匹伐他汀鈣片的試制及體內外研究

胡晶晶，侯冰潔，鐘雪彬，黃 洋，李 緯

(南京長澳醫藥科技有限公司，江蘇 南京 210038)

匹伐他汀鈣是第3代羥甲戊二酰輔酶A還原酶抑制劑(HMG-CoA)，具有顯著降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)效應，其作用與阿托伐他汀鈣相似，主要用于治療高膽固醇血癥，此外其安全性和耐受性良好，已在日本、美國、中國獲準上市。本文采用粉末直接壓片的工藝[1-3]，其工藝簡單，質量可控，利于重現和大生產操作，生產設備要求不高。本文采用此種工藝制備樣品，并與原研品進行體內外一致性的評價。

急性淚囊炎是眼科常見的急癥，通常是在慢性淚囊炎的基礎上，由于各種因素例如身體抵抗力減弱、感染較強的毒力的細菌等，導致淚囊和周圍組織的急性化膿性炎癥。淚囊位于危險三角區，淚囊的急性炎癥常致周圍組織受累且膿腔壓力高 [1]，如果處理不當，炎癥容易擴散致眶蜂窩織炎、顱內感染等，嚴重時可危及生命。傳統治療方案為：先在局部及全身使用足量抗生素控制炎癥。如炎癥不能控制，膿腫形成，則切開排膿，置入引流條，傷口愈合炎癥完全消退后按慢性淚囊炎處理[2]。這樣病人不能快速解除危險三角處的急性炎癥，痛苦持續時間較長，風險較大。本研究旨在觀察急性淚囊炎行鼻內鏡下鼻腔淚囊吻合術的手術效果，現報告如下。

1 材料和設備

1.1 材料

自制品(批號：190101，南京長澳制藥有限公司)，原研品(批號：JY5S，日本興和株式會社)，纖維素-乳糖、低取代羥丙纖維素、羥丙甲纖維素、堿性穩定劑、硬脂酸鎂、歐巴代等輔料；卡馬西平(批號：100142-201105，含量99.8%，中國食品藥品檢定研究院)，肝素鈉；甲酸、甲醇、乙腈均為色譜級。

1.2 儀器設備

ZP-10A旋轉壓片機(北京國藥龍立有限公司)、高效包衣機(深圳信宜特有限公司)、RC12AD智能溶出儀(天津天大天發有限公司)、U3000高效液相色譜儀(戴安公司)、1290-6460A HPLC-MS/MS液相色譜質譜聯用儀(Agilent公司)，3-30k高速冷凍離心機(Sigma公司)。

2 方法和結果

2.1 自制品制備

采用粉末直接壓片工藝，將原料藥和纖維素-乳糖、低取代羥丙纖維素、羥丙甲纖維素、堿性穩定劑和硬脂酸鎂混合均勻，進行壓片、包衣，即得自制品。

2.2 體外質量考察

2.2.1 體外溶出曲線研究

色譜柱型號：Welch Xtimate XB-C18 (100×2.1 mm，5 μm)；

表1 自制品和原研品在四種溶出介質中各時間點的溶出量(n=12)

2.2.2 穩定性研究

2.3.4.3 精密度與準確度、回收率和穩定性

2.3 生物等效性研究

2.3.1.2 質譜條件

2.3.1.1 液相色譜條件

將自制品與原研品進行四種不同溶出介質的溶出曲線的考察(n=12)。試驗條件：溶出介質：pH值1.0鹽酸溶液、pH值4.5醋酸鹽溶液、pH值6.8磷酸鹽溶液、純化水，轉速：50 r/min，體積：900 mL，槳法，取樣時間點：5、10、15、20、30 min，將溶出液過濾進高效液相色譜儀，按成品質量標準項下溶出度方法測定溶出量，自制品與原研品在四種溶出介質中，在15 min溶出量均到達85%，溶出行為為非常快速釋放型，無需比較f2值。具體結果見表1。

3批準確度、精密度考察樣品中， LLOQ批內的%RE為標準值的5.14%～12.60%，% CV為2.67%；除LLOQ外，其它質控樣品批內的%RE為標準值的0.07%～9.02%，% CV為0.85%～2.32%；LLOQ批間的%RE為標準值的-2.14%～18.25%，% CV為5.04%；除LLOQ外，其它質控樣品批間的%RE為標準值的-5.37%～11.60%，% CV為1.71%～2.40%。

他出院時，父親不敢給他錢，卻給他買了一大包德芙巧克力，說：“你小時候就愛吃巧克力，那時候家里沒錢，都買些最便宜的?！焙髞淼囊惶欤拥嚼^母的電話，說父親中風了。他一直以為自己恨不得父親死，可看到父親的一瞬，他知道自己真的錯了。父親昏迷不醒，幾天幾夜，他都守在父親的床邊，父親的命終于保住了，卻一直癡傻著，手腳也不會動，就會傻樂。

2.3.1 色譜和質譜條件

使用帶有ESI源的Agilent 6460 三重四級桿串聯質譜，采用正離子[4]MRM掃描。

源參數見表2,化合物參數見表3。

(2)比較兩個事件各要素,因為每個事件必須包含觸發詞,而其他要素可能缺省,不會出現,所以要根據上下文補全缺省要素,然后判斷兩事件是否具有指代關系.具有指代關系的兩事件的各要素必須一致,即指向現實中的同一實體.

她忽然打斷我。先是輕輕一笑，然后是很憂傷的表情?！巴聿鸵呀洔蕚浜昧耍绻氖虑椴⒉患?，能再多陪我一會兒嗎？我知道這很失禮，您一定以為我另有別的目的。畢竟我們一個小時前才認識，換了我也會猜疑。”

表2 源參數

表3 化合物參數

2.3.2 試驗方案

進食條件下生物等效性研究：采用單劑量口服、隨機、開放、雙周期交叉試驗設計，劑量為2 mg，2次服藥間隔7 d，受試者為男女各5名，年齡28±4.2歲，BMI指數18～24，受試者于試驗前1 d和試驗期間內均禁用酒類和咖啡類飲料，禁食過夜(至少10 h，不禁水)，受試者于服藥前30 min進食高脂餐，(0 h)和服藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24 h肘靜脈采血，置于肝素化采血管中，離心(4000 r/min，4℃，5 min)，分離上層血漿，于-25℃冰箱中保存，待測。

2.3.3 樣品預處理

取100 μL血漿樣品，加入500 μL沉淀劑(2 ng/mL卡馬西平甲醇溶液)，振蕩3 min，20000 r/min離心10 min，吸取上清液入進樣瓶，10 μL進樣分析。

2.3.4 方法學建立

以面積比(匹伐他汀鈣/內標)與匹伐他汀鈣濃度擬合成標準曲線?？疾斓?條標準曲線，標準曲線R2在0.9995～0.9999范圍內，每條標準曲線均有8各濃度點， 最低定量限(LLOQ)的%RE為4.04%～10.15%，其他濃度的%RE為-5.80%～4.92%。

每次分析前需連續進樣系統適用性樣品至少連續進樣7次，要求后6次的待測物與內標峰面積之比及其保留時間的CV(%)小于20%。

3.隱私安全問題上的挑戰。分布式數據庫用于商業交易過程中需要涉及到的商業機構互相分享數據信息，這也是現在區塊鏈技術應用尚未普及的重要原因之一，問題集中在機構之間是否愿意共享信息，共享全部信息還是有所保留。

2.3.4.2 標準曲線

2.3.4.1 系統適用性

壯藥戰骨總黃酮提取物經皮給藥對大鼠/小鼠的抗炎、鎮痛作用研究 ……………………………………… 葉 勇等（15）：2090

將自制品與原研品均采用鋁塑泡罩+復合膜袋包裝，于同等穩定性考察條件下(40℃，RH75%)放樣，考察其質量的變化，6個月的自制品較原研品含量、有關物質、溶出度均無顯著變化。

取95 μL空白血漿分別加入5 μL質控工作液(S-LLOQ，S-LQC，S-MQC，S-HQC)，配置成終濃度為0.2、0.6、6、40 ng/mL含藥血漿樣本(LLOQ，低質控濃度(LQC)，中質控濃度(MQC)，高質控濃度(HQC))，混勻后按照“2.3.3”項下方法處理。以一條標準曲線、4個質控濃度，每個質控濃度各6個樣品，組成1個分析批，在不少于兩天內運行3個分析批。

流動相：A相：0.1%甲酸水，B相：乙腈，55%B相等度洗脫，流速：0.25 mL/min，柱溫40℃，進樣量10 μL。

匹伐他汀鈣在室溫放置2 h，反復凍融3次，長期凍存(-25℃放置6天、23天及-80℃放置6天、23天)、處理后進樣盤放置24 h均穩定。匹伐他汀鈣儲備液及工作液4℃放置7天穩定，內標卡馬西平儲備液及工作液4℃放置27天穩定。

2.3.5 統計分析

首先，教師要堅持以問題為導向，建立閱讀任務臺賬。針對現階段語文閱讀教學中呈現出的高中生閱讀興趣不濃、對電子讀物感興趣、閱讀量呈下降趨勢的問題，教師要列出時間表，明確任務圖，建立閱讀任務臺賬。將閱讀書目根據文體分門別類，按照教學進度進行任務分解，通過采取必要的量化考核，實行書目閱讀銷號制，力爭讓每位學生都參與閱讀，進一步提升學生的人文積淀。

采用DAS 2.1.1 軟件系統進行藥代動力學參數的計算，主要藥代動力學參數為：AUC0-t、AUC0-∞、Cmax、Tmax、t1/2、AUC0-t/AUC0-∞、Vd、CL、F。其中，Cmax和Tmax均以實測值表示。AUC0-t用梯形法計算(t 是最后一次可測濃度的取樣時間)。AUC0-∞按AUC0-∞= AUC0-t+ Ct/z(Ct為最后一點的血藥濃度，z用對數血藥濃度-時間曲線末端直線部分的斜率求得)；t1/2用公式t1/2=0.693/λz計算。

西芳寺庭園給人印象最深的莫過于石與石組的布局與配合。在西芳寺西北面山腰上一塊不大的地方，夢窗用白色砂礫耙出波紋，用幾組天然石作為役石（角色石）：坐禪石、須彌石、龜石、鶴石、蓬萊石等，創作了洪隱山枯山水石組，被認為是現存最早的枯山水范例。夢窗主張“草木國土，悉皆成佛”，自然界的一切事物皆是神靈的寄托。

2.3.6 生物等效性結果

民營企業面臨融資難融資貴，而銀行也受制于資本約束和負債約束，放貸能力有限。資金面緊張、獲取存款難度加大、負債成本上升、運營成本高企等，是此次調研中各家銀行反映的共性問題。

結果(表4、5)表明：受試制劑和原研制劑無顯著差異，Cmax90%置信區間為94.83%～105.77%，AUC0-t90%置信區間為99.09%～105.67%，AUC0-∞90%置信區間為96.02%～104.66%，均落在接受范圍80.00%～125.00%之內，說明受試制劑和原研制劑具有生物等效性。

表4 空腹試驗藥代動力學參數匯總統計數據

表5 空腹試驗藥代動力學參數方差分析結果

3 討論

采用粉末直接壓片工藝制備的樣品體外溶出曲線與原研品一致，均為非?？焖籴尫判?。體內生物等效性實驗結果顯示自制品與原研品生物等效。