比較三項病毒RNA陽性檢出率差異均有統計學意義（P＜0.05），混合感染陽性檢出率比較差異無統計學意義（P＞0.05)。

2.2 三項呼吸道病毒RNA四季陽性檢出率結果 見表2。本研究按農歷劃分四季，春（3，4，5月）、夏（6，7，8月）、秋（9，10，11月）和冬（12，1，2月），RSV在冬季陽性率最高（16.85%），春季次之（10.46%），四季陽性率比較差異均有統計學意義（均P＜0.05）；PIV和ADV病毒RNA四季陽性率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 三項呼吸道病毒RNA兩年陽性檢出率結果[n（%）]

表2 三項呼吸道病毒RNA四季陽性率檢出結果[n（%）]

2.3 三項呼吸道病毒RNA不同性別陽性檢出率結果 見表3。三項呼吸道病毒RNA及混合感染不同性別陽性檢出率比較差異均無統計學意義（均P＞0.05)。

表3 三項呼吸道病毒RNA不同性別陽性率檢出結果[n（%）]

2.4 三項呼吸道病毒RNA不同年齡段陽性檢出率結果 見表4。RSV 0～1歲陽性率最高（15.41%），PIV 6～9歲陽性率最高（11.89%），ADV 3～6歲最高（6.38%），三項病毒各年齡段陽性率比較差異均有統計學意義（P＜0.05)，不同年齡段混合感染陽性率比較差異無統計學意義（P＞0.05)。

2.5 三項呼吸道病毒RNA不同呼吸道疾病中的陽性檢出率結果 見表5。在不同呼吸道疾病中三項病毒RNA陽性率檢出率比較差異均有統計學意義（均P＜0.05）。肺炎RSV陽性率最高（14.68%）,支氣管炎PIV陽性率最高（10.49%）,上呼吸道感染ADV陽性率最高（10.98%），肺炎三項病毒RNA總陽性率最高（29.03%，1 386/4 774），支氣管炎次之（25.84%，69/267)。

表5 不同疾病三項呼吸道病毒RNA陽性檢出率結果[n（%）]

3 討論

RSV是全球嬰幼兒最重要的急性下呼吸道病毒病原體，流行面廣，發病率高，是引起小兒病毒性肺炎最常見的病原體,我國每年都有數千萬因RSV感染住院的嬰幼兒，其癥狀有支氣管哮喘、間質性肺炎及毛細支氣管炎，且病毒有復發性高、傳染性強等特點。PIV主要引起下呼吸道感染，因感染后免疫力低，易反復感染，其致病性僅次于RSV。ADV感染癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎，同時伴有發熱、寒戰、頭痛和肌肉痛等，嬰幼兒患腺病毒肺炎，病情重，病死率高，無特效治療，做好給患者早期診斷和治療尤為重要。

本文兩年的流行病學分析：三項病毒2017年與2018年陽性率差異有統計學意義（P＜0.05),與氣候和醫院防御措施有關；RSV是有季節性的，易于在冬天和早春感染并引起長達5個月的流行期，與報道相似[11-12]，因為清遠市屬亞熱帶季風氣候,雨水資源豐富，PIV和ADV四季陽性率差異無統計學意義；三項病毒不同性別陽性率比較差異均無統計學意義，與報道相同[13]；RSV陽性率0～1歲嬰幼兒最高,陽性率隨著年齡的增大而減少，是因為嬰幼兒在1歲之前免疫系統不完善，PIV陽性率6～9歲兒童最高，可能與這年齡段免疫系統有關，ADV陽性率3～6歲兒童最高，與這階段兒童幼兒園生活有關；肺炎RSV陽性率最高，與RSV復發性高有關，支氣管炎PIV陽性率最高，上呼吸道感染ADV陽性率最高；混合感染在重癥肺炎中最常見，與病情嚴重程度有關。

清遠市保健院是清遠地區最具規模的兒童醫院，每年都有大量的呼吸道感染患兒前來就醫，收集2017年RSV,PIV和ADV的檢測結果，通過本研究得到了數據后，2018年對各病毒進行了有效的預防和控制工作，使得三項病毒陽性率都得到下降，疾病也得到了在早期診斷和早期治療。所以，通過對地區兒童RSV,PIV和ADV流行情況分析，可以準確地了解三項呼吸道病毒在該地區流行特點，為臨床提供科學的數據資料，更好地做好治療和預防工作。但本研究時間還不夠長，今后還要繼續進行下去，為臨床提供更多的資料。

綜上所述，各地區因所處的地理位置、氣候、環境等因素不同，RSV，PIV和ADV陽性率在不同地區存在差異和不同的流行特點，因此，對該地區的RSV，PIV和ADV流行情況進行分析對于呼吸道感染疾病的治療和預防都非常重要。