新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑在蠶業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用研究

湯慶坤 黃深惠 蔣滿貴 黃紅燕 潘志新 陸瑞好 王霞 黃旭華

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站，廣西 南寧530007）

消毒防病是蠶業(yè)生產(chǎn)不可或缺的重要工作，漂白粉、次氯酸鈉、強(qiáng)氯精和優(yōu)氯凈等含氯制劑是蠶業(yè)生產(chǎn)中常用的化學(xué)消毒劑[1]，均為強(qiáng)氧化劑，具有廣譜、高效、廉價(jià)等優(yōu)點(diǎn)，但也存在腐蝕蠶具、用藥量大、污染環(huán)境等問(wèn)題[2]，不符合規(guī)模化、機(jī)械化、省力化蠶業(yè)發(fā)展和蠶農(nóng)對(duì)房屋設(shè)施、家用電器保護(hù)的需要，急需研制開(kāi)發(fā)對(duì)家蠶、人體安全、對(duì)蠶用設(shè)施設(shè)備腐蝕小的綠色高效蠶用消毒藥品。針對(duì)傳統(tǒng)消毒藥存在的問(wèn)題，現(xiàn)對(duì)一種添加了具有增效、緩蝕、滲透作用輔劑的新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑進(jìn)行研究，以證實(shí)其高效的家蠶病原殺滅效果、蠶作的安全性、金屬緩蝕性和藥劑穩(wěn)定性。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 供試蠶品種

932×芙蓉、桂蠶2號(hào)

1.2 供試病原

廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站蠶病研究室保存的家蠶微粒子孢子（N.b）、家蠶核型多角體（NPV）和家蠶白僵菌孢子，參照梅玲玲等[3]試驗(yàn)方法進(jìn)行接種、繁殖、純化，獲取病原，分別配置成1×108個(gè)孢子/mL、1.5×108個(gè)多角體/mL和1×108個(gè)分生孢子/mL的懸浮液。

1.3 試驗(yàn)藥品

代號(hào)A：新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑，由次氯酸鈣主劑和輔劑組成；代號(hào)B：新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑的主劑，主要成分為次氯酸鈣，由清大國(guó)杰科技有限公司生產(chǎn)，有效氯含量62%～66%。代號(hào)C：對(duì)照漂粉精，江蘇索普化工股份有限公司生產(chǎn)，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T10666-2008，有效氯含量60%～65%。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 緩蝕性試驗(yàn)用有效氯1%的A劑和B劑消毒液進(jìn)行金屬緩蝕性試驗(yàn)。先用砂紙磨光不銹鋼片和鐵片樣品表面雜質(zhì)，用清水沖洗干凈后置于50℃烘箱中烘干1 h，精確稱重（M）；再將不銹鋼片和鐵片樣品分別放入A、B兩種有效氯含量為1%的消毒液中浸泡3 d，每日更換1次新配消毒液；浸泡3 d后取出不銹鋼片和鐵片樣品，用清水沖洗干凈后再次置于50℃烘箱中烘干1h，精確稱重（Mt），計(jì)算腐蝕速率（R）。參照黃旭華等[4]的試驗(yàn)方法，測(cè)定的C劑和清水試驗(yàn)數(shù)據(jù)為對(duì)照。

式中：R為金屬的腐蝕速率，M和Mt分別為試驗(yàn)前和試驗(yàn)后樣品的重量（g），S為金屬樣品的片表面積（cm2）；t為浸泡的時(shí)間（h）；D為鐵的密度為7.8×103 kg/m3[5，6]。

1.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)參照孫守紅等[7]的試驗(yàn)方法，將A、B和C三種消毒劑分別存放于54℃恒溫箱內(nèi)，保存14 d，再分別測(cè)定各樣品保存前、保存后的有效氯含量。如被測(cè)定樣品置54℃恒溫箱內(nèi)14 d，其有效氯下降≤10%，則貯存有效期可定為1年。參照黃旭華等[4]的試驗(yàn)方法，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液滴定法測(cè)定有效氯含量。

1.4.3 家蠶病原殺滅效果試驗(yàn)

（1）0.1%有效氯A劑消毒液配制：參照黃旭華等[8]的試驗(yàn)方法，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液滴定法抽樣測(cè)定試劑A主劑的有效氯含量，用定容法進(jìn)行配制。根據(jù)樣品有效氯含量計(jì)算用藥量，用天平稱取主劑，再按比例稱取輔劑，放入1L容量瓶用純凈水定容，按此方法，配制成有效氯0.1%的消毒液供試驗(yàn)使用。

（2）試驗(yàn)樣品處理：分別取0.2 mL配制好的家蠶微粒子孢子（N.b）、家蠶核型多角體（NPV）和家蠶白僵菌供試病原懸浮液，分別均勻涂抹于載玻片上，涂抹成1.5×1.5 cm的菌面，陰干，分別置于有效氯0.1%的A劑消毒液中，分別處理2 min、4 min、6 min和8 min，取出，用無(wú)菌水輕輕洗去表面消毒液，再分別用5mL無(wú)菌水洗下菌面用于試驗(yàn)。

（3）家蠶病原殺滅效果添毒（感染）試驗(yàn)：用家蠶品種“932×芙蓉”的2齡起蠶為供試對(duì)象。將洗下的家蠶微粒子孢子（N.b）和核型多角體（NPV）病原處理溶液均勻涂布在桑葉上，給2齡起蠶添食，12h后改用普通桑葉飼養(yǎng)；將洗出的白僵菌病原處理的溶液均勻涂布濾紙上，讓2齡起蠶在濾紙上爬動(dòng)30min，再用普通桑葉飼養(yǎng)。

（4）發(fā)病情況調(diào)查：家蠶微粒子孢子（N.b）感染發(fā)病情況調(diào)查采用5齡起蠶（約12 d）顯微鏡鏡檢法；核型多角體（NPV）和白僵病發(fā)病情況采用肉眼觀察法，全程記錄發(fā)病情況，至上蔟化蛹。

（5）毒對(duì)和空對(duì)：分別取等量的家蠶微粒子孢子（N.b）、家蠶核型多角體（NPV）和家蠶白僵菌供試病原懸浮液和清水作為陽(yáng)性對(duì)照（毒對(duì)）和空白對(duì)照（空對(duì)），用清水處理2min，按步驟（2）進(jìn)行樣品處理，按步驟（3）進(jìn)行添毒（感染）試驗(yàn)，按步驟（4）進(jìn)行發(fā)病情況調(diào)查。

（6）試驗(yàn)處理：每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30條蠶。

1.4.4 蠶室消毒效果及蠶作安全性試驗(yàn)

（1）蠶室消毒液配制及消毒方法：由于A劑和C劑的有效氯含量為60%左右，要配制有效氯含量0.2%的A劑消毒液和有效氯含量1%的C劑消毒液（對(duì)照），可分別按300倍和60倍稀釋即可。蠶房消毒按照“三消一洗”的方式進(jìn)行，即第1d消毒，密閉24h后清洗，待蠶房、蠶具風(fēng)干后再用同樣的方法消毒二次，以均勻噴濕為度。

（2）蠶房和蠶用物資消毒：選取兩間蠶室，消毒前各取100mL供試家蠶核型多角體（NPV）和白僵菌病原懸浮液，兌水噴灑到蠶房中和蠶匾上；然后分別用有效氯含量0.2%左右的A劑消毒液和有效氯含量1%左右的C劑（對(duì)照）消毒液進(jìn)行消毒，再在蠶房中進(jìn)行養(yǎng)蠶試驗(yàn)，調(diào)查飼育成績(jī)。

（3）養(yǎng)蠶試驗(yàn)：利用消毒后的蠶房進(jìn)行養(yǎng)蠶試驗(yàn)，飼養(yǎng)蠶品種為“桂蠶2號(hào)”，按照常規(guī)方式收蟻、飼養(yǎng)、上蔟、結(jié)繭至制種產(chǎn)卵，調(diào)查克蟻收繭量、幼蟲(chóng)齡期經(jīng)過(guò)、蟲(chóng)蛹生命率、繭質(zhì)、單蛾平均產(chǎn)卵量。

2 結(jié)果與分析

2.1 緩蝕性試驗(yàn)結(jié)果

用有效氯1%的A劑和B劑消毒液進(jìn)行金屬緩蝕性試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如表1所示，可以看出，新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑A劑和B劑對(duì)不銹鋼無(wú)腐蝕或輕度腐蝕，對(duì)鐵片中度腐蝕，顯著低于C劑。試驗(yàn)結(jié)果表明，新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑具有明顯的緩蝕作用。

表1 三種有效氯1%消毒劑對(duì)金屬的腐蝕情況

2.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

用54℃恒溫箱保存A、B和C三種消毒劑14 d，試驗(yàn)結(jié)果如表2所示，可以看出，新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑A劑和B劑的穩(wěn)定性較好，貯存期可以超過(guò)1年，比常用的漂粉精更加穩(wěn)定。

表2 新型次氯酸鈣復(fù)配消毒劑穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.3 病原殺滅試驗(yàn)結(jié)果

用有效氯0.1%的新型次氯酸鈣復(fù)配劑對(duì)家蠶病原進(jìn)行殺滅試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如表3、表4和表5所示，可以看出，有效氯0.1%的新型次氯酸鈣復(fù)配劑消毒液就能對(duì)家蠶微粒子孢子（N.b）、核型多角體（NPV）和白僵菌產(chǎn)生良好的殺滅效果，其最低有效滅活時(shí)間分別為4 min、8 min和4 min，消毒效果與常規(guī)的有效氯1%的漂白粉相當(dāng)，說(shuō)明新型次氯酸鈣復(fù)配劑具有使用濃度低、殺滅效果好的特點(diǎn)。

表3 有效氯0.1%的A消毒液對(duì)家蠶微孢子（N.b）的殺滅效果

表4 有效氯0.1%的A消毒液對(duì)家蠶核型多角體（NPV）的殺滅效果

表5 有效氯0.1%的A消毒液對(duì)家蠶白僵菌的殺滅效果

2.4 蠶室消毒效果及蠶作安全性試驗(yàn)結(jié)果

用有效氯0.2%左右的新型次氯酸鈣復(fù)合劑消毒液和有效氯1%左右的消毒液對(duì)家蠶病原污染蠶室進(jìn)行消毒，并進(jìn)行養(yǎng)蠶（品種桂蠶2號(hào)）試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如表6所示。可以看出，兩間蠶室的飼育成績(jī)（齡期經(jīng)過(guò)、克蟻收繭量、繭層率、蟲(chóng)蛹生命率和單蛾平均產(chǎn)卵量）相當(dāng)，均取得較好的飼養(yǎng)成績(jī)；其中，新型次氯酸鈣復(fù)合劑消毒蠶室的飼育成績(jī)略優(yōu)于常規(guī)漂粉精消毒蠶室。說(shuō)明新型次氯酸鈣復(fù)合劑的輔劑不會(huì)對(duì)家蠶生長(zhǎng)造成影響，對(duì)蠶作安全；能有效殺滅蠶室蠶具中的家蠶病原，與2.3的試驗(yàn)結(jié)果一致，再次證明其具有良好的家蠶病原殺滅作用。

表6 有效氯含量分別為0.2%和1%的A劑和C劑消毒液消毒蠶室的飼育成績(jī)

3 小結(jié)與討論

本研究對(duì)一種添加了具有增效、緩蝕、滲透作用輔劑的新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑進(jìn)行研究，試驗(yàn)結(jié)果顯示，低濃度（有效氯0.1%或0.2%）的新型次氯酸鈣復(fù)配劑就能取得與常規(guī)漂粉精（有效氯1%）相當(dāng)?shù)南拘Ч瑢?duì)家蠶病原具有較好的殺滅效果，對(duì)蠶作安全，對(duì)金屬具有較好的緩蝕作用，藥劑的穩(wěn)定性好，適用于蠶業(yè)生產(chǎn)。

通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果可以看出，有效氯0.1%和0.2%的新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑即能取得與常規(guī)有效氯1%漂粉精相當(dāng)?shù)南拘Ч瑢?huì)有效地減少消毒藥品的使用量；同時(shí)，盡管有效氯1%的新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑對(duì)金屬仍有一定的腐蝕作用，但是，實(shí)際生產(chǎn)中可使用有效氯0.1%的消毒液進(jìn)行消毒，將會(huì)有效地降低腐蝕作用，有效緩解傳統(tǒng)消毒藥劑對(duì)蠶房和蠶用物資的腐蝕作用強(qiáng)的問(wèn)題，因此新型蠶用次氯酸鈣復(fù)配消毒劑是一種高效、綠色、環(huán)保的新型消毒劑，符合蠶業(yè)機(jī)械化、規(guī)模化和綠色環(huán)保發(fā)展的需要。