蒙藥延胡索生物堿的富集方法研究

曉 華 楊一泓 楊 薇 海 平 李久明 徐 寧

（內蒙古民族大學天然產物化學及功能分子合成重點實驗室，內蒙古 通遼028000）

延胡索是罌粟科紫堇屬植物延胡索的干燥塊莖，常用治療經閉痛經、腹中肝塊、產后血瘀、腹痛、疝氣作痛、跌打腫痛等，為蒙醫常用藥材，已證明其主要活性成分是延胡索乙素等生物堿類化合物[1]。目前，蒙藥延胡索中生物堿的富集方法主要采用大孔吸附樹脂技術，其純度最高可達82%[2]。離子交換樹脂技術和液- 液萃取技術可用于分離純化生物堿，其中液- 液萃取法的優點是操作簡單易行，而離子交換樹脂法只用于堿性物質的富集，但產品純度較高[3-6]。本文通過液- 液萃取技術、大孔吸附樹脂技術和離子交換樹脂技術比較，建立蒙藥延胡索生物堿的富集方法，為其進一步開發提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器及藥品

Bruker AV400 核磁共振波譜儀（德國Bruker 公司）；乙醇（分析純）；732 型強酸性陽離子交換樹脂（分析級）；延胡索購自浙江省盤山中藥材有限公司。

1.2 供試品的制備

取20 g 藥材，加入200 mL75%乙醇回流提取2.0 h，提取2次，過濾濃縮除去乙醇獲得供試品。提取液經732 型強酸性陽離子交換樹脂充分吸附，依次用100.0 mL 水和100.0 mL 乙醇-氨水溶液(v:v，100:1)洗滌，流速10 BV/h，濃縮乙醇- 氨水餾，固體用d-CDCl3溶解。

2 結果與分析

2.1 1H 核磁共振波譜解析

1H 核磁共振波譜技術常用于植物的代謝組分分析[7]。蒙藥材醋酸延胡索中生物堿主要是原小檗生物堿化合物，其1H NMR特征信號峰是與氮相連的烷基質子δ 2.00-2.50 ppm；與苯環相連的烷基質子信號δ 3.10-3.20 ppm；氮和苯環同時相連的烷基質子信號δ 4.00-4.20 ppm；甲氧基質子信號δ 3.73-3.90 ppm；二氧甲基質子信號δ 5.86-6.06 ppm；苯環質子信號δ 6.50-7.50 ppm[8]。離子交換樹脂法制備供試品進行1H NMR 檢測，見圖1。從圖中可見，樣品的信號與原小檗生物堿化合物的特征峰相吻合，并且雜質峰較少，說明其總生物堿純度較高。

圖1 1H NMR 譜圖

2.2 不同富集方法比較

將三分提取液分別經液- 液萃取法、大孔吸附樹脂法和離子交換樹脂法富集生物堿。液- 液萃取法在富集過程中容易出現乳化現象，并且重現性差。離子交換樹脂法和大孔吸附樹脂法富集生物堿的種類相似，但離子交換樹脂法的總生物堿純度較好，且能夠富集水溶性生物堿。因此，離子交換樹脂法富集生物堿效果優于大孔吸附樹脂法和液- 液萃取法。

2.3 重復性

按實驗方法制備5 批樣品，分別經離子交換樹脂分離純化總生物堿，經1H NMR 檢測，主要化合物基本一致，稱其質量，RSD ＜6.7%。

結束語

本文應用離子交換樹脂法富集延胡索中生物堿。該法操作簡單，重復性好，為其他蒙藥研究的具有借鑒的意義。