7 種平菇發酵料生產拌料用殺菌劑藥效對比及安全性評價

聞亞美，邵欣欣，丁亞通，孔維麗，馬麗娜，張 輝，黨 帥，黃桃閣，郭艷春

（1.周口市農業科學院 河南周口 466000； 2.河南省農藥檢定站 鄭州 450002； 3.河南省農業科學院 鄭州 450002）

目前，發酵料栽培是平菇栽培常用的生產模式，它是指培養料堆積發酵后，進行食用菌栽培的方法[1]，因其不需要高溫高壓滅菌，不需要凈化接菌，操作過程簡單易學，生產中被大面積推廣應用。1972年，平菇代料栽培首先在河南取得成功。1982 年安陽市農業科學研究所研發的“塑料袋堆積法栽培平菇”試驗成功，更是讓發酵料栽培平菇發展勢頭強勁，并很快在全國普及推廣[2-3]。

近年來，發酵料栽培推廣到山東、河北、寧夏、內蒙古、新疆、安徽等6 個省，在國外也有所發展。由于發酵料栽培沒有經過高溫高壓滅菌這個環節，一般生產上會使用一定劑量的殺菌殺蟲劑來保證生產的順利進行。目前，食用菌病害防治專用藥劑很少，大都采用蔬菜和主要農作物藥劑，濫用現象十分嚴重，常常造成外貿出口食用菌農藥殘留超標現象[4]。張金玲等[5]對2015—2018 年紅河州監測的18 種農產品殺菌劑殘留污染水平進行了報道，發現食用菌中殺菌劑檢出率高。在藥品流通市場，相關管理部門具體管束力量也略顯薄弱。早在2008 年，管道平等[6]就呼吁相關管理部門應根據我國食用菌生產、加工和貿易的實際情況，對農藥進行歸類，進一步完善和修訂我國食用菌安全質量標準。截至2018 年，我國在食用菌上僅登記了11 個產品，其中殺菌劑產品10 個，殺蟲劑產品僅有1 個[7]。因此，解決食用菌類登記農藥品種嚴重短缺問題，篩選出高效、安全的藥劑是十分緊迫的?；诖?，筆者對市場流通并暢銷的7 種殺菌劑進行藥效對比，并對施藥條件下子實體中農藥殘留進行檢測，開展安全性評價，以期為平菇發酵料生產用藥范圍及用藥量提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試品種 平菇為‘德豐5 號’，周口市農業科學院食用菌研究中心保藏。

1.1.2 供試培養料配方 棉籽殼92%，麥麩6%，石灰2%，含水量65%。

1.1.3 試驗儀器與試劑 主要儀器：液質聯用儀（安捷倫6410，2009），氣相色譜儀（瓦里安cp3800，2004）。試驗藥品：所用7 種殺菌劑均為有生產批號的市售產品，具體如表1。

表1 供試用殺菌劑

1.2 方法

1.2.1 試驗設計 平菇生產試驗于2019 年2 月28日至5 月26 日進行，子實體中農藥殘留含量測定于2019 年6 月進行。其中2 月28 日至3 月15 日在周口市農業科學院食用菌研究中心進行原料預濕、發酵、裝袋及接種工作，3 月16 日至5 月26 日在西華縣勤立食用菌專業合作社進行發菌、出菇等工作。發菌期間棚內溫度在15～25 ℃，濕度在45%～70%，出菇期間棚內溫度在24～30 ℃，濕度在48%～72%。

試驗采用隨機區組排列。每個藥劑為1 個處理，每個處理3 次重復，1 次重復60 袋，大棚入口設置保護行。

1.2.2 生產模式 本次試驗分別監測以棉籽殼為主料的平菇發酵料栽培模式下不同殺菌劑的防治效果。

1.2.3 用藥劑量 按照常規生產程序進行生產，在裝袋前加入不同濃度的殺菌劑，以等量清水作為對照。具體用藥劑量見表1。

1.2.4 生產過程 1）建堆發酵：按照培養料配方準備原材料，原材料預濕后拌勻堆成高1.0～1.1 m 的料堆進行發酵，料溫升至50 ℃后開始翻堆，1～2 d 翻堆1 次，共發酵7 d。當料溫達到65 ℃保持24 h 以上，翻堆1 次，當料溫再次達到65 ℃保持24 h 以上發酵即可結束。2）裝袋、接種、發菌與出菇：培養料發酵完成后，按藥劑所使用的劑量，將藥劑拌入發酵好的培養料中，混合均勻后，選用20 cm×45 cm 聚乙烯袋裝袋，鋪3 層菌種接種。

將接種好的菌袋移入西華縣勤立食用菌種植專業合作社大棚進行發菌，期間監測菌絲生長速度及菌袋污染率，記錄氣象資料。

待一潮菇子實體生長至采收期，取樣，-20 ℃保存，同批次送檢。

1.2.5 數據采集與測定方法 菌絲生長速度統計：采用7 d 計量法，統計接種后第5～12 d 的菌絲生長長度，計算出7 d 內的平均生長速度，并進行顯著性檢驗。

菌袋污染率統計：記錄整個發菌過程中染菌袋數，計算每個處理中菌袋的污染率，并進行顯著性檢驗。菌袋污染率/%=染菌袋數/總袋數×100。

平菇產量統計：一潮菇采收后，記錄一潮菇的平菇鮮菇產量，并進行顯著性檢驗。

子實體農藥殘留量測定：樣品送至河南省農藥檢定站分析殘留科，參照GB 23200.113—2018《食品安全國家標準植物源性食品中208 種農藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質譜聯用法》[8]，根據實驗室實際條件，測定其農藥殘留量。

1.3 數據處理與分析

采用Excle 2010 進行數據統計，SPSS 17.0 進行差異性分析。

2 結果與分析

2.1 菌絲生長速度統計

根據接種后7 d 內的平均生長速度，對比不同藥劑處理對菌絲生長速度的影響（表2）。

表2 顯示，80%多菌靈可濕性粉劑用藥處理下，平菇菌絲生長速度為0.38 cm·d-1，顯著高于對照及其他用藥處理下菌絲生長速度；50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑用藥處理下，平菇菌絲生長速度與對照相比，差異達顯著水平；20%二氯異氰尿酸鈉可溶粉劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑用藥處理下，平菇菌絲生長速度與對照相比，無顯著差異；75%百菌清可濕性粉劑用藥處理下，接入的平菇菌種菌絲不能正常生長，有減弱趨勢，這里不再與其他處理對比。即不同藥劑在試驗濃度下，75%百菌清可濕性粉劑有抑制甚至殺滅平菇菌絲的作用，其他6 種藥劑對菌絲生長均沒有抑制作用，均可列為平菇發酵料生產可用備選藥品。

2.2 菌袋污染率統計

從表2 中菌袋污染情況可以看出：50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑用藥處理下，菌袋污染率為0，即沒有發現綠霉、木霉感染，顯著低于對照及其他處理下菌袋污染率。50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑用藥處理與對照相比差異顯著；20%二氯異氰尿酸鈉可溶粉劑用藥處理與對照相比，沒有顯著差異；75%百菌清可濕性粉劑用藥處理下，菌袋污染率過高，與其他處理數據差異較大，為保證數據分析結果的準確性，這里不再將其與其他處理做生物學統計分析。綜上，從發菌期間抑雜菌（綠霉、木霉等）效果來看，不同藥劑在試驗濃度下，50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑、50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑均可作為平菇發酵料生產可用備選藥品，50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑效果較好。

2.3 平菇產量統計

從一潮菇產量來說（表2），50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑用藥處理下產量要顯著高于對照，20%二氯異氰尿酸鈉可溶粉劑與對照相比差異不顯著。50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑用藥處理下產量顯著高于50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑。此外，75%百菌清用藥處理下，平菇菌絲萌發較差，未能產出子實體，無法與其他藥劑進行對比（下同）。綜上，從子實體產量來說，不同藥劑在試驗濃度下，50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑、50%腐霉利可濕性粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑可列為平菇發酵料生產促增產備選藥品。

2.4 出菇期病害統計

觀察出菇期間病害的發生情況，并做好統計。發酵料生產出一潮菇時，子實體、菌袋均沒有發現肉眼可見病害發生，除75%百菌清外，其余6 種藥品藥效沒有明顯差別。

2.5 子實體中農藥殘留量測定

表2 顯示，50%腐霉利可濕性粉劑用藥處理下，一潮菇子實體中腐霉利農殘含量為0.193 mg·kg-1，80%多菌靈可濕性粉劑用藥處理下，一潮菇子實體中多菌靈農殘含量為0.004 9 mg·kg-1，其余編號為2～5 的4 種藥品處理下一潮菇中均未檢出農藥殘留。從食品安全角度來說，在文中用藥劑量下，50%腐霉利可濕性粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑存在安全生產隱患，暫不能被列為平菇發酵料生產安全增產藥品，而75%百菌清，在試驗劑量下，嚴重影響菌袋正常發菌，也不能被列為平菇發酵料生產安全增產藥品。

表2 殺菌劑拌料平菇發酵料生產藥劑篩選試驗統計

3 討論與結論

目前我國的食用菌藥品市場還略顯混亂，一些沒有生產批號的藥品確實存在流通現象，這其中就存在一定的安全隱患。而作為與食品安全息息相關的食用菌產業來說，判斷藥品優劣的標準，安全性是最重要的考量指標。據史琦云等[9]報道，1 kg 平菇干品中，蛋白質含量為194.3 g、粗脂肪17.1 g、粗纖維82.1 g，是一種高蛋白低脂肪食品，可作為“三高”人群的優選食品，因此對其安全性要求更高。

在藥品登記系統，咪鮮胺錳鹽屬于登記較早的食用菌殺菌劑，2010 年就有企業登記用于平菇生產[10]?，F有報道對文中所試其他藥劑也有體現。文中腐霉利按照0.1%拌料平菇培養料，一潮菇中存在腐霉利殘留，殘留量為0.193 mg·kg-1。劉洋[11]、毛春玲等[12]也做過此類研究，他們將腐霉利按照0.5%拌料加入平菇培養料，收獲時期子實體中腐霉利的殘留量小于0.001 mg·kg-1，后續試驗可著重腐霉利的檢出方法及用藥劑量進行優化。文中使用1.25 g·kg-1多菌靈拌料栽培，一潮菇子實體中農殘含量為0.004 9 mg·kg-1，這與魏茂瓊等[13]得到的結果一致，即培養料中的多菌靈可遷移到平菇子實體中。因此，在多菌靈用于平菇生產之前，還要細化其用藥濃度，降低食品安全風險。文中1.5 g·kg-1百菌清拌料栽培，平菇菌絲基本不萌發，沒有子實體產生。這點與李晶等[14]、李冠霖等[15]得出的結果一致，說明在實際生產中應避開此藥劑的高濃度用藥。后續試驗可降低百菌清用藥濃度，進行生產實測。

我國GB 2763—2016《食品中農藥最大殘留限量》[16]標準限值與歐盟等其他標準[17]相比有較大差距。實際生產中，施用單一藥劑可能合乎標準，但不同藥劑總量堆積達到一定數值時，是否存在食品安全風險還不能完全確定。以文中所試藥品腐霉利為例，農殘檢測顯示一潮菇中腐霉利含量為0.193 mg·kg-1，低于GB 2763—2016 中對蘑菇類（鮮）最大殘留限量5 mg·kg-1，但對于消費者來說，食用的這些食品是否有其他類型的農藥殘留，各種農藥之間是否會有協同甚至促進效果，是否會出現農藥堆積問題，最終是否會影響人類身體健康，這些都沒有完全否定的答案。因此，對于存在農藥殘留問題的藥品，不管殘留量與我國現存國標相比差距多少，這類藥品在列入安全可用藥品之前，應細化試驗濃度的設定，確保食品安全。

筆者對7 種市場流通在售藥品、且占有一定市場份額的平菇發酵料生產拌料用殺菌劑藥效進行了藥效對比并對其安全性進行了評價，綜合不同用藥處理下菌絲生長速度、菌袋污染率、一潮菇產量、出菇期子實體和菌袋病害發生情況以及一潮菇中農藥殘留量等生產指標后認為，50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、450 g·L-1咪鮮胺水乳劑表現較好，且無農藥殘留，可列為平菇發酵料生產安全增產藥品。