臨床微生物標本規范采集和送檢在臨床中的重要作用

趙淑鳳，樊玉鳳

（河北省棗強縣人民醫院，河北 棗強）

0 引言

臨床細菌檢驗是指從臨床檢驗的各種標本中分離、培養和鑒定細菌并對所檢測到的細菌進行抗生素敏感性實驗，是感染性疾病病原學診斷、抗菌藥物合理使用以及流行病學調查的依據。為保證正確的細菌檢驗結果，實驗室應負責指導臨床正確采集和送檢臨床各種標本，并對合格標本進行進一步處理[1]。

1 資料與方法

以我院2018年10月至2019年9月送檢的1880例微生物培養及鑒定標本為觀察對象，對所有標本進行染色、培養。試劑：革蘭染色液、抗酸染色液、瑞氏染色液、10%KOH、1% H2SO4。方法：對不同類型標本分別進行染色后顯微鏡鏡檢、培養。

2 結果

兩組微生物標本檢驗情況詳見圖1和圖2，其中陽性為有致病菌檢出，陰性為無致病菌檢出。

圖1 第一組共939例微生物標本分析統計表

圖2 第二組共941例微生物標本分析統計表

通過以上兩組數據比較，第二組不合格標本明顯減少，病原微生物的檢出率有所提高。血液和尿液標本送檢率明顯增多，血培養陽性率明顯提高。

3 討論

隨著當前各種病原體的分布變異以及耐藥率增高,經驗診斷和用藥面臨極大挑戰,這也直接導致臨床對感染性疾病的病原學診斷和治療的需求增加。精準的病原學診斷和治療要求正確的標本采集和運輸[2]。

3.1 臨床微生物學檢驗標本的采集和轉運常見的問題

（1）痰液標本：含有食物殘渣、口水、鼻咽分泌物，為拒收標本；采集痰液標本前已使用抗微生物的藥物。

（2）尿液標本：中段尿接取前沒有清洗，定植菌污染；直接送檢尿袋里的尿液，有污染；有留置管的患者超過72 h有多種細菌定植菌污染。

（3）腦脊液、胸腹水、術后引流液等無菌部位的體液，直接采集引流收集器內的標本送檢，標本被污染。

（4）血液標本：采集時機不準確；護士采血手衛生不合格；病人皮膚不衛生，消毒不合格。

（5）采集封閉傷口分泌物時常消毒不合格或過度消毒；采集開放性傷口分泌物時，不是采集的創面處的分泌物。

（6）糞便標本：采集時不是采取粘液、膿血異常部位；沒有及時送檢，標本污染。

3.2臨床微生物學檢驗標本的采集和轉運應注意和遵循的事項

按WS/T640-2018臨床微生物學檢驗標本的采集和轉運行業標準執行，具體內容如下。

3.2.1標本的采集

（1）標本的采集時機、部位、方法：在抗微生物藥物治療之前或者在起始治療后立即采集標本，治療中為評估治療效果或治療后為評估結局可以進行采樣；應盡快在疾病初發時采集首份標本；避免感染部位周圍以及感染部位附近皮膚或黏膜定植菌群的污染；對于有多種細菌定植的部位，宜選擇合適的方法檢驗特定的病原菌，并防止非致病定植菌群的污染。

（2）采集足夠量的標本用于常規細菌學檢驗，至少送檢0.5 mL或者0.5 g（除外特殊標本）。當送檢標本體積不足時，與臨床溝通，并根據醫囑選擇優先檢驗項目。

（3）血標本采集時機：可疑感染患者出現以下任一指征時，可考慮采集血培養：體溫>38 ℃或<36 ℃；寒戰；外周血白細胞計數增多（>10.0×109/L，特別有“核左移”時）或減少（計數<4.0×109/L）；呼吸頻率>20次/min或動脈血二氧化碳分壓（PaCO2）<32 mmHg；心率>90次/min；皮膚黏膜出血；昏迷；多器官功能障礙；炎癥反應參數如C反應蛋白、降鈣素原（PCT）、1，3-β-D-萄聚糖（G 試驗）升高等。

（4）痰標本采集時機：咳痰適用于肺部感染患者，咳痰前，患者用無菌生理鹽水漱口，指導患者咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物；氣管吸出物，僅當氣管插管的患者出現肺炎癥狀時（如發熱或浸潤），可采集氣管吸出物標本，從氣管中吸痰，無菌容器留取送檢（注：氣管在插管24 h后即有定植菌，若未有肺部感染指征時送檢氣管吸出物，可導致結果與疾病不符）。

（5）尿標本采集：宜采集晨尿，囑患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱內潴留至少4 h以上，不停止尿流，采集中段尿。無癥狀的患者應連續采集3 d晨尿送檢。不宜送檢或接收導尿管的管尖進行培養；通常情況下，帶有留置管的患者48～72 h就會有定植菌，且常為多種細菌。

采集直接或留置導尿管尿液：用肥皂水或清水清洗尿道口，無菌操作將導管通過尿道插入膀胱；棄去先流出的15 mL尿液之后，采集尿液于無菌容器；夾住留置導尿管10～20 min后，用75%酒精消毒導管采集部位，用注射器無菌采集5～10 mL尿液于無菌容器。

（6）糞便標本：在感染急性期采集腹瀉糞便標本，排除一些病原體的攜帶狀態，需要連續3份標本陰性，兩次采集標本間隔48 h。用無菌竹簽挑取標本中異常部分（有粘液、膿液和血液的部分）2～5 mL糞便懸液或2～5 g糞便標本置于無菌容器中，立即送檢。標本拒收：干燥的拭子、含鋇糞便、黃軟成形便、干便或明顯污染的糞便；一天內重復送檢的標本。

（7）分泌物：閉合性膿腫，消毒皮膚后，用注射器抽取膿腫物于無菌管中；開放性膿腫，用無菌生理鹽水去除表面分泌物，盡可能采集抽吸物，或將采樣拭子插入至病灶的底部或膿腫壁取其新鮮邊緣部分。

（8）子宮頸內或宮頸標本：用溫鹽水濕潤陰道窺器；使用陰道窺器輕輕按壓子宮，打開窺器，使用藻酸鈣、滌綸或沒有毒性的棉拭子采集分泌物。或者打開窺器，將拭子插入宮頸管1～2 cm，轉2～3圈采集分泌物，必要時停留20～30 s并轉動取樣；懷疑淋病奈瑟菌時，可以同時采集直腸拭子與子宮頸標本。

（9）男性泌尿生殖道標本：從尿道擠壓分泌物，一根拭子采集分泌物用于培養，保存于轉運培養基中送檢。另一根拭子采集分泌物用于涂片，將拭子在玻片表面滾動2～3 cm；若無分泌物，可將泌尿生殖道拭子插入尿道約2 cm，輕輕旋轉取出。將標本盡快接種于特殊培養基，并置于35 ℃ CO2環境中培養。接種后的拭子制備、涂片用于染色，最好采集兩個拭子，分別用于涂片和培養（注：尿道分泌物革蘭染色查到白細胞內革蘭陰性雙球菌可作為男性淋病患者的診斷依據）。

3.2.2 標本轉運

標本采集手冊應當明確說明某些檢驗項目的特殊轉運方法，以保證醫護人員、標本運送人員在標本采集之前能獲得有關標本采集和轉運的準確信息；標本的轉運應由經過培訓的專人負責。標本采集后，應減少運送環節，在規定時間內運達實驗室，并盡可能縮短轉運時間。

用于普通細菌學檢驗的標本宜在2 h內送到實驗室。如果轉運時間超過2 h，宜使用轉運培養基或在冷藏條件下轉運；一般而言，用于細菌培養的標本室溫下保存不能超過24 h；血培養標本不可以冷藏轉運；標本量較少的體液標本（<1 mL）或組織標本（<1 cm3），宜在30 min內送到實驗室。采集后立即送檢，對周圍環境敏感的細菌如百日咳鮑特菌、志賀菌屬、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和厭氧菌；可能分離出對低溫敏感細菌的標本，采集后不宜冷藏，如腦脊液、生殖道、眼部、中耳及呼吸道標本；對低溫敏感的細菌如淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌注意保溫送檢。

3.3 小結

標本的正確采集、轉運和保存是保證微生物學檢驗結果準確的前提條件。標本采集工作涉及醫生、護士、病人和其他工作人員，很難由實驗室完全控制，是全面質量管理最薄弱的環節。所以實驗室就采取制定標本采集手冊、監控標本運送、制定不合格標本拒收標準等措施，來保證標本質量[3]。臨床微生物檢驗專業人員嚴格按照行標執行，并督導接收合格的臨床微生物學檢驗標本，提高病原微生物的檢出率，為臨床疾病治療提供有效信息。