茉莉紫蘇復合濃縮液對高血糖小鼠血糖影響的研究

程琳杰，吳榮書

（云南農業大學食品科學技術學院，云南昆明650201）

隨著物質生活的不斷提高，糖尿病發病人群有增加的趨勢，目前糖尿病尚不能完全治愈，而針對性藥物大多是由化學方法合成，雖會起到一定控制血糖的作用，但長期服用，也會同時出現一些副作用，如耐藥性、器官的損害等[1]。現有研究證明，植物中所提取的多糖、黃酮等功能物質，對高血糖動物有降低血糖的功效，在達到有效控制血糖的同時，可降低對身體的危害性[2]。

茉莉花是一種木犀科素馨屬植物，氣味極香，是制作花茶的重要原料之一，還是重要的香精香料[3]。茉莉花具有消脹氣、理氣止痛、溫中和胃、消腫解暑、強化免疫系統的功效，并對痢疾、腹痛、結膜炎及瘡毒等具有良好的消炎解毒的作用[4]。近年來，對于茉莉花的主要研究集中在揮發油、脂肪類、黃酮、多糖類成分上。研究證明，多糖具有調節免疫、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降膽固醇、降血脂等功效[5]。基于目前的研究表明，茉莉花具有提高免疫力、預防心腦血管疾病等多種作用[6]。

紫蘇含有較高的營養價值，莖、葉、籽均可食用，其葉中含有多種黃酮及黃酮苷類化合物，大量優質蛋白質，氨基酸種類多、含量豐富，其中的酚類物質，具有抗菌、消炎、延緩衰老、抑制腫瘤、降血脂、抗菌等作用[7]；同時還富有植物蛋白及多種微量元素。紫蘇葉作為藥食同源植物，被廣泛用于醫藥、食品、香料等行業[8]。

目前尚未發現對于茉莉紫蘇的有效物質進行粗提，并將粗提液進行濃縮、復合，對動物小鼠進行降血糖的實驗研究，基于現狀，本試驗使用茉莉花與紫蘇葉的復配濃縮液，對鏈脲佐菌素的高血糖小鼠模型進行實驗，通過茉莉紫蘇復合濃縮液的低、中、高3個劑量組對高血糖小鼠的飲食、體重、血糖及臟器指數的影響，證明茉莉紫蘇復合濃縮液對高血糖具有明顯降低作用，驗證其降血糖功能，為保健食品進一步研究，提升食用鮮花產業奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

茉莉花：昆明中藥材市場；紫蘇葉：安徽多善堂藥業有限公司；果糖（biosharp）：上海麥克林生物科技有限公司；清潔級昆明種雄性小白鼠 90 只，（20±2）g、鏈脲佐菌素：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；二甲雙胍格列本脲：亞寶藥業四川制藥有限公司。

1.2 試驗儀器

粉碎機（JHF-250A）：昆明鐵申商貿有限公司；超聲波清洗儀（SK2200H）：上海科導超聲儀器有限公司；酶標儀（WELL Read）：上海豫東科技有限公司；真空濃縮離心機（miVac Quattro）：上海精密科學儀器有限公司；三諾血糖測試儀（GA-3）：三諾生物傳感股份有限公司；離心儀（TDL-50B）：上海儀器廠。

1.3 試驗方法

1.3.1 茉莉紫蘇復合濃縮液的制備

茉莉花破碎，按料液比1∶25（g/mL）加水，浸提溫度75℃，浸提時間90 min，超聲時間20 min進行提取，提取液在40℃下濃縮9 h，得到茉莉濃縮液；紫蘇葉破碎，按料液比1∶20（g/mL）加水，浸提溫度75℃，浸提時間40 min，超聲時間40 min的條件進行提取，濃縮液在60℃下濃縮5 h，得到紫蘇濃縮液；將得到的茉莉花濃縮液與紫蘇濃縮液按照9∶1的體積比進行混合，復合濃縮液冷藏備用。

1.3.2 動物高血糖模型的建立

選擇體質量為（20±2）g的昆明種雄性小鼠70只[9]，適應性喂養3 d，3 d后，隨機取8只小鼠作為正常對照組，其余小鼠作為高血糖模型組，并將高血糖模型組的飲用水換成濃度為20%的果糖水，正常對照組飲食不變，繼續喂養21 d后，斷糧斷水12 h，采用腹腔注射方法，對正常對照組小鼠腹腔注射生理鹽水、高血糖模型組注射鏈脲佐菌素溶液[現配現用，低溫保存，采用pH值為4.4的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液配制濃度為1.5%的鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）溶液]，1次/d，72 h后對除正常對照組外的其他組小鼠進行尾尖采血測血糖[10]，對血糖不達標的小鼠，繼續采用相同的操作方法，采用三諾血糖儀測定小鼠血糖，選取空腹血糖值大于11.1 mmol/L的小鼠[11]進行實驗。

1.3.3 分組設計

除正常對照組外，其余高血糖建模小鼠隨機分為5組：模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組8只。低劑量組、中劑量組、高劑量組分別灌胃6、12、18 mL/（kg·d）[12]，給藥組每天灌胃二甲雙胍格列本脲（150 mg/kg）1次[13]，正常對照組和模型組分別灌胃等體積的生理鹽水每日1次，連續28 d，各組給基礎飼料和蒸餾水。分別在第0天、第14天、第28天，對各組小鼠測體重，并斷尾取血，測定血糖，測血糖前，斷糧斷水12 h。每日在灌胃前，稱量記錄飲水量、進食量。

1.3.4 檢測指標

分別于小鼠建模前、建模后、給藥的第7天、第14天、第28天，斷水斷糧12 h，斷尾取血，測定血糖值。給藥28d后，小鼠摘眼球取血，收集血液，采用4000r/min、離心15 min，提取血清，測定甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein，LDL-C）4項指標；解剖，取肝臟、脾、胸腺，生理鹽水沖洗，濾紙吸干稱量，記錄臟器指數，內臟指數=內臟質量（mg）/小鼠質量（g）[14]。

1.3.5 數據分析

應用SPSS19.0軟件，對數據進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠飲水量、進食量及體重的影響

高血糖的小鼠，體態改變明顯，毛發稀疏，體重與正常組比較增長緩慢或下降，出現多飲、多食、多尿的現象，與正常組相比，墊料更換更為頻繁。在給藥后，“三多”癥狀得到緩解，結果如表1、表2、圖1所示。

表1結果表明，在灌胃開始的第1周，糖尿病模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與正常對照組差異極顯著，飲水量與正常組相比較，遠多于正常小鼠，到第2周時，給藥組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組差異極顯著，在第3周到第4周，給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組差異極顯著。

表1 茉莉紫蘇混合濃縮液對小鼠飲水量的影響Table 1 Effect of jasmine perilla mixed concentrate on drinking water in mice

表2表明，在第1周，糖尿病模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的進食量與正常組都存在極顯著性差異，在第3周到第4周，給藥組、低劑量組、中劑量組、高劑量組與糖尿病模型組有極顯著性差異，證明在不斷給藥期間，小鼠的“三多”癥狀有緩解。

表2 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠進食量的影響Table 2 Effect of jasmine perilla concentrate on feed consumption in mice

圖1 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠體重的影響Fig.1 Effect of jasmine perilla concentrate on body weight of mice

模型組、低劑量兩組小鼠體重增長緩慢，與正常組呈現極顯著差異，給藥組、高劑量組在第28天與模型組呈現極顯著差異，證明在灌胃期間小鼠高血糖所引起的消瘦減輕。

2.2 濃縮液對小鼠血糖值及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C的影響

茉莉紫蘇濃縮液對小鼠血糖的影響見表3。

通過對比在建模前及灌胃第0天、第14天、第28天的血糖的變化值（如表3所示），正常組血糖水平保持穩定，建模后測量血糖，血糖值顯示：模型組、給藥組、茉莉紫蘇復合液的低劑量組、中劑量組、高劑量組與正常組小鼠血糖有極顯著差異，而與模型組無差異；實驗末期測得血糖值，模型組血糖持續保持在較高水平，而低劑量組、中劑量組、高劑量組雖與正常組存在極顯著差異，但與模型組相比較，血糖值均降低，中劑量組、高劑量組降低明顯，證明茉莉紫蘇復合濃縮液具有一定降低血糖的功效。

表3 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠血糖的影響Table 3 Effect of jasmine perilla concentrate on blood glucose in mice

茉莉紫蘇濃縮液對小鼠血清指標的影響見表4。

表4 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠血清指標的影響Table 4 Effect of jasmine perilla concentrate on serum index in mice

實驗結果顯示，模型組的甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均與正常組有顯著性差異，低劑量組的TG、LDL-C雖與正常組有顯著性差異，但明顯小于模型組，并與模型組存在顯著性差異，高劑量組的TG、TC、HDL-C、LDL-C均與模型組有顯著性差異，證明茉莉紫蘇復合濃縮液能夠改善高血糖對小鼠造成的血脂紊亂。

茉莉紫蘇濃縮液對小鼠臟器指數的影響見表5。

經研究發現，動物的臟器指數能夠反映動物內臟病變情況和營養狀態，長期高血糖則會造成肝臟受損，并影響機體的免疫功能[15]。如表5結果所示，模型組小鼠和低劑量小鼠肝臟指數與正常組呈極顯著差異，明顯要高于其他組別，并于解剖時觀察到模型組小鼠的肝臟呈現腫脹狀態。給藥組、茉莉紫蘇濃縮液的中劑量組、高劑量組的肝臟指數均下降，證明茉莉紫蘇復合濃縮液對高血糖小鼠的肝臟具有保護作用。模型組的脾臟指數，由于高血糖的影響遠小于正常組，給藥組、茉莉紫蘇濃縮液的低劑量組、中劑量組、高劑量組的脾臟指數均高于模型組，證明茉莉紫蘇濃縮液對小鼠的免疫器官具有保護作用。模型組、給藥組、低劑量組、中劑量組的胸腺指數雖與正常值有顯著差異，但通過數據對比，低劑量組、中劑量組、高劑量組的胸腺指數均高于模型組，證明茉莉紫蘇液對高血糖小鼠的胸腺器官有保護作用。

表5 茉莉紫蘇濃縮液對小鼠臟器指數的影響Table 5 Effect of jasmine perilla concentrate on organ index of mice

3 結論

由于現代生活水平提高，生活方式的改變，高糖高脂食物的攝入逐漸增加，再加之久坐不動的工作和學習方式，導致糖尿病出現年齡下降，人口增多的趨勢。糖尿病是由于胰島素分泌紊亂或作用發生障礙引起的以高血糖為主要癥狀的疾病[16]。糖尿病及糖尿病帶來的并發癥，所造成的器官損害、功能減退、衰竭[17]，是現代醫學亟待解決的問題，但目前臨床藥物的長期攝入，雖會起到降血糖的作用，同時會產生較多不良影響，基于此，從植物中提取有效物質開發成藥物或功能食品，用于治療或緩解高血糖癥狀具有極其重要的意義。

鄒瑤等[18]基于從茉莉花渣中分離出茉莉多糖、多種二萜、三萜類物質，探討茉莉花渣對四氧嘧啶建立的高血糖小鼠的降血糖作用，并得出有效結論，證明茉莉花渣多糖具有一定降血糖作用，并對高血糖造成的臟器損傷具有一定的保護作用。李項輝[19]通過試驗證明紫蘇葉提取物對來源于豬胰腸、大米酵母的α-葡萄糖苷酶有較好的抑制作用，并通過細胞試驗，進一步得出紫蘇降血糖的主要機理。

STZ是通過自由基損傷胰島β細胞，胰島素合成減少，誘發糖尿病，引起高血糖[20]。本試驗基于對茉莉花、紫蘇葉的研究現狀，通過對鏈脲佐菌素造成的高血糖小鼠進行灌胃不同劑量的茉莉紫蘇復合濃縮液，結果證明茉莉紫蘇復合濃縮液能夠有效降低小鼠血糖，高劑量能夠顯著降低小鼠 TG、TC、LDL-C，對HDL-C有升高效果，低、中高劑量組雖然與模型組沒有顯著差異，但數據對比顯示，也同樣可以降低高血糖小鼠的TG、TC、LDL-C，提高HDL-C，并且復合濃縮液可對小鼠內臟器官起到一定保護作用。試驗證明茉莉紫蘇復合濃縮液可以作為降血糖的保健食品來開發，但具體的作用機制還需要進一步研究。