HDAC9基因多態(tài)性與東北地區(qū)漢族人群腦梗死的相關(guān)性分析

靳美 宋培蕓 曹利

【摘 要】 目的：探討組蛋白去乙酰化酶9（HDAC9）基因單核苷酸多態(tài)性（SNP）與東北地區(qū)漢族人群腦梗死的相關(guān)性。方法：實(shí)驗(yàn)采用病例-對(duì)照方法，隨機(jī)選取符合研究目的的漢族腦梗死患者201名及漢族健康者139名。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-連接酶檢測(cè)反應(yīng)（PCR-LDR），對(duì)所有受試者HDAC9 基因rs2107595位點(diǎn)進(jìn)行基因分型，統(tǒng)計(jì)分析比較病例組和對(duì)照組不同基因型（TT/CT/CC）及等位基因（C/T）的差異，并以O(shè)R（95%CI）值表示等位基因（C/T）的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)果：HDAC9基因rs2107595C/T位點(diǎn)，病例組TT基因型及T等位基因頻率明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.511，P=0.022），T等位基因攜帶者患腦梗死的風(fēng)險(xiǎn)增加（OR=1.490，95% CI：1.081～2.051）。結(jié)論：HDAC9 基因 rs2107595 位點(diǎn) SNP 與腦梗死易感性相關(guān)，其中 T 等位基因可能為腦梗死的遺傳易感基因。

【關(guān)鍵詞】 HDAC9、基因多態(tài)性、腦梗死

【中圖分類號(hào)】 R743.3 ? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】B ? 【文章編號(hào)】1005-0019（2020）17-199-02 ?腦梗死是一種異質(zhì)性綜合疾病，環(huán)境因素和遺傳因素的交互作用在發(fā)病中具有重要的作用[1]。基因 HDAC9 是在全基因組測(cè)序研究中發(fā)現(xiàn)的與腦梗死發(fā)生密切相關(guān)的基因，我們通過對(duì)腦梗死患者基因 HDAC9 rs2107595位點(diǎn)多態(tài)性的研究，揭示表觀遺傳學(xué)中遺傳變異因素在腦梗死發(fā)病過程中所起到的作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 實(shí)驗(yàn)組為黑龍江省醫(yī)院 2017 年 1 月至 2019 年 6 月神經(jīng)內(nèi)科 201名腦梗死住院患者，所有研究對(duì)象均滿足人體試驗(yàn)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，且已簽署知情同意書。實(shí)驗(yàn)組納入的標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者均符合第四屆中國(guó)腦血管疾病學(xué)術(shù)會(huì)議關(guān)于腦卒中的診斷標(biāo)準(zhǔn);（2）擁有東北地區(qū)戶籍并且在東北地區(qū)內(nèi)居住年數(shù)大于 5 年：（3）民族為漢族。排除標(biāo)準(zhǔn)：1、患者既往史中有心臟、腎臟、肝臟、骨骼和癌癥等主要疾病的，以及艾滋病，梅毒等嚴(yán)重傳染病史;2、排除患者之間存在血緣關(guān)系。

對(duì)照組為黑龍江省醫(yī)院體檢中心2017年1月至2019年6月健康體檢者139名，排除既往曾有腦卒中、腦外傷、腦血管病，排除曾有心臟、腎臟、肝臟、骨骼和癌癥等主要疾病的，以及艾滋病，梅毒等嚴(yán)重傳染病史，排除存在神經(jīng)功能明顯的缺陷者，對(duì)照組均滿足人體試驗(yàn)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法 清晨空腹肘前靜脈抽取5ml血樣，置于EDTA抗凝管后保存在-80℃冰箱中。應(yīng)用Axygen公司的AxyPrep-96全血基因組DNA試劑盒提取基因組DNA，置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｊ褂肁BI 公司PRISM3730 電泳測(cè)序儀對(duì)LDR反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，通過Genemapper 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，根據(jù)不同峰型及堿基大小進(jìn)行基因分型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同基因型（TT/CT/CC）及等位基因（C/T）等變量屬計(jì)數(shù)資料，采用頻數(shù)及百分比表示，使用χ2檢驗(yàn)比較病例組和對(duì)照組間上述資料的差異，并以 OR（95%CI）值表示等位基因（C/T）的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)。

2 結(jié)果

病例組及對(duì)照組 HDAC9 基因rs2107595位點(diǎn)基因型分布均符合Hardy-Weinberg 遺傳平衡定律（病例組 P=0.273，對(duì)照組 P=0.919;認(rèn)為P>0.05符合Hardy-Weinberg 平衡），故本研究中病例組及對(duì)照組均有較好的群體代表性。結(jié)果顯示病例組 HDAC9 基因rs2107595 T/C位點(diǎn)TT、CT、CC基因型頻率與對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05）。病例組T等位基因頻率明顯高于對(duì)照組，T等位基因攜帶者患腦梗死的風(fēng)險(xiǎn)增加（表 1）。

3 討論

隨著分子生物學(xué)研究的深入，遺傳學(xué)、表觀遺傳學(xué)以及環(huán)境因素受到廣泛關(guān)注。最近的全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS）表明HDAC9基因與腦卒中有關(guān)，但可靠性仍存在爭(zhēng)議，尤其是來自不同種族和地理位置的數(shù)據(jù)。GWAS報(bào)道HDAC9基因3端 SPN rs2107595多態(tài)性與大動(dòng)脈腦卒中風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)[2]。HDAC9缺失可能導(dǎo)致炎癥基因的下調(diào)，脂質(zhì)相關(guān)基因的上調(diào)，以及小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變大小的顯著減少[3]。大多數(shù)學(xué)者表明 rs2107595 僅增加大血管動(dòng)脈粥樣硬化性卒中風(fēng)險(xiǎn)。然而Akinyemi[4]研究非洲人群 rs2107595 多態(tài)性也會(huì)增加小血管腦卒中風(fēng)險(xiǎn)。Su[5]研究 rs2107595 與南方漢族人群腦卒中關(guān)系，在加性、顯性、隱性和等位基因模型無顯著相關(guān)性，表明 rs2107595多態(tài)性與腦梗死無關(guān)聯(lián)。

本研究發(fā)現(xiàn) HDAC9 基因 rs2107595T/C位點(diǎn)與腦梗死的發(fā)病可能存在相關(guān)性，其中T等位基因可能為腦梗死的遺傳易感基因，進(jìn)一步提示HDAC9基因rs2107595 T/C位點(diǎn)與腦梗死易感性的關(guān)聯(lián)。

同時(shí)本研究存在一定局限性，該研究為基于醫(yī)院的病例對(duì)照研究，不能排除有選擇偏倚的可能性。并且，研究結(jié)果不應(yīng)被推斷適用于其他人群，因?yàn)樵撗芯咳后w均為居住于中國(guó)東北地區(qū)的漢族人群。

綜上所述，本研究提供的數(shù)據(jù)表明，HDAC9 基因rs2107595 T/C 位點(diǎn)可能與腦梗死的疾病易感性相關(guān)。但有關(guān)該基因位點(diǎn)與疾病易感性之間的具體病理生理功能及發(fā)病機(jī)制仍有待進(jìn)一步的研究。

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