武漢地區表觀健康人群脂蛋白相關磷脂酶A2水平調查

梁 濤，劉 鳳，張德太，王 琳，胡麗華

（華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院檢驗科，湖北 武漢 430022）

隨著生活水平的不斷提高，我國居民的飲食及生活習慣發生了很大變化，導致心腦血管疾病的發生率逐年升高。心腦血管疾病一旦突然發作，往往會造成嚴重的后果。因此，有必要早期篩查出高風險人群，提供預警信號，加強早期預防工作。然而，目前尚缺乏針對表觀健康人群的有效的心腦血管疾病發生風險預測指標。脂蛋白相關磷脂酶A2（lipoproteinassociated phospholipase A2，Lp-PLA2）是一種具有多種促炎性質的酶，廣泛參與動脈粥樣硬化斑塊形成、破裂等過程，可作為冠心病和缺血性腦卒中的獨立危險預測因子[1-2]。中國老年學學會心腦血管病專業委員會建議將Lp-PLA2作為預測心腦血管疾病事件發生風險的指標[3]。目前，有關Lp-PLA2在冠心病、動脈粥樣硬化、腦梗死等心腦血管疾病中的應用的研究較多，但對于Lp-PLA2在表觀健康人群中的篩查價值少有研究。為此，本研究擬通過檢測血清Lp-PLA2水平，評估武漢地區表觀健康人群Lp-PLA2水平的分布、陽性檢出率及Lp-PLA2水平升高者與正常者之間相關資料的差異，為早期預測表觀健康人群心腦血管疾病發病風險提供參考依據。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2018年4月—2019年4月在華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院體檢中心的體檢者。體檢內容包括一般內科檢查、外科檢查、心電圖、血常規、尿常規、血壓、胸部X線檢查、心臟B超、頭部電子計算機斷層掃描（computed tomography，CT）、常規生化項目檢測及免疫項目檢測等。根據體檢結果

排除血壓異常、急性感染、慢性感染、惡性腫瘤、近期手術史、近期用藥史以及有嚴重肝、肺、腎等重要器官功能障礙的體檢者，根據影像學檢查結果及相關調查結果排除既往有心肌梗死、冠心病及腦梗死治療史的體檢者。本研究共入組表觀健康者1 503名，其中男1 010名、女493名，年齡17～86歲。收集所有對象的一般資料，包括年齡、性別及總膽紅素（total bilirubin，TB）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）、丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（aspartate aminotransferase，AST）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、γ-谷氨酰基轉移酶（gamma-glutamyltransferase，GGT）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、胱抑素C（cystatin C，Cys C）、血糖（glucose，Glu）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、載脂蛋白A（apolipoprotein A，apo A）、載脂蛋白B（apolipoprotein B，apo B）、脂蛋白（a）[lipoprotein（a），Lp（a）]等常規生化指標的檢測結果。

1.2 方法

采用含惰性分離膠的促凝管采集所有研究對象空腹靜脈血3 mL，1 500×g離心10 min，分離血清，1 h內完成檢測，剩余血清-20 ℃冷凍保存。

Lp-PLA2采用NORMAN散射比濁分析儀（南京諾爾曼生物技術有限公司）及配套試劑（散射免疫增強比濁法）檢測，試劑盒檢測上限為2 000 ng/mL，參考區間為＜200 ng/mL，以≥200 ng/mL為升高（陽性）標準。血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）采用乳膠增強免疫比濁法檢測，試劑盒、質控品及校準品均購自廣州微米生物科技有限公司。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）采用酶循環法檢測，試劑盒、質控品及校準品均購自北京九強生物技術股份有限公司。檢測儀器均為AU5800全自動生化分析儀（美國Beckman Coulter公司）。所有操作均嚴格按儀器和試劑盒說明書要求進行。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統計分析。所有計量數據經正態性檢驗后均呈偏態分布，以中位數（M）[四分位數（P25～P75）]表示，各組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗。Lp-PLA2與其他項目的相關性評價采用Spearman相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同性別表觀健康者一般資料分析

所有研究對象男、女性之間年齡差異無統計學意義（P＞0.05），男性血清Lp-PLA2水平高于女性（P＜0.001）。1 503名表觀健康者血清Lp-PLA2水平為130（100～238）ng/mL，有413名（27.48%）血清Lp-PLA2陽性，其中男性的陽性率為20.96%（315/1 503），女性的陽性率為6.52%（98/1 503）。男性Lp-PLA2陽性率明顯高于女性（P＜0.001）。見表1。

表1 不同性別表觀健康者一般資料分析

2.2 不同年齡表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率

在表觀健康者總體人群及男、女性人群中，≥61歲組Lp-PLA2陽性率均高于41～60歲組及≤40歲組，且41～60歲組血清Lp-PLA2水平最高。見表2～表4。

表2 不同年齡表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

表3 不同年齡男性表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

表4 不同年齡女性表觀健康者血清Lp-PLA2水平及陽性率比較

2.3 Lp-PLA2升高組及Lp-PLA2正常組一般資料及常規生化指標比較

將1 503名表觀健康者按血清Lp-PLA2水平分為Lp-PLA2升高組（413名）及Lp-PLA2正常組（1 090名）。Lp-PLA2升高組年齡、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），2個組之間TC、LDL-C、Lp（a）差異無統計學意義（P＞0.05）。見表5。

2.4 不同程度Lp-PLA2升高者一般資料及常規生化指標比較

將413名Lp-PLA2升高者按血清Lp-PLA2水平分為輕度升高（200～300 ng/mL）組、中度升高（301～400 ng/mL）組、高度升高（＞400 ng/mL）組。高度升高組LP-PLA2、SAA、GGT、Glu水平顯著高于中度升高組及輕度升高組（P＜0.05），其他指標3個組之間差異無統計學意義（P＞0.05）。見表6。

表5 Lp-PLA2升高組及Lp-PLA2正常組一般資料及常規生化指標比較

2.5 Lp-PLA2升高組Lp-PLA2與其他指標的相關性分析

Spearman相關分析結果顯示，Lp-PLA2與SAA、GGT呈正相關（r值分別為0.422、0.162，P值分別為＜0.001、0.001），與其他指標[DBil、ALT、AST、ALP、Cr、BUN、UA、Cys C、Glu、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apo A、apo B、Lp（a）、Hcy]均無相關性（r值分別為-0.059、0.03、-0.023、0.114、-0.022、0.034、-0.002、0.016、0.051、-0.070、-0.080、-0.020、-0.053、-0.034、-0.051、0.047、-0.006，P＞0.05）。

表6 不同程度Lp-PLA2升高者一般資料及常規生化指標比較

3 討論

目前，心腦血管疾病已成為嚴重影響人類健康的一種具有致殘性、致死性危險的疾病。然而，心腦血管疾病在發生之前往往難以被察覺，因此迫切需要能早期預警心腦血管疾病發生風險的生物標志物，以便在表觀健康人群中篩選出有高發病風險的個體。近年來，有多種生物學標志物被廣泛研究，Lp-PLA2是其中最受關注的指標之一，尤其是其促進動脈粥樣硬化的作用逐漸被重視[4]。盡管關于Lp-PLA2與動脈粥樣硬化、心肌梗死、腦梗死等心腦血管疾病的研究已較多，但Lp-PLA2在表觀健康人群中的篩查價值卻較少被關注，因此本研究對湖北省武漢地區1 503名表觀健康者的血清Lp-PLA2水平進行了分析。結果顯示，男性血清Lp-PLA2水平明顯高于女性（P＜0.001）；在1 503名表觀健康者中，血清Lp-PLA2水平超過參考區間的有413名，陽性率為27.48%，其中男315名、女98名，男性的Lp-LPA2陽性率高于女性（P＜0.001）。由于本研究的入組人數有限，男性發生心腦血管疾病的風險是否比女性更高，或性別對Lp-PLA2水平的影響還有待更廣泛、更深入的流行病學調查結果加以證實。有研究結果顯示，血清Lp-PLA2活性存在性別差異，女性Lp-PLA2活性與雌激素水平相關[5]。為了分析Lp-LPA2與年齡是否存在關聯性，本研究將所有對象按年齡分為≤40歲組、41～60歲組和≥61歲組，結果顯示在表觀健康者總體人群及男、女性人群中，≥61歲組的Lp-PLA2陽性率均高于41～60歲組及≤40歲組，但其血清Lp-PLA2水平卻未見顯著升高，血清Lp-PLA2水平最高的是41～60歲組，這種現象可能與本研究≥61歲的受試者過少有關。豐睿捷等[6]在建立健康成人血清Lp-PLA2活性參考區間時發現，血清Lp-PLA2活性會隨著年齡緩慢升高。因此，我們將在后續研究中擴大老年人群的樣本量，以驗證這一結果。

本研究進一步分析了Lp-PLA2升高者與Lp-PLA2正常者之間常規生化指標的差異，結果顯示Lp-PLA2升高組年齡、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常組（P＜0.05），這提示Lp-PLA2升高組可能存在肝、腎功能受損及血脂和/或Glu異常現象。本研究結果還顯示，Lp-PLA2高度升高組僅SAA、GGT、Glu水平顯著高于中度升高組及輕度升高組（P＜0.05），這為Lp-PLA2聯合其他指標預測表觀健康者心腦血管疾病的發生提供了參考依據。由于本研究并未對上述Lp-PLA2陽性者，尤其是具有較高Lp-PLA2水平的陽性者進行定期、長期的隨訪，因此難以預測其心腦血管疾病事件是否真正發生。此外，本研究中Lp-PLA2僅與SAA、GGT呈正相關（r值分別為0.422、0.162，P值分別為＜0.001、0.001）。Lp-PLA2與SAA相似，在血管炎癥反應中發揮一定的作用，但Lp-PLA2與GGT呈正相關的原因尚不清楚，還有待后續進一步研究。

綜上所述，武漢地區表觀健康人群中具有較高心腦血管疾病潛在風險的人并不少見，因此有必要在表觀健康人群中開展Lp-PLA2篩查，從而實現對心腦血管疾病的早期發現、早期干預。