精索靜脈曲張患者精漿TGF-β,IL-2及IL-6水平與精液質量的關系研究

華 斌，王書斌，陳妍妍(興化市第五人民醫院檢驗科,江蘇興化 225766)

精索靜脈曲張（varicocele,VC）是男性泌尿生殖系統常見的疾病，也是臨床上造成男性不育的主要原因，其中青壯年男性具有較高的發生率。發病機制是由于包繞精索的靜脈和蔓狀靜脈叢的擴張引起血管性精子發生障礙所致[1]。近年來研究發現，細胞因子在男性靜脈曲張不育的發病中起著非常重要的作用，細胞因子是由機體內活化的免疫細胞和某些基質細胞分泌的具有高活性和多功能的小分子蛋白質，參與介導炎性反應和免疫應答等多種生物效應，與生殖相關的細胞因子主要包括白介素、干擾素、表皮生長因子和腫瘤害壞因子等[2]。本研究中收集VC 患者和正常男性精液標本測定轉化生長因 子（transforming growth factor-β，TGF-β）、白介素-2（interleukin-2，IL-2）以及白介素-6（interleukin-6，IL-6）等指標的水平，分析細胞因子對精液質量的影響作用，旨在為治療VC 引起男性不育提高科學依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集江蘇省興化市第五人民醫院2018年1月～2019年12月收治的VC 患者40 例（觀察組），同時抽取同期體檢健康者40 例為對照組，其中觀察組年齡22～36 歲，平均年齡28.62±3.29歲；對照組年齡24～38 歲，平均年齡28.21±3.98歲；兩組患者一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。納入標準：①患者經常規體檢和彩色多普勒超聲檢查確診為原發性VC；②研究符合倫理道德，患者知情同意。排除標準：①生殖道畸形、全身性疾病；②嚴重器質性疾病；③長期接觸有毒有害物質；④遺傳病家族史患者排除。

1.2 儀器與試劑 ELISA 試劑盒購自深圳康百德生物科技有限公司，批號20180106；En Spire2300型酶標儀購自鉑金埃爾默儀器有限公司。

1.3 方法 按照標準[3]采集兩組研究對象的精液，在禁欲2～7 天后留取精液標本，待液化后立即進行常規分析，另取一部分精液高速離心后分離精漿，按照ELISA 定量試劑盒要求檢測TGF-β, IL-2, IL-6 等指標的水平。

1.4 統計學分析 SPSS25.0 軟件，計量資料以均數±標準差 （±s）表示，組間比較采用獨立樣本t 檢驗；計數資料以n(%)表示，組間比較采用χ2檢驗；P ＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 精液常規及精漿中細胞因子各項指標水平比較 見表1。與對照組相比，觀察組患者精子密度和精子活動率均明顯降低，兩組間的差異均具有統計學意義（P ＜0.05），觀察組患者IL-2, IL-6 和TGF-β 等指標水平均顯著升高，兩組間的差異均具有統計學意義（P ＜0.05）。

表1 兩組精液常規及精漿中細胞因子各項指標水平比較（n=40, ±s）

表1 兩組精液常規及精漿中細胞因子各項指標水平比較（n=40, ±s）

項 目 觀察組 對照組 t P精液量（ml） 3.14±0.76 2.97±0.81 0.968 0.336 pH 值 7.30±0.15 7.29±0.16 0.288 0.774精子密度（×106/ml） 34.65±9.02 51.23±6.23 9.566 ＜0.001精子活動率（%） 51.35±7.21 68.04±5.16 11.906 ＜0.001 IL-2（ng/ml） 1.18±0.15 0.43±0.11 25.501 ＜0.001 IL-6（ng/ml） 1.42±0.16 0.53±0.08 31.466 ＜0.001 TGF-β（ng/ml） 201.64±53.21 138.61±24.92 6.485 ＜0.001

2.2 相關性分析 見表2。精漿中IL-2, IL-6 和TGF-β 水平和VC 患者的精子密度、精子活動率呈明顯的負相關性，IL-2, IL-6 和TGF-β 之間呈明顯的正相關性，差異均具有統計學意義（均P＜0.05），與患者精液量和精液pH 值無明顯相關性。

表2 精漿中IL-2, IL-6 和TGF-β 水平和精液質量參數的相關性

3 討論

VC 屬于一種血管病變，病情嚴重的患者出現不育，而臨床上出現不育的精液異常的患者多數是由VC 引起的，對VC 患者進行精索高位結扎后患者的精液質量會明顯提高[4]。研究證實，引起患者發生VC 的機制主要有：精索內靜脈瓣膜發生缺失或發育不全后血液發生返流[5]；5-羥色胺、兒茶酚胺、類固醇等一些反流物質堆積，使患者表現出不育；引起生精細胞過度凋亡[6]；過度產生活性氧使細胞膜脂質層發生破壞，從而影響生精細胞正常功能；睪丸內環境中一氧化氮的濃度持續升高，損傷正常的細胞，使生精細胞的數目減少或功能減弱；睪丸組織中有毒物質蓄積對精子的生成造成干擾。而近年來很多研究證實免疫相關的細胞因子在VC患者所致的不育中具有重要的作用[7]。

本研究結果顯示，發生VC 的患者精子密度和精子活動率明顯低于健康男性，患者精漿中的IL-2,IL-6 和TGF-β 等細胞因子水平明顯高于對照組，差異具有統計學意義。患者精子密度、精子活動率等反映精液質量的主要參數與IL-2, IL-6 和TGF-β 呈明顯負相關性，IL-2, IL-6 和TGF-β 之間呈明顯正相關性。目前已有研究證實多種IL, TNF, 腫瘤壞死因子相關配體（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）等細胞因子存在于人類的精子中[8]。生殖系統感染后會刺激內皮細胞分泌IL-6 和IL-2，使白細胞透過受損的血-睪屏障進入精漿參與免疫病理過程[9-10]，IL-6 可促進VC 患者精子生物膜表面的脂質過氧化過程，影響精子細胞的耐受力、受精和著床，降低精子數目從而發生不孕[11-13]。TGF-β 屬于具有多重效應的信號分子，實質是蛋白質，具有獨特的免疫調節功能，可調節睪丸間質細胞的類固醇合成，誘導生精細胞凋亡[14-15]。因此，IL-2, IL-6和TGF-β 水平與精子質量密切相關。

綜上所述，VC 患者IL-2, IL-6 和TGF-β 等細胞因子水平高低與精液質量呈明顯的負相關性，為闡明VC 不育機制和臨床治療提供依據。