一株野生楊樹桑黃的馴化栽培研究

杜忠偉 胡志強 亢學平 王 旭 李 健 王 鑫*

一株野生楊樹桑黃的馴化栽培研究

杜忠偉1胡志強 亢學平 王 旭 李 健 王 鑫*

（延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學院，國家食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系延吉綜合試驗站，吉林 延吉 133000）

對采自延邊地區(qū)的一株野生楊樹桑黃進行馴化栽培試驗，經(jīng)組織分離獲得菌種，提純培養(yǎng)后制備成栽培母種、原種和栽培種，并進行出菇試驗。結(jié)果表明：該菌株菌絲生長速度快，長勢好，原種、栽培種長滿時間分別為35天和40天；菌絲黃色，抗雜能力強；子實體形成較快，形態(tài)好，適合作育種材料。

楊樹桑黃；組織分離；馴化栽培；生長表現(xiàn)

桑黃是一類真菌的統(tǒng)稱，楊樹桑黃（）屬其中一種，簡稱楊黃，生長在楊樹的活立木和倒木上，廣泛分布于我國東北地區(qū)，分類學地位隸屬真菌界、擔子菌門、層菌綱、非褶菌目、銹革孔菌科、桑黃孔菌屬（）[1, 2]。

桑黃在我國有著悠久的應用歷史，傳統(tǒng)醫(yī)學和現(xiàn)代科學研究都表明其具有很好的藥用價值，在抗腫瘤、抗炎、抗氧化、提高免疫力等方面具有顯著的效果[3-6]。隨著人們對桑黃研究的深入，日本和韓國率先進行了人工栽培，我國近些年桑黃人工栽培研究也取得顯著成果[7-9]，人工栽培桑黃量巨大，且栽培模式多樣化。但在桑黃菌種選育和高效高產(chǎn)的栽培技術(shù)方面，仍需進一步研發(fā)。

本研究對在東北地區(qū)野生桑黃調(diào)查中發(fā)現(xiàn)的一株楊樹桑黃，進行菌種分離及馴化栽培，成功獲得子實體，為桑黃優(yōu)良菌種的選育提供基礎(chǔ)材料。

1 材料與方法

1.1 菌株獲得

野生楊黃子實體于2017年4月，采集自吉林省延邊泉水洞林場（海拔720～910 m）的野生山楊樹干，子實體呈半球形，邊緣黃色，中間深褐色至黑色（圖1）。經(jīng)組織分離、提純獲得純菌種，編號為YS1。

圖1 野生楊樹桑黃子實體

1.2 培養(yǎng)基制作

母種培養(yǎng)基制作：稱取麥麩80 g、豆粉6 g，加入到1 000 mL的水中煮沸，15 min后過濾獲得上清液，加水定容至1 000 mL，倒入鍋中煮沸，加入葡萄糖20 g、瓊脂粉15 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g。

原種培養(yǎng)基配方：新鮮玉米粒86%，麩皮12%，碳酸鈣2%。栽培種培養(yǎng)料配方：闊葉硬雜木木屑78%（粗/細比為2/1）、麥麩17%、豆粉3%、石膏1%、石灰1%，含水量65%。

1.3 試驗方法

（1）母種制作。將野生楊黃子實體進行組織分離，組織塊放入母種斜面試管培養(yǎng)基上，置于27.5 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3～5天后，檢查雜菌污染情況，剔除感染細菌、霉菌的試管，挑出生長致密、微黃、健壯的菌絲生長尖端接種到試管培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得純菌種，制作成栽培母種。

（2）原種制作。按照原種培養(yǎng)基配方，將玉米粒提前浸泡3天，撈出加入麩皮、碳酸鈣，經(jīng)混合均勻后裝入750 mL菌種瓶，121 ℃高壓滅菌2 h，冷卻至30 ℃后在超凈工作臺中接種。接種完畢后將原種放入27.5 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

（3）栽培種制作。將配置好的培養(yǎng)基裝入16.5×38（cm）的聚丙烯菌袋中，每個菌袋裝濕料2.5 kg。滅菌、接種、培養(yǎng)方法同原種。菌包長滿后進行出菇管理。

試管母種制作10支，原種制作10瓶，栽培種制作100袋，通過對母種、原種、栽培種的培養(yǎng)，分別記錄母種萌發(fā)時間，菌絲生長速度、長勢、菌絲體顏色，菌種長滿時間，菌袋顏色和污染率。

（4）出菇管理。出菇選擇在溫室大棚內(nèi)進行，長滿的菌包經(jīng)過后熟培養(yǎng)，轉(zhuǎn)移至溫室大棚內(nèi)進行開口出菇。將菌包倒放，在距離頂端5 cm處開長5～8 cm、寬1～1.5 cm的口。開口后擺放在地面上，覆蓋塑料薄膜和遮陽網(wǎng)，在地面澆水，保持棚內(nèi)濕度85%～90%，溫度在28～30 ℃。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌種培養(yǎng)

培養(yǎng)結(jié)果顯示，接種2天后菌種萌發(fā)，在試管中菌絲平均生長速度為1.2 cm/d，原種和栽培種滿瓶和滿袋時間分別為35天和40天。隨培養(yǎng)時間延長，菌絲由白色變?yōu)榈S色至深黃色，其中栽培種菌包長滿后經(jīng)光照刺激變成黃棕色（表1、圖2）。

表1 母種、原種和栽培種培養(yǎng)期性狀

圖2 母種（左）、原種（中）與栽培種（右）外觀

2.2 出菇情況

栽培袋開口后3～5天，開口處菌絲恢復，7天后長出原基，隨著原基膨大，分化形成子實體。子實體形態(tài)與野生者相似，為半球形；菌蓋表面邊緣顏色淺，向內(nèi)顏色變深；菌孔為深褐色。子實體的形成照片見圖3。

圖3 馴化栽培子實體形成過程照片

3 結(jié)論與討論

本試驗通過采用常規(guī)的菌種分離和培養(yǎng)方法初步獲得楊樹桑黃菌株，然后采用東北地區(qū)的棚式地擺栽培方法，成功獲得子實體。在溫室大棚內(nèi)栽培出菇中發(fā)現(xiàn)，子實體的形成受溫度和濕度影響較大，溫度在27～30 ℃，空氣相對濕度在85%～90%時，子實體生長較快。由于夏季悶熱潮濕，易產(chǎn)生木霉等雜菌，要加強通風管理。該菌株子實體顏色易受光照強度影響，棚上覆蓋遮陽網(wǎng)，避免較強的光線照射，保持棚內(nèi)光照強度在200～300 lx，產(chǎn)生的子實體顏色較黃。秋季于室外白天氣溫低于15 ℃時進行采收，晾曬，平均每袋產(chǎn)楊樹桑黃25～35 g（干重）。

隨著桑黃的藥用價值被越來越多的人了解，桑黃產(chǎn)業(yè)會有巨大的發(fā)展空間，優(yōu)質(zhì)桑黃的科學高效栽培方法也將會成為關(guān)注的熱點。本試驗以東北長白山地區(qū)的野生桑黃資源為對象，進行馴化栽培，為本地區(qū)優(yōu)良桑黃菌種的選育，以及區(qū)域性特色栽培品種和模式方法的建立提供依據(jù)。

[1] 吳聲華, 黃冠中, 陳愉萍, 等. 桑黃的分類及開發(fā)前景[J]. 菌物研究, 2016, 14(04): 187-200.

[2] 李玉, 李泰輝, 楊祝良, 等. 中國大型菌物資源圖鑒[M]. 中原農(nóng)民出版社, 2016: 483.

[3] 王華林, 溫萬芬. 桑黃的藥用價值研究進展[J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2015, 26(11): 2747-2750.

[4] 曹紅妹, 胡桂萍, 石旭平, 等. 藥用真菌桑黃的研究進展[J]. 蠶業(yè)科學, 2019, 45(02): 285-292.

[5] 朱琳, 崔寶凱. 藥用真菌桑黃的研究進展[J]. 菌物研究, 2016, 14(04): 201-209.

[6] 孫培龍, 徐雙陽, 楊開, 等. 珍稀藥用真菌桑黃的國內(nèi)外研究進展[J]. 微生物學通報, 2006(02): 119-123.

[7] 杜萍, 張春鳳, 崔寶凱, 等. 藥用真菌桑黃的人工栽培技術(shù)研究[J]. 中國食用菌, 2009, 28(03): 35-37.

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[9] 于文杰, 秦立武, 吳秀鈴, 等. 長白山區(qū)桑黃生態(tài)栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 農(nóng)業(yè)與技術(shù), 2017, 37(19): 14-16.

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項（CARS-20）

杜忠偉（1989—），男，碩士，助理研究員，從事食藥用菌研究。E-mail：337230214@qq.com。

王鑫（1968—），女，大專，研究員，從事食藥用菌研究。E-mail：ybnkysyj@163.com。

S567.3

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2095-0934（2020）05-325-03