囊胚發育速度對解凍移植周期妊娠結局的影響研究

丁婷 蘇雪松 付蒙

【摘 要】目的：探討囊胚發育速度對解凍移植周期妊娠結局的影響。方法：采用單因素logistic回歸分析評估230例囊胚解凍移植周期妊娠結局的影響因素。 結果：移植D5囊胚臨床妊娠的可能性顯著高于移植D6囊胚（OR： 0.560， P<0.05）。結論：囊胚發育速度可能對囊胚解凍移植周期的妊娠結局有一定的影響。

【關鍵詞】 玻璃化冷凍;囊胚發育速度;囊胚解凍移植;妊娠結局

【中圖分類號】R285.5 【文獻識別碼】B【文章編號】1002-8714（2020）09-0009-01

玻璃化冷凍是一種快速冷凍方法，采用高濃度冷凍保護劑，使胚胎保持在相對穩定的玻璃樣狀態，減少冰晶對胚胎的機械性損傷。囊胚移植有助于選擇發育潛能更好的胚胎。玻璃化冷凍囊胚移植能夠改善囊胚存活率和妊娠結局。然而，囊胚發育速度對妊娠結局的影響目前尚無定論。本研究采用單因素logistic回歸分析評估囊胚發育速度對囊胚解凍移植周期妊娠結局的影響。

1 材料與方法

1.1研究對象

對2017年3月～2019年10月共230例囊胚解凍移植周期進行單因素logistic回歸分析。排除同時移植D5及D6囊胚的解凍移植周期。

1.2 方法

1.2.1 胚胎繼續培養及囊胚評分

在取卵后第3天，挑選質量較好的2～4枚胚胎進行移植或冷凍，將剩余的胚胎繼續培養至D5或D6，根據Garnder囊胚分級法進行囊胚評分。

1.2.2 囊胚玻璃化冷凍和解凍

冷凍標準為3～6期CB級以上的囊胚。冷凍前用激光系統（RI）對囊胚進行人工皺縮，采用玻璃化冷凍和解凍試劑（Kitazato）進行囊胚冷凍和解凍，解凍后進行輔助孵化，轉移至G-2培養液（Vitrolife）液滴中，在6% CO2，5% O2和89% N2條件下培養2 h，細胞損傷<50%，囊胚腔擴張，則進行移植。

1.2.3 子宮內膜準備及胚胎移植

子宮內膜準備包括自然周期、人工周期或促排卵周期。在子宮內膜達到合適的厚度或排卵后進行黃體支持，6天后進行囊胚移植，移植后繼續黃體支持至孕10～12周。移植后12天檢測血清HCG，血清HCG陽性后4周檢查超聲，超聲檢查可見宮內孕囊為臨床妊娠。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件進行統計學分析。采用單因素logistic回歸分析評估囊胚解凍移植周期臨床妊娠的影響因素，因變量“臨床妊娠情況”編碼為0時代表未妊娠，1代表妊娠。P<0.05為有顯著統計學意義。

2 結果

囊胚冷凍天數對妊娠為負向影響，D6冷凍囊胚妊娠的可能性是D5冷凍囊胚的0.560倍，降低了44%，移植D5囊胚臨床妊娠的可能性顯著高于移植D6囊胚;子宮內膜厚度及移植胚胎數對臨床妊娠為正向影響;年齡、不孕年限、不孕類型及受精方式對臨床妊娠的影響未達顯著（見表）。

3 討論

在Haas等[1]的研究中，與D5相比，D6進行玻璃化冷凍的囊胚臨床妊娠的可能性顯著較低（OR： 0.54， P<0.05）。優質囊胚進行單囊胚移植，D6的臨床妊娠率及繼續妊娠率（22%， 19% ）都顯著低于D5（42%， 40%）。Alice Tubbing等[2]的結果表明，D5冷凍是囊胚解凍移植臨床妊娠和活產的獨立預測指標，在控制混雜因素后結果仍然是可靠的。

我們的研究結果顯示，與D5冷凍囊胚相比，D6冷凍囊胚妊娠的可能性降低了44%（OR： 0.560， P<0.05），移植D5囊胚臨床妊娠的可能性顯著高于移植D6囊胚。

盡管玻璃化冷凍已經廣泛應用于囊胚冷凍，玻璃化冷凍技術還遠遠沒有標準化。擴張的囊胚腔中有較多的液體，在冷凍過程中容易受到損傷，人工皺縮能夠減少液體體積，縮短平衡時間，提高囊胚解凍后的存活率。

在囊胚解凍移植周期中，囊胚形成的速度可能對胚胎的發育潛能和妊娠結局有一定的影響，D6囊胚發育較慢及相對較差的妊娠結局可能與胚胎自身的因素、非整倍性發生率及體外培養環境有關。由于D5囊胚具有顯著較好的臨床結局，冷凍1枚D5囊胚或2枚D6囊胚可能能夠節省胚胎學家的時間及冷凍保存空間，并有利于降低多胎妊娠率。

參考文獻

[1] Haas J， Meriano J， Laskin C et al. Clinical pregnancy rate following frozen embryo transfer is higher with blastocysts vitrified on day 5 than on day 6[J]. Journal of assisted reproduction and genetics， 2016， 33 （12）： 1553-1557.

[2] Tubbing A， Shaw-Jackson C， Ameye L et al. Increased live births after day 5 versus day 6 transfers of vitrified-warmed blastocysts[J]. Journal of assisted reproduction and genetics， 2018， 35 （3）： 417-424.