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魚尾部取血的要點和關鍵

2020-10-13 12:48:26魏京廣吳金英
生物學通報 2020年12期

張 平 魏京廣 吳金英*

(1 中山大學生命科學學院 廣東廣州 510275 2 華南農業大學海洋學院 廣東廣州 510642)

魚類生理學的許多實驗都需要抽取血樣進行分析測定,目前常用的魚類取血的方法大概有3種:心臟取血、斷尾取血及尾部血管取血[1-5]。心臟取血血量足,但取血后魚必然死亡,而且許多實驗不需要那么大量的血液。斷尾取血會夾雜著體表的粘液或水分,甚至還會有體內的組織等,適用于一些要求不高或對雜質影響不計的實驗,體長小于5 cm 的魚斷尾后可能根本觀察不到血液流出。尾部血管取血的方法相對簡單,并且在3 種方法中對魚的傷害最小,取血后魚還可放歸水體中存活,此方法尤其適用于需連續性數據的實驗,但操作有一定的技術難度。

筆者在多年的教學科研中探索出了一套較為成熟的魚尾部血管取血的方法,只要熟練掌握其中幾個要點并注意到關鍵問題,就可又快又好地獲取魚血。現以吉富羅非魚為例,對流程和技術要點進行介紹。

1 魚體保定

抓魚前首先要了解魚類尾柄的位置,從臀鰭基部后端至尾鰭基部的部分都是尾柄(圖1);熟悉魚類尾椎骨、尾動脈和尾靜脈的情況(圖1),其尾椎背面是椎弓,延伸成椎棘;腹面是脈弓,延伸成脈棘;椎弓容納和保護脊髓,脈弓包圍尾動脈和尾靜脈,需明確其脈弓內具有脈孔、有尾動脈和尾靜脈通過;并熟練掌握注射器的使用。如果采血量不多,可采用濕毛巾包埋魚的頭部,盡量不要麻醉,麻醉會影響后續相關實驗。如果抽血量較大,則需要麻醉魚。可佩戴棉線手套,保持魚鰓部有水流,盡量避免用手直接接觸魚體,減少感染。

圖1 鯉魚的骨骼[6]

2 抽血

用注射針頭從尾柄腹方正中部前方刮掉一片魚鱗,略為傾斜地插入尾椎骨附近(圖2、圖3),并將針稍微后退一些,然后小心推進,進入血管棘之間,輕輕刺破流經血管弧的動脈或靜脈,若這時見注射針端有血液涌出(圖4),表明已正確刺破尾部血管;隨后輕拉注射柄使注射針筒出現負壓,血液就會慢慢注入而得到血樣,達到適合的量后拉出針頭(圖5);若未達到所需血量,可將針筒拔出且暫時留下針頭,將針筒內的血液注進收集管內,然后,再接上原來的針頭,再次抽取血樣,此操作過程可反復多次直至取夠所需血量。

圖2 進針位置(尾柄腹方正中部)

圖3 進針操作

圖4 血液涌出

圖5 血液逐漸充滿針管

3 拔針止血

用手指壓住取血部位,經1 min 左右,直至不滴血為止。

4 魚回歸水體

拿走毛巾,盡快將魚放回水體中并充氧,以便下次繼續使用。

5 小結

整個流程的難點是正確刺破魚尾部血管,以及尾部血管進針位置是在魚尾柄腹方正中部前方。如果刺破血管失敗,再次扎針時必須要移向原針口的前方處。抽血過程中,如果發現血液不再繼續注入針筒,可輕微轉動針頭直到血液繼續注入,若還無效果,則將注射器拔出,清洗干凈或取新的注射器重新操作。

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