α1酸性糖蛋白、谷胱甘肽還原酶在原發性肝癌中的表達及與患者臨床特征的關系

董海波，周旭，武婉君，王亞玲，薛冉冉 鄭州頤和醫院醫學檢驗科，鄭州450018

原發性肝癌是指發生在肝細胞或肝內膽管細胞中的惡性腫瘤，具有疾病進展快，病死率高的特點，其病死率位居惡性腫瘤的第二位[1]。肝癌的早期臨床癥狀不明顯，約70%的患者在治療時已處于中晚期，錯過了最佳的治療機會，預后不良[2]。因此，急需尋找一種有效的診斷方法，早發現、早治療，有利于控制疾病進展。目前，臨床主要通過檢測甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）診斷原發性肝癌，但特異度不高，影響了臨床醫師的判斷[3]。研究顯示，肝癌患者的血清α1酸性糖蛋白（α1-acid glycoprotein，α1-AG）水平明顯高于肝臟良性病變患者和健康者[4]，對肝癌的診斷具有重要意義。谷胱甘肽是細胞中的關鍵抗氧化劑和自由基清除劑，把機體內有害的毒物轉化為無害的物質，排泄出體外。傳染性肝炎、急性肝炎、肝硬化和涉及肝轉移的惡性病變的初期，血清中谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase，GR）活性水平明顯提高[5]，GR是用于評估肝損傷程度的重要指標。本研究探討原發性肝癌患者血清α1-AG、GR水平及與患者臨床特征的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年12月鄭州頤和醫院收治的原發性肝癌患者。納入標準：均經病理學確診為原發性肝癌；既往未接受過放化療等抗腫瘤治療。排除標準：合并糖尿病、免疫風濕病、內分泌疾病等其他疾病；合并其他系統惡性腫瘤。依據納入和排除標準，本研究共納入196例原發性肝癌患者，作為觀察組，其中男113例，女83例；年齡（53.30±6.10）歲；體重指數（body mass index，BMI）為（22.15±3.22）kg/m2。同期選取在本院進行健康體檢的100例健康者作為對照組，其中男52例，女48例；年齡（54.42±8.11）歲；BMI為（22.78±4.10）kg/m2。兩組受試者性別、年齡和BMI比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

抽取兩組受試者空腹靜脈血5 ml，3000 r/min離心15 min，采用AU5800自動生化分析儀檢測α1-AG水平；采用氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）底物法，AU5800自動生化分析儀檢測血清GR活性。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件對所-有數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組受試者血清 α 1-AG、GR水平的比較

觀察組患者血清α1-AG、GR水平均明顯高于對照組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表1）

表1 兩組受試者血清 α 1-AG、GR水平的比較（±s）

表1 兩組受試者血清 α 1-AG、GR水平的比較（±s）

組別觀察組（n=196）對照組（n=100）t值0.84±0.18 0.56±0.17 12.895 101.22±24.43 71.10±19.32 10.732 P值α1-AG（g/L）0.000 GR（mIU/ml）0.000

2.2 不同臨床特征原發性肝癌患者血清 α 1-AG、GR水平的比較

不同性別、年齡、BMI、腫瘤直徑、分化程度和乙肝病毒感染情況原發性肝癌患者血清α1-AG水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的原發性肝癌患者血清α1-AG水平明顯高于TNM分期為I～Ⅱ期的患者，差異有統計學意義（t=6.225，P=0.000）。不同性別、年齡、BMI、分化程度和乙肝病毒感染情況原發性肝癌患者血清GR水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；腫瘤直徑≥5 cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的原發性肝癌患者血清GR水平均明顯高于腫瘤直徑＜5 cm、TNM分期為I～Ⅱ期的患者，差異均有統計學意義（t=4.830、11.154，P=0.000）。（表2）

2.3 相關性分析

Pearson相關分析結果顯示，α1-AG水平與GR呈正相關（r=0.312，P＜0.05）。

3 討論

原發性肝癌是高度惡性的惡性腫瘤，其發病與乙型肝炎、丙型肝炎、肝硬化和病毒性肝炎密切相關[6]。隨著腫瘤的生長和轉移，可能導致黃疸、上消化道出血、肝性腦病、腹痛及肝腎功能衰竭等[7-8]。原發性肝癌的發病機制尚未完全清楚，患者治愈率和總生存率較低，由于其發病隱匿，缺乏早期典型的臨床癥狀，一旦出現明顯的癥狀，則表明腫瘤正在迅速進展，且患者多已經發展到晚期。若不及時治療，可能發生轉移并擴散到體內其他重要器官。甚至威脅生命和健康。因此，及早診斷原發性肝癌對治療和預后均非常重要。影像學檢查是診斷原發性肝癌的重要方法，甲胎蛋白是常見的實驗室檢查指標，但部分患者可能會出現假陰性結果，因此，有必要尋找具有更高靈敏度和特異度的血清標志物[9-11]。

研究發現，氧化損傷在肝癌發生發展中發揮重要作用，但其具體作用機制仍不清楚[12]。α1-AG是肝臟分泌的蛋白質，作為血清黏蛋白的主要成分，其是人體血漿中糖含量最高、酸度最強的糖蛋白，分子量為41 000～43 000 kD，由183個氨基酸組成，并含有高唾液酸[13]。研究發現，肝癌患者血清中α1-AG水平明顯升高，是診斷肝癌的潛在腫瘤標志物[14]。肝臟是人體重要的解毒代謝器官，當受到藥物、內源性或異質性等的刺激，可發生氧化應激反應，產生自由基并損害肝臟。谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）和GR共同參與谷胱甘肽微循環的調節和維持，清除自由基和過氧化物，并抵抗各種內源性和外源性的刺激[15]。有研究表明，肝損傷患者血清和肝臟中GR水平明顯升高[16-17]，進一步的研究證實，肝損傷期間的氧化應激反應導致血清GR水平升高，可激活人體自身的抗氧化保護系統，以消除自由基造成的傷害，在該系統中GPX使用谷胱甘肽轉移電子以消除有機物或無機過氧化物來生成GSSG，而GR可將GSSG還原為谷胱甘肽以循環利用，人體通過增加GPX和GR的水平來改善體內的氧化還原環境，消除有害環境的影響[18]。

本研究結果顯示，觀察組患者血清α1-AG、GR水平均明顯高于對照組患者。表明原發性肝癌患者氧自由基的產生過多，抗氧化劑的消耗過多，患者體內存在一定程度地氧化損傷。這可能與活性酶的釋放機制有關：當肝損傷發生時，細胞膜的通透性改變，導致α1-AG、GR和其他肝源性酶從這些組織一起釋放到血液中。TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的原發性肝癌患者血清α1-AG水平明顯高于TNM分期為I～Ⅱ期的患者，腫瘤直徑≥5 cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的原發性肝癌患者血清GR水平均明顯高于腫瘤直徑＜5 cm、TNM分期為I～Ⅱ期的患者。表明血清α1-AG和GR可以用于評價TNM臨床分期，且GR水平與腫瘤直徑有關，診斷肝癌進展的特異度更高，相關性分析顯示，α1-AG水平與GR呈正相關，可共同用于原發性肝癌臨床診斷。

目前，臨床僅對患者血清中α1-AG、GR水平變化進行了觀察[19-20]，關于其含量變化與疾病嚴重程度、病情進展和患者生存時間、腫瘤大小等之間關系的研究很少。本研究在此基礎上通過觀察血清標志物水平與原發性肝癌患者臨床特征的關系，進一步證實，血清α1-AG、GR水平變化與原發性肝癌的進展密切相關，可以作為輔助診斷、評估肝損傷程度的方法。

綜上所述，原發性肝癌患者血清α1-AG、GR水平升高，且二者呈正相關關系，可能與臨床特征有關。