周晏玲
【關鍵詞】分子生物學;檢驗技術;醫學檢驗
【中圖分類號】R446 【文獻標識碼】A 【文章編號】1002-8714(2020)05-0122-01
聚合酶鏈反應的英文為polymerase chain reaction,簡寫為PCR,是多聚酶鏈反應、無細胞克隆技術等,能夠通過酶促進特異DNA或者DNA片段的合成。該技術主要包括三個步驟,分別為高溫變形2、低溫退火、適溫延伸,通過反復循環這三個步驟,利用特異耐熱酶-TaqDNA聚合酶的催化作用實現DNA聚合酶催化反應。在1995年美國臨床檢驗標準委員會頒布了感染性疾病分子診斷應用準則,1998年國際臨床化學學會頒布了分析擴增在臨床引用中的準則。其中國際臨床化學學會還詳細論述了PCR操作的各個環節步驟,并且得到了權威性文件的認可,可見,在醫學檢驗方面,PCR技術發揮著重要的價值。當前在寄生蟲學、腫瘤學、微生物學、遺傳學、基因治療、免疫學、出入境檢驗檢疫、食品檢測等領域都開始廣泛地應用PCR技術。PCR技術應用于醫學檢驗工作中能夠將樣品檢測的可靠性和準確性顯著提升,同時在節省人力資源、物力和財力方面也都發揮著重要作用,該技術無論是經濟效益還是社會效益都具有良好的體現。石偉先等在研究甲型流感病毒檢測中采用了實時熒光PCR法、膠體金快速檢測法和病毒分離培養法,對幾種檢測技術的靈敏度、特異度等進行了比較分析,得出結果認為,實時熒光PCR法具有明顯優勢,適合臨床確診中應用。Skladal等在監測血清中的丙型肝炎病毒(HCV) DNA結構轉錄及PCR擴增過程時采用寡核苷酸探針修飾的電壓傳感器方式,僅僅用了10min就完成了整個過程的監測。該技術能夠研究基因分離、克隆和核算序列還能夠對存在DNA、RNA的部位以及疾病診斷。
分子生物傳感器是結合傳感技術和分子生物診斷技術的一種方法。在小分子有機物、核算、體液內微量蛋白等各類物質檢測中可以采用分子生物傳感器技術。如有的學者抽出受檢者體液作為標本,研究標本的微量蛋白或小分子有機物,通過利用分子生物傳感器接觸這些標本能夠確定其存在的特異性,得出的結果在臨床診斷和評估病情方面發揮著重要價值。Waswa 等在2007年對食物中大腸埃希菌O157:H7進行了檢測,采用的SPR生物傳感器的靈敏度在102 ~ 103 CFU/ ml之間。斯城燕等在2011年快速檢測大腸桿菌O157:H 7中采用的是表面等離子共振原理的生物傳感器方法,僅需5-7分鐘即可完成一個樣品的檢測。該方法的檢測限為 3 ×10 5 CFU. ml-1。SPR生物傳感器有著良好的穩定性,節省了檢測時間,操作十分便捷,同時能夠對低水平的細菌、病毒等生物分子進行檢測。
傳統的生物技術已經難以滿足現代醫學發展需要,無論是基因序列數據還是蛋白序列的增長速度都非常驚人,生物技術開始朝著更加準確、快速、自動化的方向發展,在市場需求的刺激下,產生了生物芯片。生物芯片計算機芯片不同。從狹義上來講,所謂生物芯片就是微陣列芯片。在分析過程中,是以硅片、玻表面以點陣方式固定的一系列可尋址的識別分子琍、塑料等為分析的基本單位,每一個點陣中的點都可以看做一個探頭。在一定條件下,芯片表面固定的分析會合被檢測物質發生反應,通過電化學法、同位素法、酶標法、化學熒光法等可以顯示出檢測結果,然后用儀器記錄好結果,所得到的數據結果經過計算機進行分析處理能夠得到最終檢驗結果。從廣義上來講,生物芯片為固體器件,該器件大小約厘米見方,其有著高效處理分析生物成分的作用。生物芯片技術是高度交叉各種學科的新技術,其涉及到生物學、化學、物理學、電子學、計算機等技術。生物芯片技術經過十多年的研究已經得到了較為完善的應用方法,其有著較高的自動化程度,較為簡便的操作方式,能夠檢測數量眾多的分子,該技術奠定了后基因組計劃研究的基礎。
現如今國內外生物技術領域加大了對分子生物納米技術的研究力度,該技術在臨床醫學和衛生領域能夠發揮良好的效果。雖然該技術已經可以較為成熟地應用于各個生命科學領域,但是并不表明其檢測結果萬無一失,所以如何提高檢測準確度是未來研究的一個方向。分子生物納米技術涉及到納米動力學、納米藥物學、納米材料、納米電子學等多方面的專業知識,在未來發展中有著更大的應用價值,這也是分子生物納米技術的獨特優勢。
在蛋白組學研究中,人類基因組合無數病原體測序發揮了重要的價值,利用其基因序列編碼框架可以更好地開展蛋白組學得開發和研究,加快了蛋白組學研究的腳步,同時也促進了早期診斷和檢測生物標志物的研究。當前在疾病病因、早期診斷和治療上仍然存在一些不足之處,分子蛋白組學和其他方法相比可以更好地實現腫瘤早期檢測、新生物標志的發現,有助于及時、良好地治療疾病。在未來蛋白組學技術研究中應當將敏感度提升,積極應用先進的檢測技術,提高疾病診斷和治療效果。
當前醫學檢驗領域普遍認可了分子生物學技術,該技術的應用可以將醫學檢驗程序中較差污染問題有效降低,同時有助于將醫學檢驗操作整體效率提升,提高檢驗靈敏度和精確度。
參考文獻
楊倩.分子生物學技術在醫學檢驗中的應用進展[J].科技風,2016(18):232.
鄭以軍.分子生物學在醫學檢驗中的應用(文獻綜述)[J].放射免疫學雜志,2012,25(05):536-539.