無償獻血者血液病原體ELISA與核酸檢測結(jié)果分析

河南省駐馬店市中心血站（463000）孫四力

臨床中救治患者的一種重要手段即為輸血，無償獻血為救死扶傷和無私奉獻的崇高行為，其不僅可以將患者的病痛有效解決，而且可發(fā)揮挽救患者生命安全的作用[1]。為此針對無償獻血的血液樣本開展積極有效的檢測措施，提升血液合格率具有重要意義。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）為臨床中無償獻血者血液病原體檢測中較為常用的方式之一，且臨床常將該項檢驗措施應(yīng)用于病毒抗體檢測或者病毒抗原檢測當中，但是該項檢測在處于感染窗口期患者中存在較高的漏診率[2]。核酸檢測可以將ELISA檢測當中的漏檢情況避免，但是該項檢測措施的操作方法較為繁瑣，且需要較高的檢測成本[3]。本次研究為明確ELISA與核酸檢測在無償獻血者血液病原體檢測中的應(yīng)用價值，特抽選部分無償獻血者血液樣本進行分析，其詳細研究內(nèi)容整理如下。

1 資料、方法

1.1 資料 本次研究特抽選14752例無償獻血者血液樣本作為觀察對象，樣本接收時間均在2017年1月～2018年12月期間。依據(jù)性別，男性例數(shù)占8662例，女性例數(shù)占6090例；年齡范圍：19～50歲，年齡平均值為（35.49±2.08）歲；上述獻血者均為自愿獻血，經(jīng)過干式生化分析篩查和乙肝金標試紙篩查合格；本次研究排除對ELISA檢測存在反應(yīng)性的標本以及經(jīng)檢驗明確有丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT不合格情況存在的標本。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理方法 在無償獻血的過程當中，留取兩支血液標本，每支5毫升，分別使用EDTA-K2抗凝管（開展ELISA檢測）和核酸專用采血管（開展核酸檢測）采集血液，開展核酸檢測的血液樣本于采集血液以后4小時之內(nèi)完成離心操作，隨后保存于冰箱當中，并且在72小時之內(nèi)將相關(guān)檢測工作完成。

1.2.2 ELISA檢測方法 以雙試劑檢測，分別采用法國伯樂和廈門新創(chuàng)公司生產(chǎn)的ELISA試劑開展HBsAg檢測，分別采用北京萬泰和珠海麗珠公司生產(chǎn)的ELISA試劑開展HCV檢測，分別采用法國伯樂和廈門新創(chuàng)公司生產(chǎn)的ELISA試劑開展HIV抗原或抗體檢測，使用HAMILTION STAR加樣儀和全自動酶聯(lián)免疫分析儀開展檢測工作。

1.2.3 核酸檢測方法 使用上海浩源血液核酸檢測系統(tǒng)開展檢測工作，使用PCR方法對HIV-RNA、HCV-RNA以及HBV-DNA等進行檢測。首先對血液樣本開展ELISA檢測，將雙試劑檢測均呈現(xiàn)陽性的血液樣本剔除，隨后對剩余的陰性血液樣本以及單試劑陽性樣本開展核酸檢測工作。

1.3 觀察指標 觀察并統(tǒng)計ELISA檢測的陽性檢出情況，分析ELISA檢測陰性或者單試劑陽性的核酸檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 本次研究中的相關(guān)觀察指標數(shù)據(jù)經(jīng)過分析和匯總以后均使用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理，陽性率數(shù)據(jù)用“%”表示，用卡方檢驗。組間差異明顯且具統(tǒng)計學(xué)意義以P＜0.05表示。

2 實驗結(jié)果

2.1 本次研究中的14752例無償獻血者血液樣本當中，ELISA檢測陽性例數(shù)為207例，其陽性率為1.40%。上述陽性樣本當中，抗TP占比＞HBsAg占比＞抗HCV占比＞抗HIV占比，詳細結(jié)果見附表1。

2.2 ELISA檢測為陰性或者單試劑陽性的14545例血液樣本當中，核酸檢測陽性例數(shù)為15，其陽性率為0.10%，其中HBVDNA陽性占比＞HIV-RNA陽性占比＞HCV-RNA陽性占比，詳細結(jié)果見附表2。

附表1 分析ELISA檢測無償獻血者血液病原體陽性情況（n=14752）

附表2 分析核酸檢測經(jīng)ELISA剔除樣本的陽性檢出情況（n=14545）

3 討論

輸血為目前臨床中搶救和治療患者的重要手段之一，血液質(zhì)量同輸血的安全性之間有密切關(guān)聯(lián)[4]。人體血液具備運輸功能、維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定功能和防御保護功能等，機體當中的各種物質(zhì)均依據(jù)血液運輸，因此血液對于人體健康而言具有重要作用[5]。與此同時，血液亦為傳播疾病較為常見的途徑之一，例如HIV病毒、HCV病毒和HBV病毒均可通過血液途徑傳播。為此將無償獻血者血液當中病原體測定的力度加強，對于預(yù)防感染性疾病以及降低感染性疾病發(fā)生率方面具有重要作用[6]。

ELISA檢測的陽性率為1.40%，其中抗TP陽性占比最高，抗HIV陽性占比最低。由此結(jié)果可發(fā)現(xiàn)，在無償獻血者血液病原體檢測中應(yīng)用ELISA檢測的效果顯著，其可以將陽性標本的檢出率提升。因ELISA檢測可以對可溶性抗體與抗原于聚苯、乙烯相互結(jié)合進行有效的利用，完成相關(guān)檢查步驟以獲得免疫能反應(yīng)，并且結(jié)合顏色開展定量分析和定性分析。該項檢測方法對于生物酶活性的催化作用良好，且具有較高的敏感度，具備操作簡便、價格低廉等優(yōu)勢，為此在臨床中屬于檢測血液病毒抗原的首選措施[7]。但是經(jīng)臨床實踐發(fā)現(xiàn)，ELISA檢測常難以將窗口期和病毒變異時抗原測出，具有較高的漏診情況。

本研究中，經(jīng)過ELISA檢測確定為陰性或者為單試劑陽性的標本實施核酸檢測以后，陽性率為0.10%，其中HBV-DNA陽性占比最高。核酸檢測即為借助擴增血液病原體核酸檢測技術(shù)，對血液病原體當中是否有病毒核酸進行檢測，對其是否有病原體感染情況存在進行判斷，該項檢測措施實施過程中可以明顯縮短病毒的窗口期，例如HBV和HCV的檢測窗口期通常為50天和72天，采用核酸檢測可以將其窗口期縮短為25天和59天，該項檢測措施的實施可以將ELISA檢測當中存在的缺陷有效彌補[8]。為此，針對無償獻血者血液病原體開展測定操作時可首選ELISA檢測，若有難以確診的情況存在，可進一步開展核酸檢驗，以充分發(fā)揮上述兩種檢測措施的各自優(yōu)勢，提升不合格血液標本的檢出率，將醫(yī)源性感染的發(fā)生率降低[9]。

綜上所述，無償獻血者血液病原體ELISA檢測和核酸檢測具有互補作用，合理應(yīng)用可以將輸血相關(guān)風(fēng)險降低。