7種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的室內(nèi)毒力及田間防效比較

谷春艷 ，潘 銳 ，白 楊 ，2，楊 雪 ，王學(xué)峰 ，臧昊昱 ，陳 雨 ，高同春 *

（1.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所，合肥 230031；2.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，合肥230036）

小麥赤霉病（Fusariumhead blight）主要是由禾谷鐮孢菌（Fusarium graminearum）引起的一種危害性很強(qiáng)的真菌病害，也是我國(guó)乃至世界小麥產(chǎn)區(qū)的重要病害。這已成為小麥生產(chǎn)中最具威脅的病害之一[1-4]。小麥赤霉病不僅對(duì)小麥產(chǎn)量造成嚴(yán)重影響，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，且感病籽粒中含多種真菌毒素，嚴(yán)重影響小麥品質(zhì)和食品安全，危害人畜健康[5-7]。

由于小麥赤霉病抗性種質(zhì)資源有限，抗性機(jī)制較為復(fù)雜，小麥赤霉病抗性改良進(jìn)程較慢，難以將農(nóng)藝與抗病性相結(jié)合，生產(chǎn)中尚未獲得高抗赤霉病的品種，無(wú)法滿足生產(chǎn)中對(duì)抗性品種的需求[8-9]，因此，化學(xué)防治一直是控制小麥赤霉病流行的主要手段[10]。過(guò)去，小麥生產(chǎn)中主要依賴化學(xué)藥劑，如苯并咪唑類(lèi)殺菌劑，尤其是多菌靈及其復(fù)配制劑等進(jìn)行病害防治，但由于常年使用多菌靈，導(dǎo)致抗藥性急速上升，防效下降嚴(yán)重，甚至防治失敗[11-12]。為更有效地防治小麥赤霉病，近年來(lái)市場(chǎng)上涌現(xiàn)出一批新型殺菌劑，如咪鮮胺、戊唑醇、氰烯菌酯、氟唑菌酰羥胺、丙硫菌唑等。為了篩選出防治小麥赤霉病的高效藥劑，延緩赤霉病菌抗藥性，筆者選擇小麥生產(chǎn)中使用的咪鮮胺、戊唑醇、氟環(huán)唑、氰烯菌酯、丙硫菌唑、氟唑菌酰羥胺和多菌靈等7種主要?dú)⒕鷦┳鳛檠芯繉?duì)象，通過(guò)比較這7種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的室內(nèi)毒力及田間防效，篩選出防治小麥赤霉病菌的高效藥劑，同時(shí)為生產(chǎn)中的科學(xué)防控提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試菌種：禾谷鐮孢菌，分離自安徽省小麥田病株樣本，純化鑒定后經(jīng)致病性檢測(cè)為強(qiáng)致病力菌株，保存在安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所農(nóng)藥毒理學(xué)與抗藥性實(shí)驗(yàn)室。用PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯20.0 g、葡萄糖20.0 g、瓊脂20.0 g、蒸餾水1 000 mL），于25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

供試藥劑：97%咪鮮胺TC，安徽廣信農(nóng)化股份有限公司；450 g/L咪鮮胺EW，河北省農(nóng)藥化工有限公司；95%戊唑醇TC，拜耳股份公司；430 g/L戊唑醇SC，拜耳作物科學(xué)（中國(guó)）有限公司；97%氟環(huán)唑TC，江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司；25%氟環(huán)唑SC，青島中達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司；95%氰烯菌酯TC、25%氰烯菌酯SC，江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司；97%丙硫菌唑TC、30%丙硫菌唑OD，安徽久易農(nóng)業(yè)股份有限公司；98%氟唑菌酰羥胺TC、200 g/L氟唑菌酰羥胺SC，瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司；98%多菌靈TC、50%多菌靈WP，江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司。

供試小麥品種：漯麥9號(hào)（國(guó)審麥2008007），河南省漯河市農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

1.2 試驗(yàn)田基本情況

小區(qū)試驗(yàn)于2020年在安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所試驗(yàn)地進(jìn)行。試驗(yàn)田土壤為黃棕壤，肥力中等，均勻一致，排灌條件良好，前茬作物為大豆。小麥于2019年11月10日機(jī)械播種，播種量為450 kg/hm2，管理?xiàng)l件均勻一致。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[13]，分別將7種供試原藥用適宜的溶劑溶解并配置成5 000 mg/L的母液，然后按照預(yù)備實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分別按梯度制備成含梯度質(zhì)量濃度藥劑的PDA平板（表1）。將制備好的小麥赤霉病菌菌塊（直徑5.0 mm）接種在含藥平板中央，放置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)。每處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，以無(wú)菌水作為空白對(duì)照。待對(duì)照菌落直徑長(zhǎng)至培養(yǎng)皿2/3時(shí)，采用十字交叉法測(cè)量各處理平板的菌落直徑，按式（1）計(jì)算不同藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率，根據(jù)抑制率建立毒力回歸方程，計(jì)算抑制中濃度EC50[14]。

表1 7種供試藥劑質(zhì)量濃度梯度設(shè)置

1.4 田間防效試驗(yàn)

1.4.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

為了保證發(fā)病充分均一，7種供試藥劑的田間防效試驗(yàn)采用人工接種的方法進(jìn)行[15]。于小麥揚(yáng)花初期（4月15日）人工接種，24 h后噴藥，每個(gè)處理2 m2，每個(gè)處理3次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。試驗(yàn)共設(shè)8個(gè)處理（含空白對(duì)照），供試藥劑施用劑量見(jiàn)表2。

表2 供試藥劑施用劑量

1.4.2 調(diào)查方法

藥后20 d左右，待空白對(duì)照充分發(fā)病且發(fā)病程度不再明顯增加時(shí)調(diào)查病穗數(shù)和嚴(yán)重度。每個(gè)小區(qū)連續(xù)調(diào)查100個(gè)麥穗，根據(jù)病穗率與發(fā)病嚴(yán)重度計(jì)算病情指數(shù)，根據(jù)病情指數(shù)計(jì)算防效。小麥赤霉病嚴(yán)重度按照0～7級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為0級(jí)：無(wú)病；1級(jí)：病穗面積占穗總面積的1/4以下；3級(jí)：病穗面積占穗總面積的1/4～1/2；5級(jí)：病穗面積占穗總面積的1/2～3/4；7級(jí)：病穗面積占穗總面積的3/4以上。

1.4.3 計(jì)算方法

病情指數(shù)、防治效果按式（2）、（3）計(jì)算。

1.5 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 24.0軟件，采用LSD法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的毒力測(cè)定

7種供試藥劑對(duì)小麥赤霉病菌室內(nèi)的毒力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可見(jiàn)，這7種藥劑對(duì)小麥赤霉病菌的毒力均較強(qiáng)，EC50值為0.101 0～1.105 9 mg/L，其中氟唑菌酰羥胺對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，其EC50值僅為0.101 0 mg/L；其次是氰烯菌酯、咪鮮胺和多菌靈，對(duì)小麥赤霉病菌的EC50值分別為0.3713、0.586 3和0.627 7 mg/L；丙硫菌唑、戊唑醇和氟環(huán)唑?qū)π←湷嗝共【腅C50值為1.101 6～1.105 9 mg/L。

表3 7種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的毒力測(cè)定結(jié)果

2.2 不同殺菌劑對(duì)小麥赤霉病的田間防效

不同殺菌劑處理對(duì)小麥赤霉病的田間防效見(jiàn)表4。由表4可見(jiàn)，通過(guò)人工接種，試驗(yàn)田小麥赤霉病發(fā)病嚴(yán)重，空白對(duì)照區(qū)平均病情指數(shù)達(dá)到53.83。于接種后24 h施藥1次，20 d后調(diào)查，結(jié)果表明，7種藥劑對(duì)小麥赤霉病的防效為33.59%～79.31%，其中200 g/L氟唑菌酰羥胺SC和25%氰烯菌酯SC的防治效果最好，顯著高于其他藥劑，分別為79.31%和77.74%；其次為30%丙硫菌唑OD，防效為72.28%；25%氟環(huán)唑SC防效略好于430 g/L戊唑醇SC，而450 g/L咪鮮胺EW和50%多菌靈WP防效較差。

表4 不同殺菌劑處理對(duì)小麥赤霉病的田間防效

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果顯示，在離體測(cè)定條件下，用于防治小麥赤霉病的7種供試藥劑對(duì)小麥赤霉病菌的抑制能力均較強(qiáng)，EC50值為0.101 0～1.1059 mg/L。其中以氟唑菌酰羥胺對(duì)小麥赤霉病菌的毒力最強(qiáng)，其次是氰烯菌酯、咪鮮胺和多菌靈，戊唑醇、丙硫菌唑和氟環(huán)唑?qū)π←湷嗝共【簿哂休^強(qiáng)的抑制作用。由于不同作用方式的殺菌劑在離體和活體條件下的生物活性可能存在較大差異[16]，因此，對(duì)7種殺菌劑的常用制劑進(jìn)行了田間防效驗(yàn)證，在人工接種24 h后噴施藥劑，比較不同殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的田間防效。

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，在離體條件下，咪鮮胺和多菌靈對(duì)小麥赤霉病菌的毒力很強(qiáng)，EC50值明顯低于丙硫菌唑、戊唑醇和氟環(huán)唑，說(shuō)明安徽省的小麥赤霉病菌已經(jīng)對(duì)多菌靈和咪鮮胺產(chǎn)生了較為嚴(yán)重的抗性。Chen等[17]于2015年已經(jīng)在安徽省監(jiān)測(cè)到多菌靈抗性菌株，戊唑醇、氟環(huán)唑的田間防效降低，可能是由于長(zhǎng)時(shí)間大量使用苯并咪唑類(lèi)殺菌劑和甾醇脫甲基抑制劑及復(fù)配制劑，導(dǎo)致小麥赤霉病菌產(chǎn)生抗藥性，致使防效降低甚至失效。田間試驗(yàn)表明，7種藥劑在常規(guī)使用劑量下，氟唑菌酰羥胺和氰烯菌酯對(duì)小麥赤霉病的防效最好，分別為79.31%和77.74%，顯著高于其他藥劑；其次為丙硫菌唑，防效為72.28%。在空白對(duì)照病指高達(dá)53.83時(shí)，僅施一次藥，三者防效均能達(dá)到70%以上，特別是氟唑菌酰羥胺和氰烯菌酯防效均在75%以上。氟環(huán)唑、戊唑醇防效明顯降低，而咪鮮胺和多菌靈的防效僅為43.8%和33.59%，已經(jīng)不能有效控制小麥赤霉病菌的危害。

目前，氰烯菌酯已經(jīng)成為防治小麥赤霉病的主要藥劑，不僅防效好而且穩(wěn)定性好。然而，氰烯菌酯作用單一，盡管目前在田間還沒(méi)有分離到抗性菌株，但存在一定的抗性風(fēng)險(xiǎn)。隨著該藥劑在田間大規(guī)模使用，禾谷鐮孢菌對(duì)該藥劑的抗性風(fēng)險(xiǎn)也在提高。已有研究表明禾谷鐮孢菌對(duì)氰烯菌酯的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)為中至高等水平[18-20]，建議不要單獨(dú)使用。氟唑菌酰羥胺是先正達(dá)（中國(guó)）有限公司研發(fā)的一種新型殺菌劑，屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類(lèi)，對(duì)小麥赤霉病具有很好的防治效果[11-12]，目前該藥劑已經(jīng)登記用于防治小麥赤霉病。SDHI類(lèi)殺菌劑被國(guó)際殺菌劑抗性委員會(huì)（FRAC）鑒定抗藥性風(fēng)險(xiǎn)為中至高等水平[21]，因此也不建議單獨(dú)使用。綜上所述，為了避免小麥赤霉病菌抗藥性群體的形成，延緩抗藥性的產(chǎn)生，延長(zhǎng)藥劑的使用年限，高效防治赤霉病的危害，建議小麥生產(chǎn)中選擇不同作用機(jī)理的藥劑輪換使用，或者使用不同作用靶標(biāo)的藥劑混配形成復(fù)配劑，用于防治小麥赤霉病。