SPE-GCMS/MS 法測(cè)定糧食中的 10 種有機(jī)磷

楊眉 宋明雄 業(yè)潤(rùn)澤

[摘要]本試驗(yàn)建立了氣相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定糧食中10種有機(jī)磷（敵敵畏、毒死蜱、甲基毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟松、甲基嘧啶磷、樂(lè)果、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、久效磷）的方法。樣品經(jīng)固相萃取和全平行濃縮儀前處理后，用乙酸乙酯復(fù)溶，過(guò)濾后進(jìn)入TSQ9000-GC/GC聯(lián)用儀測(cè)定，用Auto-SRM方法優(yōu)化，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，10種有機(jī)磷線性關(guān)系良好（R>0.99），加標(biāo)回收率為99.1%～102.5%，精密度RSD為3.02%～5.92%。本方法簡(jiǎn)便、快捷，結(jié)果更加準(zhǔn)確，并成功應(yīng)用于實(shí)際糧食樣品中10種有機(jī)磷的測(cè)定。

[關(guān)鍵詞]TSQ9000-GCMS/MS聯(lián)用;Auto-SRM方法;糧食;固相萃取;有機(jī)磷

中圖分類號(hào)：S481.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.202005

中國(guó)是農(nóng)藥生產(chǎn)和使用大國(guó)，農(nóng)藥廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)之中，同時(shí)農(nóng)藥濫用和不規(guī)范使用現(xiàn)象比較普遍，所以糧食中農(nóng)藥殘留的問(wèn)題也比較突出。日常檢測(cè)中，農(nóng)殘監(jiān)測(cè)的任務(wù)也相當(dāng)繁重，當(dāng)前我國(guó)對(duì)于農(nóng)殘監(jiān)測(cè)的方法標(biāo)準(zhǔn)主要為GC、GCMS[1-4]等，隨著氣相色譜三重四級(jí)桿質(zhì)譜的普及，GC-MS/MS的檢測(cè)方法以其高選擇性、高靈敏度、高通量等特點(diǎn)越來(lái)越受到檢測(cè)工作者的歡迎。對(duì)于串聯(lián)質(zhì)譜來(lái)說(shuō)，方法優(yōu)化及建立是非常重要的部分。常規(guī)方法的開發(fā)需要對(duì)每個(gè)未知化合物挑選母離子、子離子以及優(yōu)化碰撞能，未知化合物越多，花費(fèi)的時(shí)間也就越多[5-8]。本文運(yùn)用TSQ9000三重四級(jí)桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的AotoSRM功能，自動(dòng)優(yōu)化離子對(duì)信息及碰撞能量，使整個(gè)方法建立部分更加簡(jiǎn)單方便。在現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法中，同時(shí)測(cè)定10種有機(jī)磷的標(biāo)準(zhǔn)有《糧谷中475種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（GB 23200.9—2016）和《植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）。本文參考2種標(biāo)準(zhǔn)方法，建立了同時(shí)測(cè)定10種有機(jī)磷的氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法。

1 材料與方法

1.1 儀器

TSQ9000型三重四級(jí)桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：賽默飛世爾科技公司;TG-5SilMS型色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）;Raykol Fotector Plus型全自動(dòng)固相萃取儀;RayKol AutoEVA-60型全自動(dòng)氮吹平行濃縮儀：睿科集團(tuán)股份有限公司;離心機(jī)：長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司，轉(zhuǎn)速不低于4 000r/min;分析天平：感量0.01mg，梅特勒-托利多集團(tuán)。

1.2 主要試劑和材料

1.2.1 試劑

乙腈（色譜純）、乙酸乙酯（色譜純）、環(huán)己烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉、硫酸鎂。

1.2.2 材料

固相萃取柱：石墨化碳黑/氨基復(fù)合柱，500mg/500mg，容積6mL。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 樣品前處理

稱取5g試樣（精確至0.01g）于100mL塑料離心管中，加10mL水混勻，靜置30min。加入20mL乙腈，4 000r/min離心2min，加入6g氯化鈉劇烈振蕩數(shù)次，繼續(xù)4 000r/min離心5min。準(zhǔn)確吸取5mL上清液于25mL試管中，氮吹至干。用5mL乙腈-丙酮溶液預(yù)洗固相萃取柱，棄出流出液。將待凈化試樣用3mL乙腈-丙酮溶液洗滌至固相萃取柱中，再用4mL乙腈-丙酮溶液洗滌，收集洗滌液，用25mL乙腈-丙酮溶液淋洗小柱，收集上述所有流出液至60mL試管中，40℃氮吹至干。加入2.5mL乙酸乙酯復(fù)溶，用有機(jī)相微孔濾膜過(guò)濾，用于測(cè)定。

2.2 樣品基質(zhì)溶液

選取空白樣品，用本文2.1部分樣品前處理方式得到的空白基質(zhì)溶液。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

2.3.1 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液

取10種有機(jī)磷的單標(biāo)，用丙酮稀釋。中間儲(chǔ)備液的濃度為500ng/mL。中間儲(chǔ)備液在-20℃冰箱中冷凍保存。

2.3.2 工作標(biāo)準(zhǔn)溶液

取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，以空白基質(zhì)液依次稀釋成濃度為20.0ng/mL、40.0ng/mL、60.0ng/mL、80.0ng/mL的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.4 儀器方法

2.4.1 氣相方法

色譜柱溫度：40℃保持1.5min;以25℃/min速度持升溫至90℃，保持1.5min;以25℃/min速度升溫至180℃，以5℃/min升溫至280℃;以10℃/min升溫至300℃，保持5min。載氣：氦氣，純度≥99.999%;恒流：流速1.2mL/min。進(jìn)樣口溫度：270℃;進(jìn)樣量：1.0μL;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。

2.4.2 質(zhì)譜方法

電子轟擊源：70eV;離子源溫度：300℃;傳輸線溫度：280℃;溶劑延遲：4min;采集方式：Timed-SRM;SRM反應(yīng)監(jiān)測(cè)：每種有機(jī)磷分別選取一對(duì)定量離子、一對(duì)定性離子。每組所有需要檢測(cè)的離子對(duì)按照出峰順序分時(shí)段分別檢測(cè)。

2.5 數(shù)據(jù)處理

使用Thermo變色龍軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行采集、處理和報(bào)告分析。AutoSRM自動(dòng)優(yōu)化化合離子信息及碰撞能量。第一步：選擇母離子，進(jìn)行全掃描（Full Scan）進(jìn)樣，找到對(duì)應(yīng)化合物的色譜峰，挑選質(zhì)量數(shù)較大、離子豐度高的特征離子作為母離子。第二步：選擇子離子，進(jìn)行子離子掃描（Product Ion）進(jìn)樣，挑選出豐度高的離子作為特征子離子。第三步：優(yōu)化碰撞能，選擇Target模式進(jìn)行SRM碰撞能優(yōu)化，在得出的數(shù)據(jù)中，選擇響應(yīng)最高處的CE值為最優(yōu)碰撞能量。10種有機(jī)磷的離子對(duì)和最優(yōu)碰撞能量如表1所示，SRM質(zhì)量色譜圖如圖1所示。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)采用SPE前處理，TSQ-9000進(jìn)樣，Atuo-SRM方法掃描，使10種有機(jī)磷在35.6min內(nèi)一針完成分析，結(jié)果表明，該方法中10種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好，線性相關(guān)系數(shù)R均大于0.99，回收率范圍為99.1%～102.5%，RSD范圍在3.02%～5.92%。與常規(guī)方法比較，該方法回收率好，準(zhǔn)確性高，方便快捷，能滿足糧食樣品中10種有機(jī)磷的檢測(cè)。

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