卡托普利對非酒精性脂肪肝的防治作用

齊卓芳

非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是指除酒精以外其他原因引起以肝細胞內脂肪過度沉積為主要特征的病理綜合征[1]。相關研究結果表明，NAFLD的發生機制主要是以氧化應激為主，氧化應激引起疾病發病的機制涵蓋脂肪內質網應激、線粒體脂肪酸氧化功能障礙導等，在氧化應激發生后，機體對氧化物正常的清除能力下降，久而久之會引起氧化系統、抗氧化系統失衡，進而引起肝組織損傷情況[2]。在對NAFLD的防治策略上，通常是采取轉變日常生活方式及避免肝臟損傷藥物的方式，然而這種方法的干預效果往往不理想，而在越來越多的研究中發現，卡托普利用藥可表現出良好效果，但是關于該藥物的防治作用尚且存在一些爭議[3-5]。對此本次研究就以大鼠作為試驗對象，探討了使用卡托普利對于防止NAFLD的效果，報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

研究時間起止點：2019年10月—2019年12月。選取健康的50只雄性大鼠作為研究對象，大鼠平均體質量約為（135±12）g。

1.2 方法

將試驗大鼠分成5組，每組均10只大鼠。正常組用普通的飼料進行喂養；其他組與模型組給予由87.8%普通飼料+10%豬油+2%膽固醇+0.2%膽酸鈉組成的高脂飼料進行喂養，模型組在6周后建立脂肪肝模型。其余三組在模型組飼養的基礎上分成低劑量、中劑量、高劑量卡托普利用藥組，其中低劑量組的大鼠卡托普利的用藥量為0.175 mg/100 g；中劑量組用藥量為0.25 mg/100 g；高劑量組用藥量為0.7 mg/100 g。各組大鼠均給藥6周。

在結束給藥或喂食后，均讓大鼠禁食12 h，之后對大鼠的體重進行稱重。此外對實驗大鼠在其腹腔內部注射0.4 mL/100 g濃度為1%的戊巴比妥鈉，之后在大鼠的腹部主動脈采血，置入抗凝試管后置于低溫下保存，在3 000 r/min的離心機下離心15 min分離血清，將血清置于低溫下保存。取血清用全自動生化分析儀檢查血清AST、ALT、TG、TC指標。取每組大鼠相同部位的肝組織，對選取的組織進行固定，利用蘇木精—伊紅染色，對肝組織進行病理學檢查。取大鼠的少量肝組織并研成細末，提取出總RNA進行逆轉錄，加入CYR2E1、GAPDH引物進行PCR反應，采用電泳試驗進行檢查。

1.3 觀察指標

（1）對5組大鼠血清生化指標進行檢查。（2）對比各組大鼠肝組織中mRNA表達情況。（3）觀察喂養及用藥后各組大鼠的病理變化情況。

表1 各組大鼠血清生化指標情況（±s）

表1 各組大鼠血清生化指標情況（±s）

注：*與正常組相比，P＜0．05；#與模型組相比，P＜0．05

組別 AST（IU/L） ALT（IU/L） TG（mmol） TC（mmol）正常組（n=10） 90．12±9．25 25．56±4．56 0．89±0．14 1．12±0．23模型組（n=10） 162．25±21．12* 51．12±8．41* 1．78±0．26* 2．41±0．42*低劑量組（n=10） 140．15±15．56*# 43．26±7．41*# 1．51±0．21*# 2．01±0．38*#中劑量組（n=10） 123．26±14．02*# 36．61±7．02*# 1．28±0．17*# 1．71±0．32*#高劑量組（n=10） 102．26±11．45*# 31．12±6．01*# 1．06±0．16*# 1．37±0．28*#

表2 各組大鼠肝組織CYR2E1 mRNA表達情況（±s）

表2 各組大鼠肝組織CYR2E1 mRNA表達情況（±s）

注：*與正常組相比，P＜0．05；#與模型組相比，P＜0．05

CYR2E1正常組（n=10） 1．48±0．25模型組（n=10） 2．86±0．48*低劑量組（n=10） 2．41±0．18*#中劑量組（n=10） 2．07±0．16*#高劑量組（n=10） 1．71±0．21*#組別

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0軟件做統計學結果分析，計量資料用（±s）表示，使用t檢驗，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清生化檢查

相較于正常組，模型組各項生化指標明顯更高（P＜0.05），較模型組，低、中、高劑量組各生化指標更低，但低＞中＞高劑量組。見表1。

2.2 肝組織病理改變情況

正常組的大鼠肝細胞未出現明顯的炎性反應；模型組大鼠肝臟出現彌漫性脂肪變性，肝細胞水腫；低劑量組肝脂肪變性、炎癥程度同模型組類似物明顯減輕；中劑量組較模型組肝細胞脂肪變性、炎癥程度有一定程度的減輕；高劑量組少量脂肪變性，多數的肝細胞排列正常，同正常組對比差異小。

2.3 肝組織mRNA表達情況

模型組CYR2E1 mRNA較正常組高，同模型組比較，低、中、高劑量組表達下降，高劑量組下降最明顯。見表2。

3 討論

當前飲食及生活改變導致脂肪肝發生增加，而脂肪肝的發病率增加也使得關于疾病的防治也成為臨床中廣泛關注的重要話題，相關研究表明對NAFLD采取卡托普利具有一定的防治作用，而防治作用效果尚存爭議[6-9]。在本次研究中，將大鼠為試驗模型進行了相關的探討，結果顯示血清生化指標上，模型組較正常組明顯提高，使用不同劑量的卡托普利在血清生活指標上均降低，但相比之下高劑量組降低最明顯，這表明卡托普利對NAFLD具有很好的防治效果，且用藥劑量越高防治作用也更明顯。在肝組織CYR2E1 mRNA表達上，模型組較正常組提高，但不同劑量的卡托普利用藥組均降低，同時也是高劑量組降低最明顯，這提示卡托普利可顯著減少CYR2E1 mRNA表達的表達。CYR2E1是細胞色素P450中的重要一員，在脂質氧化反應中表現出很強促氧化活性，直接參與到脂肪肝的進展中，研究顯示的卡托普利用藥降低這一物質也提示藥物對脂肪肝防治有一定作用[10-13]。病理學觀察卡托普利高劑量組的大鼠炎癥及組織水腫均明顯得到緩解，這也表明卡托普利對于改善NAFLD的病理具有滿意效果。

綜上所述，對NAFLD的大鼠，肝組織會出現脂肪變性及炎性病變的現象，而使用卡托普利能夠有效改變大鼠的病理，這提示卡托普利對于防治NAFLD的作用突出。