豬瘟與豬圓環病毒混合感染的實驗室診斷與防治

摘要：以某養殖場的發病情況為例，介紹了豬瘟與圓環病毒混合感染的診斷與防治過程，希望對廣大養殖戶有所幫助。

關鍵詞：豬瘟;豬圓環病毒病;混合感染;實驗室診斷;防治

中圖分類號：S858.28? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2020）06-0025-02

臨床中豬瘟與豬圓環病毒病是生豬養殖中最容易發生的2類病毒性傳染病，其中豬圓環病毒病屬于嚴重的免疫抑制疾病，該病會造成豬群嚴重的免疫抑制，導致疫苗免疫失敗，引起其他病原的繼發感染或并發感染。豬瘟是由豬瘟病毒感染引起的急性、熱性、接觸性傳染病，該病具有極高的傳染性與致死性，在自然條件下，不同年齡與品種的豬均可感染。

1? 發病經過

2018年11月上旬，某養殖戶從外地購進了130頭90日齡左右的斷奶仔豬。在購進后沒有進行嚴格的隔離觀察就混群養殖。豬群進入養殖場的第3天陸續出現臨床癥狀，主要表現為精神狀態變差，采食量逐漸下降，體溫升高，氣喘，腹瀉，發病3～5 d后，發病豬數量逐漸增加，并陸續出現死亡現象。據調查，引進的斷奶仔豬在20日齡接種了3頭份的豬瘟疫苗，30日齡接種了口蹄疫疫苗，此外沒有接種其他疫苗。養殖場養殖密度較大，不同年齡的豬混群養殖，整體衛生環境較差，糞便清理不及時。

2? 臨床癥狀

該養殖場發病十分突然，發病后大部分患豬表現為精神萎靡不振，被毛雜亂，患豬臥地不起，嗜睡，身體逐漸消瘦，飼料利用率逐漸下降，部分豬停止生長發育，體重顯著下降，有的患豬體溫升高至41 ℃，最高升至42 ℃，眼結膜潮紅、充血，個別患豬的眼結膜呈蒼白色或黃疸癥狀。患豬眼睛流出大量膿性分泌物，鼻液中夾雜很多血液，先便秘后腹瀉，隨后便秘與腹瀉交替出現，糞便中夾雜很多黏液或血絲，部分患豬排出的尿液中夾雜大量血液，呈蛋白尿。大多數患豬表現出明顯的氣喘癥狀，隨后身體逐漸衰弱，后肢交叉或并在一起支撐，不能正常站立。部分患豬后期肢體出現嚴重的麻痹現象，四肢運動不協調，關節嚴重腫大變形，全身體表組織發紅，并出現出血性斑塊，頸部、背部皮膚出血最明顯。患豬的耳尖、四肢內側、腹部等毛少區域的皮膚呈紫紅色，體表淋巴結顯著腫大，部分患豬出現磨牙的癥狀，后期皮膚輕度黃染、排出黃色或深紅色的尿液，膀胱積尿嚴重，小便不能正常排出。眼球向內凹陷，短時間內衰竭而死。

3? 病理學變化

將病死豬解剖后，發現大部分病死豬都呈現敗血癥，病變皮膚組織黏膜與實質器官存在廣泛性充血現象，在臟器表面有大小不等的出血點、出血斑塊，甚至出現出血性的條紋。病死豬的全身淋巴結腫大、出血，特別是頸部淋巴結、腸系膜淋巴結、支氣管淋巴結、腹股溝淋巴結最明顯，將腫大的淋巴結橫切后，切面質地變硬，呈蒼白色[1]，在淋巴結的邊緣存在大量梗死病灶。腎臟顏色呈蒼白色，質地腫大，存在數量不等的出血點，脾臟邊緣存在梗死病灶。病死豬的喉頭黏膜、會厭軟骨、膀胱黏膜、心外膜、肺臟與腸系膜存在大量出血性變化，膀胱黏膜表面存在不同程度的充血、出血現象，黏膜表面有針尖大小的出血點。肺臟淤血、腫大明顯，并且存在散在硬塊，有纖維素樣滲出物流出，扁桃體出現梗死。腸道存在不同程度的充血、出血，其中回腸與結腸段的腸壁嚴重擴張變薄，盲腸與結腸黏膜充血、出血嚴重，盲腸淋巴濾泡呈現紐扣狀潰瘍[2]。

4? 實驗室診斷

結合上述病理變化與臨床表現，可以對病情做出初步診斷，懷疑為豬瘟與豬圓環病毒感染，要確診還需要采集病料進行嚴格的實驗室診斷。在無菌條件下，采集患豬的病變肺臟組織、淋巴結組織、肝臟組織充分研磨后，取上層清液進行豬瘟、豬圓環病毒2型、豬繁殖與呼吸疾病綜合征病毒、豬偽狂犬病毒等的PCR檢測。具體方法如下：采集病死豬的大腦皮層組織、淋巴結組織、扁桃體組織，放置在50%的甘油生理鹽水中，8 ℃環境下保存。每份樣品分別稱量1 g粉碎后充分研磨，加入1.5 mL生理鹽水，研磨均勻后放置在離心管中離心2 min，取上清液放置在滅菌離心管中，再加入消化液與蛋白酶K振蕩混合均勻后放置在56 ℃的水中消化1 h。將樣品從水浴鍋中取出后等溫度下降到室溫狀態，向其中加入DNA結合液，然后將液體全部轉移到吸附柱中，室溫環境靜置30 min，離心30 s，舍去收集管液體，加入DNA洗滌液，再進行離心重復上述步驟。將收集管中的液體舍去后，空心柱離心1 min，舍去殘余的DNA洗滌液，然后將吸附柱放置在新的離心管中，向其中加入DNA洗脫液，室溫環境2 min后離心處理30 s獲得模板DNA，然后放置在擴增儀上， 94 ℃ 30 s，65 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共35次循環，72 ℃延伸7 min，然后進行電泳試驗。結果發現圓環病毒與豬瘟病毒均在目的條帶上出現了一條與陽性對照基本一致的線，由此可以判定病料中存在豬瘟與豬圓環病毒，即可確診。

5? 緊急處理

豬瘟屬于國家一類重特大傳染病，豬圓環病毒病屬于國家二類傳染病，上述2種疾病都沒有特效藥物，發病后應將確診的患豬立即撲殺進行無害化處理，并及時清理被患豬污染的環境，清理圈舍中的糞便、墊料，進行嚴格的堆積發酵。定時對整個豬群進行全面的豬瘟與豬圓環病毒2型檢測，檢測出隱性帶毒豬后立即作淘汰處理，并將檢測為陰性的豬群作為假定健康豬立即進行豬瘟與豬圓環病毒疫苗的免疫接種，并做好抗體水平監測工作，對免疫方案作出適當的調整，保證豬群抗體水平達標。選用2%的氫氧化鈉溶液，1次/d進行豬舍消毒。豬舍內部選用聚維碘酮溶液進行消毒。在整個緊急處理期間，還需要做好養殖場的封鎖隔離工作，禁止養殖場的生豬調運行為，并做好受威脅區域內養殖場的流行病學調查與抗體水平監測[3]，對于抗體不達標的豬群立即進行緊急免疫接種，確保轄區范圍內的生豬養殖場豬瘟、豬圓環病毒病抗體水平達標，避免豬群出現嚴重的免疫抑制。

6? 科學預防

日常養殖管理過程中，應該加強對豬群的科學管理，控制合理的養殖密度，避免不同年齡的豬混群養殖，按照季節變化控制好養殖密度，保持豬舍內外部的環境良好，減少應激刺激，降低圓環病毒感染的機會，構建完善的生物安全體系，將衛生消毒工作貫穿于生豬養殖的全過程，最大限度地降低養殖場內傳染源的傳播流行。根據流行病學調查結果對免疫方案做出適當調整，做到科學免疫。

7? 小結

為降低上述2種疾病的發生率，需要不斷加強對2種病的流行病學調查，掌握疾病的具體臨床表現與病理變化，進行嚴格的實驗室診斷，在明確具體致病原的基礎上，采取緊急措施進行防控，控制傳染源的傳播流行范圍，保證生豬養殖安全。

參考文獻：

[1] 陳德飛，成治州.豬瘟與圓環病毒混合感染的診治[J].今日畜牧獸醫，2008（10）：20，69.

[2] 孟紀萍，王建梅，武曉虎，等.豬圓環病毒2型和豬瘟病毒抗體檢測與分析[J].中國動物檢疫，2012，29（12）：39-40.

[3] 邢香元，王? 斌，崔? 巖.兔病毒性出血癥滅活疫苗的制備、保存、使用方法及注意事項[J].邯鄲農業高等專科學校學報，2003（3）：20-22.

收稿日期：2020-05-13

作者簡介：李建蓮（1981-），女，河南光山人，助理獸醫師，主要從事動物疫病實驗室檢測工作。