■蔣國(guó)民 高峰 徐永福 王湘華 李傳武 王冬武(湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所,長(zhǎng)沙,410153)
芙蓉鯉鯽,原名為芙蓉鯽,是湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所和湖南鱖魚原種場(chǎng)運(yùn)用雜交選育技術(shù)培育出的新型雜交鯽魚,品種登記號(hào)為GS-02-001-2009。其母本是芙蓉鯉(散鱗鏡鯉為母本和興國(guó)紅鯉為父本雜交所得),父本是紅鯽,進(jìn)行屬間遠(yuǎn)緣雜交所得。雜交個(gè)體芙蓉鯉鯽的可數(shù)性狀介于父母本間,可量性狀更接近父本,形態(tài)與父本紅鯽接近。RAPD和微衛(wèi)星分析芙蓉鯉鯽與原始親本間遺傳關(guān)系,芙蓉鯉鯽遺傳結(jié)構(gòu)更接近父本紅鯽,更偏向具有紅色體征的親本,而子代灰黃色的體色顯示著與父本或紅色體征的親本相去甚遠(yuǎn)。
本實(shí)驗(yàn)以芙蓉鯉、紅鯽和子代芙蓉鯽為對(duì)象,顯微觀察、分析色素細(xì)胞種類、數(shù)量與分布,初步探索芙蓉鯽色素細(xì)胞特性及與父母本間的遺傳性。
本研究所有實(shí)驗(yàn)魚均取自湖南省漁緣生物有限公司,芙蓉鯉和芙蓉鯽為雜交一代,芙蓉鯉和紅鯽為性成熟個(gè)體,芙蓉鯽為商品魚,養(yǎng)殖水質(zhì)和投喂飼料相同。每種魚各取5尾,取鱗片、鰭條和皮膚進(jìn)行色素細(xì)胞觀察。
鱗片制片:用干凈鑷子取實(shí)驗(yàn)魚側(cè)線上鱗和腹部鱗片各20片,一部分去除鱗片里層組織膜,另一部分不處理,按正常位置放置載玻片上;鰭條制片:剪實(shí)驗(yàn)魚的背鰭、胸鰭、腹鰭、臀鰭和尾鰭,清洗干凈,平鋪、展開于載玻片上;皮膚制片:小心去除所有鱗片,解剖刀劃開皮膚,鑷子撕下皮膚,并剔除皮膚內(nèi)層肌肉,磷酸緩沖液清洗,鋪至載玻片上,制成臨時(shí)裝片。OLYMPUS顯微鏡觀察,并用CCD拍攝系統(tǒng)拍照。

表1 色素細(xì)胞種類與數(shù)量
母本芙蓉鯉有色素細(xì)胞4種,占優(yōu)勢(shì)的為黑色素細(xì)胞,其次為黃色素細(xì)胞和少量虹彩細(xì)胞和紅色素細(xì)胞。黑色素細(xì)胞分布于鰭條、鱗片和皮膚,并伴隨大量黃色素細(xì)胞,虹彩細(xì)胞分布于鱗片里層邊緣,紅色素細(xì)胞僅見體表紅色區(qū)域的鱗片或紅色鰭條上。
父本紅鯽缺乏黑色素細(xì)胞,有3種色素細(xì)胞,紅色素細(xì)胞占絕大部分,廣泛分布于鱗片、皮膚和鰭條,還有少量黃色素細(xì)胞分布于皮膚和鱗片,完全被紅色素細(xì)胞遮蓋,虹彩細(xì)胞分布于鱗片。
子代芙蓉鯽有黑色素細(xì)胞、黃色素細(xì)胞和虹彩細(xì)胞3種,鰭條、鱗片和皮膚中均未見紅色素細(xì)胞分布。從數(shù)量上來比較,黃色素細(xì)胞>黑色素細(xì)胞>虹彩細(xì)胞,黑色素細(xì)胞主要存于鱗片、鰭條和皮膚,大量黃色素細(xì)胞伴隨黑色素細(xì)胞分布,鱗片有虹彩細(xì)胞,皮膚和鰭條未見分布。具體情況如表1。
2.2.1 黑色素細(xì)胞
母本芙蓉鯉黑色素細(xì)胞主要有三種形態(tài):一類個(gè)體小,圓形,橢圓形或成團(tuán)塊狀,不分支,細(xì)胞色素顆粒聚集,色濃(圖Ⅰ:1~2);一類是分支明顯或不太明顯,呈樹突狀,分支不多,色素顆粒主要分布在細(xì)胞核周圍,(圖Ⅰ:3);另一類是個(gè)體大,細(xì)胞分支多且明顯,呈星形的扁平狀細(xì)胞,色素顆粒主要分布在各分支上,色較淺(圖Ⅰ:4~6)。前兩種類型黑色素細(xì)胞常見于側(cè)線上鱗片,后一種多見于腹部鱗片。子代芙蓉鯽黑色素細(xì)胞形態(tài)與母本芙蓉鯉基本相同(圖Ⅰ:7~9)。
鰭條邊緣黑色素細(xì)胞小,鰭膜黑色素細(xì)胞有從兩側(cè)往中間逐步變大,顏色逐步變淡的趨勢(shì)。從鱗片的鱗焦到邊緣,黑色素細(xì)胞有從小到大,由密到稀,從不分支到分支多排列的變化趨勢(shì)(圖Ⅰ:10~12)。
2.2.2 黃色素細(xì)胞
母本芙蓉鯉黃色素細(xì)胞有2種形態(tài),一是呈顆粒狀或團(tuán)狀,形態(tài)不規(guī)格,稀疏或彌散分布(圖Ⅱ:1~2),另一是分支多且細(xì)、個(gè)體大、呈放射狀,各分支顏色均勻,可相互連接呈網(wǎng)狀(圖Ⅱ:3)。父本紅鯽黃色素細(xì)胞,團(tuán)狀,稀疏分布,完全被紅色素細(xì)胞遮蓋(圖Ⅱ:4)。子代芙蓉鯽黃色素細(xì)胞,顆粒狀或團(tuán)狀成塊,稀疏分布或彌散型分布,并被黑色素細(xì)胞所蓋(圖Ⅱ:5~6)。
2.2.3 紅色素細(xì)胞和虹彩細(xì)胞
母本芙蓉鯉紅色素細(xì)胞,顆粒狀,呈彌散分布,父本紅鯽紅色素細(xì)胞有一部分呈圓形、橢圓形,個(gè)體大(圖Ⅱ:7),絕大部分顆粒狀密集排布,或彌散型,或成片廣泛分布(圖Ⅱ:8~9),子代芙蓉鯽未見紅色素細(xì)胞。虹彩細(xì)胞呈帶狀,彌散性分布,父本和母本中顯示紫紅色、藍(lán)色和綠色(圖Ⅱ:10~11),子代顯示紫紅色、淺灰色和藍(lán)綠色(圖Ⅱ:12)。
魚類4種基本色素細(xì)胞,黑色素細(xì)胞、黃色素細(xì)胞、紅色素細(xì)胞和虹彩細(xì)胞(鳥糞素細(xì)胞),都是通過神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移、分化而成,但不同色素細(xì)胞成色原理不同,虹彩細(xì)胞是通過反射特定波長(zhǎng)光的方式成色,黑色素細(xì)胞、黃色素細(xì)胞和紅色素細(xì)胞顯示胞內(nèi)色素顆粒顏色,而色素顆粒調(diào)節(jié)體色的方法又有所不同。實(shí)驗(yàn)可看出,黑色素細(xì)胞通過調(diào)節(jié)色素顆粒的分散或聚集而改變細(xì)胞色度,從而改變魚類體色,與Fujii R觀察到的結(jié)果一致。紅色細(xì)胞和黃色細(xì)胞主要通過細(xì)胞的數(shù)量與分布來有效地影響魚體體色。
黃色素細(xì)胞和紅色素細(xì)胞的成色物質(zhì)相同,均為類胡蘿卜素和喋啶,顏色的差異僅是類胡蘿卜素種類不同所致。而魚類類胡蘿卜素完全靠食物獲取,再通過一定的生理代謝轉(zhuǎn)化為不同成色物質(zhì)。相同飼料條件下的父本紅鯽分布大量紅色細(xì)胞和少量黃色素細(xì)胞,子代卻缺失紅色素細(xì)胞,分布大量黃色素細(xì)胞。導(dǎo)致這種現(xiàn)象的發(fā)生,很大可能是父本與子代體內(nèi)類胡蘿卜素代謝功能不同而致。
母本和子代的鰭條、鱗片和皮膚,黑色素細(xì)胞和黃色素細(xì)胞在形態(tài)、數(shù)量與分布幾乎相同,以黃色素細(xì)胞為底,分布大量黑色素細(xì)胞,而父本分布的大量紅色素細(xì)胞在子代中缺失。故從色素細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量與分布初步分析,子代芙蓉鯽色素細(xì)胞更趨向遺傳母本芙蓉鯉的特征。(參考文獻(xiàn)略)