兒童血常規(guī)標(biāo)本室溫保存時(shí)間對(duì)結(jié)果影響的分析

廖旺 黃衛(wèi)彤 韋淑玉

（南寧市婦幼保健院檢驗(yàn)科 廣西 南寧 530011）

隨著醫(yī)療體系的改革和發(fā)展，檢驗(yàn)質(zhì)量在醫(yī)療活動(dòng)中日趨重要，導(dǎo)致血常規(guī)檢查出現(xiàn)誤差的因素相對(duì)較多，按影響因素的高低可分為送檢時(shí)間過長(zhǎng)、保存不當(dāng)、采集時(shí)間不合理、抗凝劑濃度不合格、受檢者自身因素[1]。由于各醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理和技術(shù)水平不一樣，一些醫(yī)院對(duì)標(biāo)本采集人員和送檢相關(guān)人員的培訓(xùn)過少或者培訓(xùn)不到位，導(dǎo)致標(biāo)本送檢時(shí)間過長(zhǎng)而影響到檢驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)有些檢驗(yàn)人員接收標(biāo)本后不及時(shí)檢測(cè)或由于工作量太大而無法及時(shí)檢測(cè)最終影響到檢驗(yàn)結(jié)果。CNASCL01:2006《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》(ISO/IEC17025:2005)和《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》要求實(shí)驗(yàn)室為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠應(yīng)采取一定的措施控制,如通過人員間比對(duì)、實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)、留樣再測(cè)等方法進(jìn)行控制,確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力。其中留樣再測(cè)是考核實(shí)驗(yàn)室能力較為常用、便捷的方式。留樣再測(cè)又稱留樣試驗(yàn),主要用于監(jiān)視檢測(cè)結(jié)果的復(fù)現(xiàn)性,包含了對(duì)整個(gè)檢測(cè)過程(人員、環(huán)境、設(shè)備)的監(jiān)視[2]。為了探討血常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)后室溫保存4-8 小時(shí)是否適合進(jìn)行留樣再測(cè)，我們用Sysmex XN-10 血細(xì)胞分析儀在標(biāo)本檢測(cè)后室溫保存4 ～8 小時(shí)內(nèi)，連續(xù)每小時(shí)檢測(cè)1次，動(dòng)態(tài)觀察（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板（PLT）結(jié)果變化規(guī)律。

1.資料與方法

1.1 儀器和試劑

sysmex XN-10 血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑，實(shí)驗(yàn)前檢測(cè)質(zhì)控物在控范圍。

1.2 標(biāo)本

50 份門診健康兒童（3 ～7 歲）EDTA-K2 抗凝的靜脈血。

1.3 方法

用EDTA-K2 抗凝管抽取50 例門診健康兒童（3 ～7 歲）靜脈血，每份各2ml，充分混勻，1 小時(shí)內(nèi)在sysmex XN-10 血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行檢測(cè)1 次，然后放置室溫，分別在4h、5h、6h、7h、8h 時(shí)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定前充分混勻。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0 對(duì)本次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料（±s）表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料（%）表示，行卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)意義。

2.1 結(jié)果

2.1 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）在≥4h 時(shí)檢測(cè)時(shí)，結(jié)果隨時(shí)間的增加明顯下降，結(jié)果與1 小時(shí)檢測(cè)結(jié)果比較有明顯差異（P＜0.05）。白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）、血小板（PLT）在8h 內(nèi)檢測(cè)結(jié)果與1 小時(shí)檢測(cè)結(jié)果比較無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05）。紅細(xì)胞壓積（HCT）和紅細(xì)胞平均體積（MCV）在8h 內(nèi)檢測(cè)結(jié)果，雖然與1 小時(shí)檢測(cè)結(jié)果比較不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05），但隨著時(shí)間的增加它們的結(jié)果呈逐漸上升趨勢(shì)。標(biāo)本室溫放置檢測(cè)結(jié)果隨時(shí)間產(chǎn)生的變化結(jié)果見表1、2、3、4。

表1 標(biāo)本室溫放置WBC、RBC、HGB 和HCT 結(jié)果隨時(shí)間產(chǎn)生的變化（±s）

表1 標(biāo)本室溫放置WBC、RBC、HGB 和HCT 結(jié)果隨時(shí)間產(chǎn)生的變化（±s）

時(shí)間 WBC(×109/L) RBC(×1012/L) HGB(g/L) HCT(%)＜1h 8.00±1.73 4.56±0.31 122.48±6.41 36.67±1.91 4h 8.06±1.78 4.54±0.31 122.08±6.55 36.91±1.94 5h 8.05±1.76 4.55±0.30 122.40±6.63 37.08±1.96 6h 8.06±1.76 4.55±0.31 122.50±6.68 37.11±1.95 7h 8.06±1.75 4.54±0.31 122.56±6.44 37.20±1.92 8h 8.07±1.77 4.54±0.32 122.52±6.52 37.33±2.00

表2 標(biāo)本室溫放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 結(jié)果隨時(shí)間產(chǎn)生的變化（±s）

表2 標(biāo)本室溫放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 結(jié)果隨時(shí)間產(chǎn)生的變化（±s）

時(shí)間 MCV(fl) MCH(pg) MCHC(g/L) PLT(×109/L)＜1h 80.60±4.32 26.93±1.72 334.12±8.75 308.12±45.77 4h 81.43±4.47 26.95±1.76 330.78±8.69 323.54±48.01 5h 81.61±4.50 26.95±1.72 329.92±8.69 323.78±46.05 6h 81.83±4.54 27.03±1.73 329.78±8.09 323.12±45.91 7h 82.11±4.60 27.07±1.73 329.66±8.44 321.60±44.89 8h 82.37±4.63 27.05±1.74 328.30±7.66 320.30±47.78

表3 WBC、RBC、HGB 和HCT1h 結(jié)果與其他小時(shí)結(jié)果顯著性（P 值）的變化

表4 MCV、MCH、MCHC 和PLT1h 結(jié)果與其他小時(shí)結(jié)果顯著性（P 值）的變化

3.討論

本研究表明，兒童靜脈血在室溫放置8h 時(shí)內(nèi)，在血常規(guī)檢驗(yàn)8 個(gè)項(xiàng)目（WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT）中，對(duì)WBC、RBC、HGB、MCH、PLT 檢測(cè)結(jié)果的影響最小；而HCT和MCV 放置時(shí)間越長(zhǎng)，其檢測(cè)結(jié)果會(huì)逐漸升高，雖然差異無統(tǒng)計(jì)意義，但已出現(xiàn)逐漸上升趨勢(shì)；對(duì)MCHC 檢測(cè)結(jié)果的影響最大，隨著保存時(shí)間的增加結(jié)果會(huì)明顯下降。出現(xiàn)這情況主要是因?yàn)镋DTA 鹽屬氨羧螯合劑，其機(jī)制是通過與水中的Ca2+形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液的凝固，靜脈血標(biāo)本靜置導(dǎo)致細(xì)胞分層，分層的細(xì)胞產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，都產(chǎn)生了自己滲透壓和PH值[3]。當(dāng)標(biāo)本血細(xì)胞處于高滲環(huán)境時(shí)，就會(huì)使其滲透壓不斷升高，當(dāng)血液在檢測(cè)過程中遇到滲透壓比較低的稀釋液時(shí)，RBC 就會(huì)有水分流入，從而導(dǎo)致MCV 不斷增大，就會(huì)導(dǎo)致HCT 隨之升高，而使MCHC 不斷降低[4]。由于sysmex 血細(xì)胞分析儀XN-10 檢測(cè)原理中MCHC 不是由儀器直接檢測(cè)所得而是根據(jù)HGB 與HCT 計(jì)算得來，有報(bào)道顯示HGB 在室溫下可穩(wěn)定數(shù)日[5]，因此影響MCHC 的結(jié)果主要是HCT，MCHC 結(jié)果就隨著HCT 上升結(jié)果越高其濃度值下降越明顯。因此，血常規(guī)標(biāo)本采集4 小后，不適合做實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)、留樣再測(cè)。在艾衛(wèi)軍[4]等82 例健康成人全血標(biāo)本保存時(shí)間和溫度對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響分析、蔣蓉蓉[6]等的30 門診患者不同溫度和時(shí)間對(duì)血細(xì)胞參數(shù)的影響和丁穎[7]等的血液保存溫度和時(shí)間對(duì)激光法檢測(cè)紅細(xì)胞系統(tǒng)參數(shù)的影響的研究中，≤8h 時(shí)MCHC 的檢測(cè)結(jié)果均無顯著變化，但本研究MCHC 的檢測(cè)結(jié)果在4h時(shí)已經(jīng)發(fā)生明顯變化。由于本研究對(duì)象為兒童，然而他們研究對(duì)象為成人，因此認(rèn)為兒童靜脈血MCHC 檢測(cè)結(jié)果比成人更容易隨時(shí)間的增加而產(chǎn)生影響。因此在日常工作中當(dāng)標(biāo)本量過大時(shí)，不能及時(shí)檢測(cè)時(shí)，應(yīng)注意根據(jù)不同年齡標(biāo)本建立合理的保存方法，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)懷疑首次檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性或儀器故障維修后需要進(jìn)行留樣再測(cè)進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)，選擇標(biāo)本時(shí)應(yīng)考慮標(biāo)本保存時(shí)間和年齡因素，否則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。