ER、HER-2 在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及臨床意義

任艷鑫，廖曼各，楊 潔，王曉莉，李曉江

（1） 昆明醫科大學第三附屬醫院頭頸外一科；2） 放療中心，云南昆明 650118）

甲狀腺癌是最常見的內分泌惡性腫瘤，發病率在全世界逐年上升。甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid cancer，PTC） 是最常見的類型，約占總體的80%～85%，甲狀腺癌在青春期前的男孩和女孩的發病率無差異，但是青春期女性發病率是男性的14 倍。絕經后，女性甲狀腺癌患病率逐漸下降，因此，甲狀腺癌也被稱為激素依耐性腫瘤[1]。

雌激素受體（estrogen receptor，ER） 和人表皮生長因子受體2（human epidermalgrowth factor receptor-2，HER-2） 作為乳腺癌的腫瘤標記物，可指導乳腺癌的治療方式以及預后。研究發現ER和HER-2 同樣會促進甲狀腺惡性腫瘤的發生、發展。本文章初步探討ER 和HER-2 在甲狀腺乳頭狀癌中的表達，為進一步研究其機制奠定基礎。

1 資料與方法

1.1 病例資料

選取2010 年1 月至2010 年6 月昆明醫科大學第三附屬醫院甲狀腺乳頭狀癌和甲狀腺良性腫瘤患者。所有患者由同一組醫生進行手術治療，手術切除標本由兩位有經驗的病理科醫生確診，同時排除其他惡性腫瘤。收集病例中甲狀腺乳頭狀癌76 例，男10 例，女性66 例；年齡16～75歲，平均43.5 歲，按2017 年AJCC 聯合提出的分化型甲狀腺癌TNM分期法進行臨床分期：Ⅰ期38例，Ⅱ期18 例，Ⅲ期19 例，Ⅳ期1 例，有淋巴結轉移的25 例，無淋巴結轉移的51 例。甲狀腺良性腫瘤19 例，男5 例，女14 例；年齡20～63歲，平均40.7 歲，其中甲狀腺腺瘤8 例，結節性甲狀腺腫10 例，甲狀腺囊腫1 例。

1.2 免疫組化檢測組織中ER、HER-2 的表達

石蠟切片脫蠟，微波爐抗原修復，3%H2O2-甲醛浸泡10 min 后加入10%山羊血清置室溫20 min。分別加入一抗（ER、HER-2 兔抗人單抗，福州邁新生物技術開發有限公司），工作濃度1：100，4℃過夜。滴加二抗（ER、HER-2 鼠抗兔單抗，福州邁新生物技術開發有限公司），室溫孵育15 min，PBS 沖洗后加HRP 標記鏈霉卵白素工作液，37℃孵育10 min。DAB 顯色劑顯色，蘇木素復染，中性樹膠封固。所有切片均有兩位經驗豐富的病理醫師盲法閱片。

1.3 統計學處理

采用SPSS11.5 軟件包分析，計數資料采用卡方檢驗或Fisher 確切概率法，甲狀腺乳頭狀癌局部復發、轉移差異用Kaplan-Meier 分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER、HER-2 在甲狀腺乳頭狀癌組織中高表達

ER 在甲狀腺乳頭狀癌組織中主要表達于細胞核，少量在細胞膜和細胞漿（圖1）；HER-2 在甲狀腺乳頭狀癌組織中主要表達于細胞膜，少量在細胞漿，色棕黃，呈灶狀或彌漫狀分布（圖2）。ER 在甲狀腺乳頭狀癌陽性表達率為65.8%，在良性腫瘤中陽性表達率為5.3%，差異具有統計學意義（P＜0.05）。HER-2 在甲狀腺乳頭狀癌陽性表達率為93.4%，在良性腫瘤中陽性表達率為10.5%，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

圖1 甲狀腺組織的ER 表達情況Fig.1 ER expression in thyroid tissue

表1 各組ER、HER-2 的表達率［n（%）］Tab.1 The positive rate of ER and HER-2in each group［n（%）］

2.2 甲狀腺乳頭狀癌組織中ER、HER-2 與臨床因素的關系

甲狀腺乳頭狀癌中ER 表達與腫瘤侵犯周圍組織相關，與年齡、性別、腫塊大小、是否為多灶、淋巴結轉移及分期無關（P＞0.05）。HER-2 表達與淋巴結轉移相關（P＜0.05），與年齡、性別、腫塊大小、包膜侵犯、是否為多灶及分期無關（P＞0.05），見表2、表3。

表2 甲狀腺乳頭狀癌ER 表達率與臨床特征的相關性Tab.2 Correlation between ER expression and clinical features in papillary thyroid carcinoma

表3 甲狀腺乳頭狀癌HER-2 表達率與臨床特征的相關性Tab.3 Correlation between HER-2 expression and clinical features in papillary thyroid carcinoma

2.3 ER、HER-2 表達與甲狀腺乳頭狀癌局部復發、轉移的關系

所有甲狀腺癌患者按照指南進行手術治療后接受規范內分泌治療，部分患者按照指南接受I131治療，定期隨訪。發現ER 陽性表達的甲狀腺乳頭狀癌患者5 a 局部復發、轉移率遠高于ER 陰性表達患者（15.0% vs 2.1%，P＜0.05）。HER-2 陽性表達的甲狀腺乳頭狀癌患者5 a 局部復發、轉移率也高于HER-2 陰性表達患者（13.5%vs 3.2%，P＜0.05），見圖3。

圖3 甲狀腺乳頭狀癌單因素Kaplan-Meier 分析Fig.3 The cumulative local recurrence and metastasis rates of papillary

3 討論

ER 屬于類固醇激素受體家族，雌激素通過與ER 結合調節生殖系統的生長與分化，同時也影響肝、骨、腦及心血管、內分泌等系統的生理功能。同時，雌激素與ER 相互作用促進靶器官腫瘤的發生、發展。謝辛慈等[3]發現ER 在多種實體腫瘤中存在過表達，多項研究發現胃癌患者ER 表達高于正常胃組織，并且ER 表達與腫瘤分化程度相關，ER 是胃癌負性預后指標[4]，Magri F 等[5]發現甲狀腺癌組織中ER 的表達率顯著高于正常甲狀腺組織。Chen D 等[6]采用免疫組化檢測甲狀腺乳頭狀癌患者ERα 的表達，發現ERα 的高表達與腫瘤大小相關，作者認為ERα 可作為是甲狀腺乳頭狀癌的預后指標。Liu J 等[7]發現甲狀腺癌組織ER 高表達，而且與腫瘤分化程度相關，而與患者性別、年齡、淋巴結轉移和腫瘤大小無相關性。Ahmed RA[8]發現甲狀腺乳頭狀癌ERα 表達與淋巴結轉移、臨床分期、腺體外侵犯、是否多灶以及復發相關，并且腫瘤大小、腺體外侵犯及ER 表達是甲狀腺乳頭狀癌無進展生存的獨立預后因素。目前認為，ER 可以激活下游靶基因：血管內皮生長因子（vessel endothelial growth factor，VEGF）、E-鈣黏蛋白、波形蛋白、基質金屬蛋白酶-9、CyclinD-1、NF-κB 等，進而促進腫瘤發生、發展及轉移[9]。本研究發現甲狀腺乳頭狀癌高表達ER 與腫瘤侵犯相關，間接說明ER 可能通過信號通路促進腫瘤組織的生長。

HER-2 是人表皮生長因子受體家族的一員，HER-2 可以形成同源或者異源二聚體，磷酸化酪氨酸激酶激活下游信號通路（包括MAPK、Akt 和JNK） 調節腫瘤的增殖、分化和抗凋亡，HER-2可作為惡性腫瘤的預后指標[10-11]。目前研究發現大約有20%的乳腺癌存在HER-2 的過表達，這提示患者容易出現淋巴結和遠處器官轉移[12]。胃癌中HER-2 過表達預示患者預后不佳，HER-2 表達與患者的性別、腫瘤大小、腫瘤分期、有無遠處轉移及分型、分級相關[13]。Sugishita Y 等[14]研究發現HER-2 高表達的甲狀腺癌更易出現轉移，預示不良預后，與本次研究結果一致。HER-2 的過度表達與甲狀腺癌患者端粒長度的縮短以及基因RET/PTC1-3、ETV6-NTRK3、AGK-BRAF 和BRAFV600E 突變相關，HER-2 的過度擴增代表腫瘤侵襲性增加[15-16]。

甲狀腺乳頭狀癌作為一種內分泌惡性腫瘤，ER 和HER-2 的高表達均與甲狀腺癌的不良預后相關，兩者之間可能存在相互作用信號通路，尚需進一步研究揭示其中機制，為甲狀腺乳頭狀癌的治療提供新的方法。