92例新冠肺炎病毒感染患者早期外周血白細胞形態(tài)分析

朱傳新，周玉平，何 艷，周 琴（咸寧市第一人民醫(yī)院，湖北咸寧437000）

嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的COVID-19 疫情發(fā)展迅速，4月13日全球累計確診184 萬，嚴重威脅到了人民的生命安全與身心健康[1]。COVID-19 是目前全球面臨的一種新發(fā)傳染病，其來源、病理機制、治療策略等諸多方面尚未完全明了，在疾病的發(fā)生發(fā)展和治療過程中，白細胞檢查對于監(jiān)測患者的疾病變化及治療效果的評價非常重要，多個診治方案均要求定期對患者進行白細胞檢查。全自動血細胞分析儀的廣泛使用極大地提高了白細胞計數(shù)的工作效率，由于方法學(xué)的局限性和白細胞形態(tài)的多樣性, 仍需配合血涂片白細胞形態(tài)學(xué)檢驗, 以提高血液檢查的準確性[2]。本研究通過對比COVID-19 組、非COVID-19 組的外周血白細胞分類和形態(tài)特征，為臨床早期診斷及治療新冠肺炎提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 回顧性收集2020年1月26日～2月26日我院發(fā)熱門診收入院的所有疑似COVID-19的病毒性肺炎患者351 例。收集患者一般臨床資料，所有患者進行血液分析、外周血細胞形態(tài)、胸部CT、呼吸道咽拭子甲型流行性感冒（流感）和乙型、副流感病毒抗原篩查，單純皰疹病毒、呼吸道合胞病毒等病毒抗體IgM 檢測。患者均采鼻咽拭子送咸寧市疾病控制中心進行新型冠狀病毒（SARSCoV-2）核酸檢測各2 次。依據(jù)《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第六版）》[3]最終351 例中92 例確診為COVID-19 患者（COVID-19 組）及259 例為非COVID-19 的病毒性肺炎患者（非COVID-19 組）。經(jīng)對比，兩組間發(fā)病天數(shù)無差異的情況下男女所占比例、發(fā)病年齡和胸部CT 結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者一般情況比較

1.2 儀器和試劑 血細胞分析儀為深圳邁瑞生物醫(yī)療電子服份有限公司生產(chǎn)的全自動血液細胞分析儀，試劑為其配套試劑。血細胞形態(tài)的顯微鏡為南京康是福科技實業(yè)有限公司生產(chǎn)的Olympus BX41TF 型，染色液為珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的瑞氏染色液。

1.3 方法 收集351 例患者的年齡、性別、胸部CT 病毒性肺炎表現(xiàn)情況，采靜脈EDTA-K2抗凝血查血細胞分析，檢測白細胞計數(shù)（WBC）、中性粒細胞比率（NEU%）、嗜酸性粒細胞比率（EOS%)、嗜堿性粒細胞比率（BAS%）、淋巴細胞比率（LYM%）和單核細胞比率（MONO%），推片染色鏡下觀察血細胞形態(tài)，計算異常淋巴細胞比率（異淋%）、中性粒細胞桿核比率（Nst%）、中性粒細胞桿核與分葉核之比（Nst/Nsg）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計分析。連續(xù)性變量行方差齊性檢驗，組間比較采用獨立樣本t檢驗；非正態(tài)分布資料以M(P25,P75)表示，采用秩和檢驗。分類變量用n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。雙側(cè)P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者白細胞分類比較 見表2。與非COVID-19 組相比，COVID-19組異淋%，NEU%，Nst%，Nst/ Nsg 較高，EOS%，LYM% 較低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t為4.037～61.209，均P＜0.05）；MONO%，BAS%差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t為3.008，2.534；P為0.257，0.360）。

表2 兩組患者白細胞分類比較[M（P25，P75）]

2.2 兩組患者白細胞形態(tài)的比較 見表3。與非COVID-19 組相比，COVID-19 組白細胞間接計數(shù)較低，NEU，EOS，LYM，異淋，MONO 形態(tài)異形多樣且明顯。

表3 兩組患者白細胞形態(tài)的比較

3 討論

SARS-CoV-2 主要攻擊呼吸系統(tǒng)，其中肺是主要的受損器官，心、肝、腎等器官可能沒有受SARS-CoV-2 攻擊或者不是SARS-CoV-2 主要攻擊器官，但這些器官相關(guān)白細胞檢查對于疾病的進展程度及治療的評價非常重要[4]。本研究對比了COVID-19 患者、非COVID-19 患者的年齡、性別和胸部CT 病毒性肺炎表現(xiàn)，結(jié)果表明，與非COVID-19 組相比，COVID-19 組男性比例偏高，年齡偏大，胸部CT 病毒性肺炎表現(xiàn)比例偏高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2/t為7.027～21.551，均P＜0.05）。說明老年男性患新冠肺炎發(fā)病率較高，隨著年齡增長，機體抵抗力和免疫力下降，患高血壓、糖尿病等慢性疾病增多，男性中吸煙及飲酒的比例遠高于女性，女性雌性激素對血管內(nèi)皮保護作用和天然抗病毒能力強，因此老年男性肺部情況較差，較容易感染SARS-CoV-2[5]。SARS-CoV-2 感染患者傳染性強，傳播速度快，胸部CT 病毒性肺炎表現(xiàn)早，明顯，進展快[6]。COVID-19 患者血細胞分析中白細胞分類常出現(xiàn)異常結(jié)果報警，需進行血涂片白細胞形態(tài)顯微鏡復(fù)檢，白細胞手工分類、閱片能直觀、準確、快速反映白細胞數(shù)量和質(zhì)量[7]。NEU 在白細胞中含量最高，占50%～70%，是吞噬并殺死入侵人體病毒的第一道防線。LYM 占20%～40%，參與機體的細胞和體液免疫功能，是病毒感染的效應(yīng)細胞。感染SARS-CoV-2 患者產(chǎn)生一系列免疫反應(yīng),致炎因子明顯增多，NEU，Nst 增多，免疫功能受損，LYM 明顯減少[8]。Nst，Nst/ Nsg，NEU 是最簡單、方便、靈敏反映機體炎癥狀態(tài)指標[9]。本研究發(fā)現(xiàn)COVID-19 患者早期白細胞減少或正常，而Nst 增高，NEU 出現(xiàn)核左移。隨病情進展Nst%，Nst/ Nsg ，NEU%逐漸增大，急性期大于恢復(fù)期。COVID-19 組LYM%＜20%占32%，LYM%20～30% 占63%，隨著病情進展，COVID-19 組LYM%進行性下降，甚至降到1%，異淋%增高[10]。COVID-19 患者早期EOS%下降尤為明顯[11-12]。92 例患者中40 例（43.5%）EOS%為0，而非COVID-19 組，僅7%出現(xiàn)為0。與非COVID-19 組相比，COVID-19 組異淋%，NEU%，Nst%和Nst/ Nsg 較高，EOS%，LYM%較低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t為4.037～61.209，均P＜0.05）；MONO%，BAS%差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t為3.008, 2.534,P為0.257, 0.360）。文獻中尸檢發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2直接攻擊全身免疫系統(tǒng)，對白細胞破壞、毒性強，免疫攻擊大和炎癥風(fēng)暴[13]。與非COVID-19 組相比，COVID-19 組白細胞間接計數(shù)較低，NEU, EOS, LYM，異淋、MONO 形態(tài)異形多樣且明顯。NEU 以桿核增多，核棘突2～3 個多見，胞漿顆粒大小不一；EOS 少見，可見胞膜破裂；淋巴胞體偏小，可見核質(zhì)發(fā)育不平衡,顆粒深染粗大,核不規(guī)則, 有切跡,異淋細胞核易見切跡，以花瓣核異淋和裂隙核異淋為主；MONO 核不規(guī)則, 空泡變性明顯，顆粒增粗。白細胞正常或偏少，LYM%,EOS%減少，LYM 核異形可能是一個潛在的可靠的實驗室預(yù)測SARS-CoV-2感染的參數(shù)[14]。外周血白細胞分類和形態(tài)分析對新冠肺炎早期診斷有很大價值，值得臨床借鑒。