獲得性免疫缺陷綜合征患者合并機會性感染的淋巴細胞亞群和HIV-1病毒載量的特點分析

曹汴川， 黃 喆， 肖 科， 稅雪姣， 鄒永勝， 黃富禮， 黃永茂， 鐘 利

獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染所導致的以免疫功能缺陷為特征的慢性致死性傳染病。四川地區AIDS疫情嚴峻，已成為最重大的公共衛生挑戰之一。HIV感染導致患者CD4+T淋巴細胞數量進行性減少[1]，CD4+/CD8+T淋巴細胞比例倒置，相關細胞因子水平紊亂，進而引起機體免疫功能缺陷，極易發生各種機會性感染[2]。而AIDS合并機會性感染是導致患者出現各種臨床癥狀，甚至死亡的重要因素[3-4]。有研究發現，CD4+T淋巴細胞和HIV-1病毒載量已成為判定AIDS患者病情、預測疾病進展和評價抗反轉錄病毒治療（ART）療效的重要指標[5-7]。因此，評估包括CD4+T淋巴細胞在內的淋巴細胞亞群和HIV-1病毒載量可全面反映AIDS患者的免疫功能以及ART療效，進而預測發生感染的概率。對AIDS患者合并機會性感染的淋巴細胞亞群和HIV-1病毒載量進行分析，以期提高臨床診治水平，進而為降低本地區此病的發病率和病死率提供依 據。

1 材料與方法

1.1 病例來源

所有病例均來源于西南醫科大學附屬醫院感染病科2019年1－12月住院治療的AIDS合并機會性感染患者，共100例。病例納入排除條件：①AIDS患者合并機會性感染；②性別不限；③排除血液系統疾病、糖尿病、慢性阻塞性肺疾病、肝硬化、慢性腎臟疾病和嚴重精神疾病；④剔除臨床資料不完整的病例。

1.2 實驗室檢測

由本院實驗室對血液標本采用化學發光法聯合膠體金法和膠體硒法進行HIV抗體篩查。篩查試驗為陽性者，采用免疫印跡法或條帶免疫法進行抗體補充試驗，按《全國艾滋病檢測技術規范（2015年修訂版）》中的標準操作[8]。

采用BD公司生產的FACS Canto Ⅱ流式細胞儀檢測外周血淋巴細胞亞群絕對計數，包括CD4+T淋巴細胞（CD3+CD4+）、CD8+T淋巴細胞（CD3+CD8+）、NK細胞（CD16+CD56+）和B淋巴細胞（CD3-CD19+）。

采用羅氏公司生產的COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan病毒載量檢測系統檢測血漿HIV-1病毒載量，HIV核酸＜20拷貝/mL定為檢測下 限。

1.3 診斷標準判定

HIV感染診斷，依據《中國艾滋病診療指南（2018版）》為標準[9]。符合如下標準即可診斷HIV感染：HIV抗體篩查試驗陽性和HIV補充試驗陽性（抗體補充試驗陽性或HIV核酸＞5 000 拷貝 / mL）。機會性感染的診斷以患者出院診斷為準，所有機會性感染的診斷均依據相應臨床表現及相關輔助檢查[9]。

1.4 資料采集

采集所有患者的資料，包括性別、年齡、職業、婚姻狀況、HIV感染途徑、機會性感染的種類、CD4+T淋巴細胞計數、CD8+T淋巴細胞計數、NK細胞計數、B淋巴細胞計數和HIV-1病毒載量。

1.5 統計學分析

采用SPSS 24.0軟件進行統計學分析，計數資料采用構成比表示，組間比較采用Fisher精確檢驗；計量資料采用均數±標準差表示，組間比較采用方差分析或Kruskal-Wallis秩和檢驗；采用Spearman進行相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 患者基本信息

100例患者中，男86例，占86.0%，女14例，占14.0%。本地區AIDS患者合并機會性感染以41～65歲已婚男性農民或農民工居多，HIV-1傳播途徑以異性性行為為主。見表1。

表1 100例患者基本信息Table 1 Demographic data of 100 patients

2.2 機會性感染的種類

100例患者中，共發生機會性感染195例次，以細菌性肺炎位居首位（25.6%，50/195），其他常見的機會性感染還包括了EB病毒感染、肺結核、肺孢子菌肺炎、巨細胞病毒感染等。見表 2。

表2 195例次機會性感染的種類Table 2 Types of 195 opportunistic infections

2.3 機會性感染與CD4+T淋巴細胞的關系

1 0 0例患者中，根據C D 4+T淋巴細胞計數水平分為4組（＜100/μL、100～200/μL、201～350/ μL、＞350/μL），隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低，機會性感染的發生明顯增加。見表3。

2.4 CD8+T淋巴細胞、NK細胞和B淋巴細胞與CD4+T淋巴細胞的關系

100例患者中，隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低，CD8+T淋巴細胞和B淋巴細胞計數水平也隨之降低。在CD4+T淋巴細胞計數＜100/μL時，CD8+T淋巴細胞和B淋巴細胞計數水平明顯低于其他三組，且差異具有統計學意義（P＜0.05）。NK細胞計數水平也隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低而出現降低，但各組間差異無統計學意義（P=0.182）。見表4。

2.5 HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細胞的關系

100例患者中，隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低，HIV-1病毒載量水平出現升高。在CD4+T淋巴細胞計數＜100/μL時，HIV-1病毒載量明顯高于CD4+T淋巴細胞計數＞350/μL時，且差異具有統計學意義（P=0.026）。將HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細胞計數作相關性分析，兩者呈負相關（r=-0.297，P=0.014），即當HIV-1病毒載量較高時，CD4+T淋巴細胞計數較低；而當HIV-1病毒載量較低時，CD4+T淋巴細胞計數較高。見表 5。

3 討論

截至2018年底，我國報告現有HIV感染者、AIDS患者共86.1萬例，2018年當年新發HIV感染者、AIDS患者為14.9萬例，死亡3.8萬例。HIV主要破壞人體免疫系統，導致人體出現免疫功能缺陷，引起各種機會性感染[10]。研究發現，HIV可導致CD4+T淋巴細胞出現凋亡或焦亡，HIV復制還可直接或間接對CD4+T淋巴細胞產生殺傷作用以及感染HIV后導致機體胸腺組織萎縮和胸腺細胞死亡等，上述過程共同導致了CD4+T淋巴細胞數量的進行性減少[9]。HIV感染還可引起CD8+T淋巴細胞、NK細胞和B淋巴細胞等其他免疫細胞出現異常免疫活化和功能障礙[9,11-12]。

表3 機會性感染與CD4+T淋巴細胞的關系Table 3 Correlation between opportunistic infections and CD4+T lymphocytes count

表4 CD8+T淋巴細胞、NK細胞和B淋巴細胞與CD4+T淋巴細胞的關系Table 4 Correlation between CD8+T lymphocytes， NK cells， B lymphocytes and CD4+T lymphocytes

表5 HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細胞的關系Table 5 Correlation between HIV-1 viral load and CD4+T lymphocytes count

大部分HIV感染者在初始感染HIV以后，一般經過6～8年的無癥狀期，最終發展為AIDS。在HIV感染的最終階段，患者CD4+T淋巴細胞計數 ＜200 /μL，且HIV-1病毒載量明顯升高，此時，患者容易出現各種機會性感染。有研究表明，AIDS患者合并機會性感染具有感染多樣性、復雜性的特點，且病死率高[13-15]。另一研究發現，AIDS患者合并機會性感染主要由細菌、真菌和病毒引起[16-17]。本研究中，細菌性肺炎居首位（25.6%），其他常見的機會性感染還包括了EB病毒感染、肺結核、肺孢子菌肺炎和巨細胞病毒感染。

本研究發現，隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低，AIDS患者合并機會性感染的發生例數隨之增加。CD4+T淋巴細胞水平會影響機會性感染的發生，這與文獻報道的結果一致[18]。因而，CD4+T淋巴細胞計數是預測AIDS患者合并機會性感染發生的重要指標。

本研究發現，隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低，CD8+T淋巴細胞和B淋巴細胞計數水平也隨之降低。在CD4+T淋巴細胞計數＜100 /μL時，CD8+T淋巴細胞和B淋巴細胞計數水平明顯低于CD4+T淋巴細胞≥100 μL的其他三組，且差異具有統計學意義（P＜0.05）。NK細胞計數水平也隨著CD4+T淋巴細胞計數水平降低而出現降低，但差異無統計學意義（P=0.182），這可能是由于納入研究的病例數較少的原因。由于 HIV感染不僅能引起CD4+T淋巴細胞的數量減少，同時，還可引起CD8+T淋巴細胞、NK細胞和B淋巴細胞等出現異常免疫激活，從而引起這些細胞死亡，導致殘存免疫細胞的減少。CD4+T淋巴細胞計數的降低預示病情出現了進展惡化，因而，CD8+T淋巴細胞、NK細胞和B淋巴細胞計數也會出現降低，上述免疫細胞的減少增加了機會性感染的發生概率。

本研究發現，當HIV-1病毒載量較高時，CD4+T淋巴細胞計數較低；而當HIV-1病毒載量較低時，CD4+T淋巴細胞計數較高，兩者呈負相關。當CD4+T淋巴細胞計數＜100 /μL時，HIV-1病毒載量明顯高于CD4+T淋巴細胞計數＞350 /μL時，且差異具有統計學意義（P=0.026）。這是由于HIV-1病毒載量的高低代表了體內病毒復制的數量，HIV-1病毒載量越高，CD4+T淋巴細胞在病毒直接或間接的作用下導致其破壞越多，進而導致CD4+T淋巴細胞數量的減少[19]，從而更容易合并機會性感染的發生。目前，預防機會性感染的最有效方法仍是ART[9，20]。ART能夠明顯抑制HIV復制，促進免疫功能恢復，進而降低AIDS患者機會性感染的發生率。

綜上，本地區AIDS患者合并機會性感染的表現復雜多樣，CD4+T淋巴細胞計數水平越低，免疫功能缺陷越明顯，機會性感染的發生率越高。隨著HIV-1病毒載量上升，CD4+T淋巴細胞呈現下降的趨勢。因而，定期監測淋巴細胞亞群和HIV-1病毒載量，可以很好地預測疾病進展，評估抗病毒治療療效，預防機會性感染的發生。