復方葡萄籽原花青素制劑的安全性及抗氧化功能研究

張志紅，李新愛

(1.榮成市人和中心衛生院，山東 威海 264306；2.解放軍第960醫院南院區，山東 濟南 25002)

隨著人口老齡化的加劇，衰老已成為全球醫學研究的熱點問題，其中不乏對衰老機制及抗衰老藥物的研究。一直以來人們便有追求延年益壽、青春永駐的理想，因中醫、中藥抗衰老有著兩千多年的豐富經驗，其以獨特的方法和理論體系占有一席之地。枸杞、靈芝作為傳統中藥，其提取物均含有豐富的活性成分—多糖，現代研究證實，枸杞多糖、靈芝多糖均具有較強的抗氧化、抗衰老作用[1-4]。中藥紅景天由申佳佳等經試驗證實，其功效成分紅景天苷能提高動物體內的不同器官組織的SOD、GSH-Px活性，降低體內的過氧化物水平而發揮抗衰老作用[5]。

此外，葡萄籽原花青素的抗氧化活性一直被研究界所推崇，其作為一種雙黃酮衍生物結構的天然多酚類，抗氧化能力是維生素E的50倍，維生素C的20倍[6]。葡萄籽原花青素的多個酚羥基，在體內被氧化釋放出H+，競爭性地與自由基及氧化物結合，從而防止脂質氧化，阻斷自由基鏈式反應，降低血清中MDA含量，增強SOD、GSH-Px活性，從而強化機體的抗氧化系統[7]。

文章選擇枸杞提取物、靈芝提取物、紅景天提取物、葡萄籽提取物作為原料制成復方葡萄籽原花青素制劑，設計實驗探究其安全性和抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 受試樣品及服用方法

復方葡萄籽原花青素制劑由本實驗進行制備，人體推薦日用量為2.2g/60kg.bw。該受試樣品原料由枸杞子提取物、紅景天提取物、靈芝提取物、葡萄籽提取物按37∶36∶18∶9經混合工藝制成。

1.2 納入人群

選擇在年齡45～60歲自愿受試者，性別不限，身體健康良好，無長期服藥史，無重要臟器既往病史的人員。此外，需排除短期內服用與抗氧化作用功能有關的食品藥品、未按規定服用受試樣品者。

1.3 設計與分組

試食實驗設計自身和組間對照，依據雙盲法進行。實驗前測定受試者血清中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)水平。根據實驗結果，隨機分為試食組和對照組。為保證組間的可比性，對年齡、性別、生活飲食習慣等影響結果的因素進行均衡性檢驗，實驗每組受試者60例，連續服用120 d，試驗期間依據之前的飲食習慣。

2 觀察指標

2.1 一般指標

試食前詳細了解受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、體重、血壓、心率等基本的健康情況。

2.2 功效性指標

在試驗開始及結束時各檢測1次MDA、SOD、GSH-Px水平。

2.3 安全性指標

受試者進行血常規、尿常規、糞便常規檢查、血液生化檢測(血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、血糖(GLU))、以及進行心電圖、腹部B超等檢查，各項指標在試驗開始及結束時各檢測1次。

3 結果判定

實驗結果依據國家食品藥品監督管理總局《關于印發抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知(國食藥監保化[2012]107號)》附件1 抗氧化功能評價方法進行判定。此外，實驗前后自身比較和試驗后組間比較，功效性指標差異具有顯著性，該指標判定為陽性。

4 統計學處理

5 結果

5.1 一般觀察

試食組和對照組經過120 d試食實驗后，有效人數各為56例，受試者一般基礎性指標(如精神、睡眠、飲食、大小便)均未見異常，狀況均良好。試食組和對照組男女比例分別為26/30，27/29，年齡分別為(46.23±6.78)歲、(46.18±7.12)歲。

5.2 功效性觀察

試驗前后受試者的血清MDA、SOD、GSH-Px水平變化情況見表1。試食組和對照組試驗前各指標相比較，兩組水平接近，差異無顯著性(P>0.05)。試驗后試食組較同期對照組和自身比較，血清中MDA活性下降，SOD、GSH-Px活性明顯升高，差異具有統計學意義(P<0.05)。

表1 試食前后受試者的MDA、SOD、GSH-Px水平變化情況

5.3 安全性觀察

由表2實驗結果可知，試食前后試食組和對照組體重、血壓、心率、血常規、尿常規、糞便常規、心電圖、腹部B超等檢查均未見顯著改變，無統計學意義(P>0.05)；血生化各指標試驗前后試食組和對照組經比較，均無顯著變化，差異無統計學意義(P>0.05)，說明本實驗試食樣品和對照樣品對受試者的肝腎功能及代謝等無明顯影響，對健康無損害作用。

表2 試食前后受試者的安全性指標的變化

6 討論

本實驗受試物為枸杞子提取物、紅景天提取物、靈芝提取物、葡萄籽提取物經混合制成，各原料均具有抗氧化、延緩衰老的作用。現代研究表明，氧化脅迫是導致生物機體衰老的一個重要原因，此外還與很多機體疾病直接相關，如酒精含量過高引起的肝損傷及老年癡呆癥等[8]。隨著機體細胞內氧化損傷的累積，細胞機能開始減弱，從而引發各種慢性疾病的發生，最終導致機體的衰老及死亡。廣泛存在生物體內的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)均是清除超氧陰離子自由基的酶，其能維持機體氧化-抗氧化平衡，能阻止超氧陰離子自由基對細胞的毒害作用[9]。丙二醛(MDA)則是細胞膜脂質過氧化的終產物之一，其含量可間接估計脂質過氧化的程度。因此，SOD、GSH-PX、MDA均可反映機體的抗氧化能力[10]。

本實驗試食期間，不改變兩組受試者的精神、睡眠、飲食等情況，實驗消除了組間差異，保證結果的公平和客觀。由實驗結果可知，兩組受試者體重、血壓、心率、血常規、尿常規、糞便常規、血生化、心電圖、腹部B超等均未見明顯損害，說明受試物具有安全性。實驗后MDA水平明顯下降，SOD、GSH-Px水平明顯升高，與實驗前及對照組比較，差異具有統計學意義(P<0.05)。實驗結果表明，受試樣品復方葡萄籽原花青素制劑對人體具有明確的抗氧化作用。