核酸檢測法應用于血液標本內(nèi)乙肝病毒檢測結(jié)果分析

馬巧琴

【摘 ?要】目的：研究分析核酸檢測法對血液標本內(nèi)乙肝病毒的檢測效果。方法：對210777份無償獻血的樣本給予核酸檢測、酶聯(lián)免疫吸附試驗，分析兩種方法篩查乙肝的效果。結(jié)果：比較窗口期，結(jié)果核酸檢測法短于酶聯(lián)免疫吸附法（p<0.05）;核酸檢測法靈敏性、特異性更優(yōu)，且不合格率更低，與酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果具有顯著差異（p<0.05）。結(jié)論：相比于酶聯(lián)免疫吸附法而言，核酸檢測法具有更好的靈敏性、特異性，且窗口期比較短，不合格率低，值得臨床將其作為篩查血液標本內(nèi)乙肝病毒的首選。

【關鍵詞】核酸檢測法;血液標本;乙肝病毒

【中圖分類號】R446.11 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? ?【文章編號】672-3783（2020）08-0269-01

酶聯(lián)免疫吸附法是臨床檢測乙肝病毒的常用方法，主要通過檢測血清對乙肝感染情況進行篩查[1]。而核酸檢測法操作更加簡單，檢測結(jié)果更加可靠，近些年來，在臨床血液篩查過程中得到了廣泛的應用[2]。鑒于此，本文特此以210777份血液標本為例，著重對比探討了核酸檢測法與酶聯(lián)免疫吸附法的檢測效果，以供臨床參考。

1.一般資料與方法

1.1一般資料

本次研究之中的觀察主體為無償獻血血液標本，總共210777份，均為本市中心血站于2017年01月--2019年12月接收。通過HBs-Ag快速試紙法以及ALT化學法檢測，均為初篩合格的樣本。每份血液樣本留取2管，利用核酸檢測法、酶聯(lián)免疫吸附法進行乙肝感染篩查。各試管貼上條形碼，要求與血袋標簽一致，便于讀取每份血液樣本的具體信息。通過離心機對血液樣本進行離心操作，然后放置于4℃環(huán)境下，并在48h完成血液檢查。

1.2方法

儀器與試劑：酶聯(lián)免疫吸附法需要抗凝真空管、全自動酶聯(lián)免疫分析儀器、全自動加樣儀器，試劑盒由上海科華提供，為HBV血清學標志物試劑盒;核酸檢測法需要分離膠抗凝真空管理、全自動混樣提取儀器、核酸檢測系統(tǒng)、核酸擴增檢測儀器、離心機;試劑盒由上海科華提供，包括丙型肝炎病毒表面抗原試劑盒、乙肝病毒試劑盒、I型免疫缺陷病毒核酸檢驗試劑盒（實時熒光定量PCR系統(tǒng)）。所有試劑盒均在有效期內(nèi)。利用酶免試劑檢測乙肝兩對半。

根據(jù)衛(wèi)計委提出的要求，結(jié)合《獻血者健康要求》，對所有的血液樣本進行初檢以及復檢。酶聯(lián)免疫吸附法：不同檢驗人員應用不同試劑、儀器分別檢測HBs-Ag項目。本市中心血站關于HBs-Ag項目設置，以0.7作為灰區(qū)值，既是指S/CO值低于0.7，則視為無反應，若是S/CO值超過0.7，則視為有反應。雙試劑都無反應，則視為合格，雙試劑均有反應，則視為不合格，單試劑若是有反應，則待定備查。待定備查的血液標本，利用反應性試劑實施雙孔復試操作，如果復試發(fā)現(xiàn)兩孔都沒有反應，則視為合格，若是復試發(fā)現(xiàn)有一孔存在反應，則視為不合格。核酸檢測法：針對酶免測定合格的血液樣本，利用核酸檢測系統(tǒng)進行混樣檢測。單檢不合格的血樣。結(jié)果判定取決于Ct值（各管內(nèi)熒光信號到達預定閾值之時的循環(huán)數(shù)），無反應為Ct值>45，反之則為有反應。混樣檢測結(jié)果無反應，視為合格，若是混樣檢測結(jié)果有反應，需予以單檢，單檢無反應視為合格。

1.3統(tǒng)計學分析

匯總并分析觀察主體的研究數(shù)據(jù)，并利用SPSS22.0軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。百分比資料以[例（%）]描述，行卡方檢驗;計量資料以（均數(shù)±標準差）描述，行t檢驗。當P值低于0.05時，說明存在較高的檢驗價值。

2.結(jié)果

2.1窗口期對比

核酸檢測法窗口期（20.5±4.5）d短于酶聯(lián)免疫吸附法窗口期（35.3±6.9）d（t=17.028，p<0.05）。

2.2兩種不同檢測方法的靈敏性、特異性、不合格率對比

核酸檢測法法靈敏性98.89%（208435/210777）、特異性99.57%（20986/210777）高于酶聯(lián)免疫吸附試驗94.89%（20001/210777）、95.56%（201409/210777），而不合格率0.08%（163/210777）低于酶聯(lián)免疫吸附試驗1.30%（2744/210777）（X2=77.524/68.530/12.047，p<0.05）。

3.討論

乙肝傳播主要以血液為載體[3]。在我國，乙肝發(fā)病率極高，對無償獻血者進行乙肝篩查，確保臨床輸液治療安全，具有十分重大的意義，而且檢測無償獻血血液樣本內(nèi)乙肝病毒，還有利于臨床降低乙肝感染風險，抑制乙肝傳播。酶聯(lián)免疫吸附法是臨床中一種比較常用的檢測方法，在乙肝病毒檢測過程中比較多見，是臨床進行血液樣本篩查的重要手段[4]。隨著現(xiàn)代醫(yī)學技術快速發(fā)展，核酸檢測法近些年來在臨床血液篩查過程中不斷得到了廣泛的應用，此種檢測方法操作簡單，檢測結(jié)果可靠，同時還可以對酶聯(lián)免疫吸附檢測法進行有效補充[5]。

本文對照發(fā)現(xiàn)，核酸檢測法靈敏性、特異性更高，而窗口期以及不合格例數(shù)更少，與酶聯(lián)免疫吸附檢測法差異顯著（p<0.05）。核酸檢驗法所獲得的窗口期，只有酶聯(lián)免疫吸附檢驗法的1/2。經(jīng)過酶聯(lián)免疫吸附檢驗法進行測定之后，表現(xiàn)為陽性結(jié)果的血液樣本，核酸檢測結(jié)果卻成為陰性，這有可能是因為乙型肝炎患者血液中殘留HBs-Ag所致;而經(jīng)過酶聯(lián)免疫吸附檢驗法進行測定之后，表現(xiàn)為陰性結(jié)果的血液樣本，核酸檢測結(jié)果卻成為陽性，有可能是與患者處于乙肝病毒感染初期有關。

總而言之，核酸檢測結(jié)果靈敏性、特異性更高，漏診少、檢測結(jié)果可靠，值得引起臨床重視。

參考文獻

[1] 謝月娜，潘彤，劉軍.天津市HBV-DNA單獨反應性獻血者標本檢測結(jié)果分析[J].中國輸血雜志，2019，32（11）：1159-1162.

[2] 黃永梅.核酸檢測法檢測血液標本內(nèi)乙肝病毒的價值分析[J].中國現(xiàn)代藥物應用，2019，13（13）：33-35.

[3] 朱麗敏.核酸檢測法和酶聯(lián)免疫吸附法在檢測血液標本內(nèi)乙肝病毒的價值對比[J].齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2019，40（04）：454-455.

[4] 裴寶芹，夏兵.核酸檢測HBV-DNA在乙肝檢測中的作用分析[J].中國冶金工業(yè)醫(yī)學雜志，2019，36（01）：109-110.

[5] 蘇俊，駱冬云.核酸檢測與酶聯(lián)免疫吸附檢測在無償獻血血液標本乙肝病毒篩查中的應用價值比較[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥，2015，22（16）：58-59.