貴州某地區豬O 型口蹄疫血清學免疫抗體調查

蔣澤敏

（貴州省平塘縣農業農村局，貴州 平塘 558300）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。發病的主要特征為口腔黏膜、蹄部、皮膚出現水皰，繼而發生潰瘍。由于口蹄疫病毒寄生于廣泛，傳染性強，爆發后傳播迅速，如不采取有效措施，能造成巨大經濟損失，加之病毒的血清型較多，使防治工作更加復雜，因此，口蹄疫已成為世界各國重視的疫病之一。筆者通過ELISA 方法對2019 年5 月至11 月期間當地送檢的豬血清進行了O 型口蹄疫檢測和分析。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2019 年5 月至11 月由當地送檢的194 份豬血清，其中134 份來自10 個規模豬場，60 份來自10 個散養戶，被檢血清按規模場和散養戶進行口蹄疫抗體檢測。

1.2 檢測試劑

豬O 型口蹄疫ELISA 抗體檢測試劑盒為深圳真瑞生物科技有限公司產品。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被待檢板，記錄好樣本的位置。

（2）每次試驗均設置陽性對1 孔、陰性對照2 孔。

（3）將待檢板條按20ul/孔加入樣本稀釋液。

（4）將待檢樣品和陰陽性對照品按20ul/孔加入孔內（移液器槍頭請勿混用）。

（5）每孔加酶結合物60ul，輕微震蕩混勻，蓋上封板膜，置37℃溫育45 分鐘。

（6）甩掉板孔中的溶液，每孔加入洗滌液250ul，甩去孔內溶液，以上步驟重復4-6 次，最后在干凈吸水紙上拍干。

（7）每孔加顯色液100ul,混勻，蓋上封板膜37℃閉光顯色15 分鐘。

（8）每孔加終止液50ul，使反應終止。

（9）10 鐘內測量并記錄樣本和對照的吸光度OD450nm。

（10）計算結果。

1.4 結果判定

檢測結果判定：陰性對照（N）OD 值＞0.5，同時陽性對照（P）阻斷率＞45%；判定為有效，否則判結果無效。口蹄疫抗體檢測結果根據PI(阻斷率)計算：PI=[1-(樣品OD 值/陰性OD 均值）]*100%,當PI(阻斷率）＞45%時被檢樣品判為陽性；當PI(阻斷率）≤45%時被檢樣品則判為陰性。

2 結果與分析

2.1 規模化養豬場抗體檢測結果

對當地送檢的規模化豬場血清進行O 型口蹄疫抗體檢測。檢測結果表明，規模豬場送檢 134 份血清，陽性血清105 份，合格率78.35%，其中有8 個規模化豬場的合格率達70%以上。

表1 規模化豬場O型口蹄疫抗體檢測結果

2.2 散養戶抗體檢測結果

對送檢的散養戶血清進行O 型口蹄疫抗體檢測。檢測結果表明，散養戶送檢60 份血清，陽性血清36 份，合格率60%，其中有2 戶散養戶的合格率達70%以上。

2.3 不同日齡抗體檢測結果

將194 份血清按不同年齡進行分群，不同年齡階段的豬血清中抗體合格率差異較大，母豬、育肥豬、保育豬、仔豬的血清抗體合格率分別為96.67%、51.16%、75%、95.65%。

3 小結與討論

此次試驗采用的ELISA 試劑盒，靈敏性高、特異性強、穩定性良好，使檢測結果更加可靠準確，真實的反應了當地免疫抗體水平高低，為動物防疫工作提供可靠的依據。

通過對送檢的10 個規模場，10 個散養戶的194 份血清進行了檢測，口蹄疫免疫抗體合格率為72.68，總體達到農業部規定的70%以上。但規模養殖場的免疫合格率為78.35%，散養戶的免疫合格率60%，規模養殖場高于散養戶。可見規模養殖場對防疫比較重視，免疫規范，科學養殖。散養戶免疫不理想，養殖方式傳統，對防疫不夠重視。

通過對不同年齡階段的194份血清抗體檢測結果進行比較，母豬抗體合格率最高，然后依次是仔豬、保育豬，育肥豬抗體水平最低。

通過血清抗體的檢測，可以準確的掌握各養殖場（戶）的免疫效果，然后對疫情進行預警預報和風險評估，再制定科學的補免程序，有效的指導養殖場（戶）科學養殖。