不同運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清生理生化指標的影響

范 雯，劉 永，魏小嵐，肖雅元，韋芳三，周德新，唐文喬，李純厚，3

（1.上海海洋大學水產與生命學院，上海 201306；2.中國水產科學研究院南海水產研究所，農業農村部南海漁業資源開發利用重點實驗室，廣東省漁業生態環境重點實驗室，廣州 510300；3.南方海洋科學與工程廣東省實驗室，廣州 511458；4.廣州大學生命科學學院，廣州 510006）

紫紅笛鯛（Lutjanus argentimaculatus）屬于鱸形目（Perciformes），笛鯛科（Lutjanidae），笛鯛屬，是一種暖水性淺海中下層大型魚類，分布于東南亞和中東海域印度洋、太平洋中部和西部［1］。在我國主要分布在南海諸島及海南、廣東和臺灣等省的近岸珊瑚礁、巖礁及沙泥底質淺海水域。紫紅笛鯛作為我國最有經濟價值和發展前景的物種之一，由于漁業環境遭受破壞和過度捕撈導致其資源量驟減，目前南方近海已難捕到其野生親魚［2］。要從根本上恢復紫紅笛鯛資源，除了改善海洋生態環境和降低捕撈強度之外，人工增殖放流是一種有效、快捷的方式。然而增殖放流多使用人工繁育的魚苗，人工孵育魚苗在自然海域的成活能力較野生種群低，因此，如何提高放流物種的存活率和野外適應性，是目前研究的重點和難點問題。

魚類具有逆流游泳的運動習性，研究顯示運動能夠通過促進動物的心肺功能提高機體代謝水平進而提高魚體的抵抗力［3］，通過游泳運動訓練可以提高魚類釋放到野外環境中的成活率并促進魚類生長［4］。虞順年等［5］對黑棘鯛（Sparus macrocephalus）進行2周的運動訓練發現，適當強度（2.0體長·s-1）的運動訓練，有利于增強魚的免疫力和抗氧化能力，提高抵抗力。魏小嵐等［6］將斜帶石斑魚（Epinephelus coioides）在不同的水流下進行8周的訓練實驗，結果發現適當的水流速度（1.0體長·s-1）刺激不僅能夠使魚體生長地更快，而且能夠提高魚體免疫和抗氧化能力。魚類運動訓練展開于20世紀60年代，關于魚類的運動訓練研究在國外多集中于鮭鱒魚類［4，7］，尤 以 大 西 洋 鮭（Salmo salar）［8-9］和 虹 鱒（Oncorhynchusmykiss）［10-12］為主，在國內魚類運動訓練研究以中華倒刺鲃（Spinibarbus sinensis）等鯉科 魚 類［13-15］和 尼 羅 羅 非 魚（Oreochromis niloticus）［16］為主，關于笛鯛科魚類報道較少。因此，本研究以笛鯛科紫紅笛鯛幼魚作為研究對象，通過不同運動強度和運動時間的訓練交互作用，研究魚體的生長率、存活率、生理生化等與野外存活相關的指標，以期為提高增殖放流物種的存活率和優化漁業資源增殖放流效果提供可靠的科學依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

紫紅笛鯛魚苗購自深圳市龍岐莊實業發展有限公司，挑選同一批培育出的規格均勻的魚苗，實驗開始前于戶外魚塘暫養一周以排除應激死亡。養殖水溫為（26.0±0.5）℃，pH 8.3±0.1，溶解氧量（8.0±0.2）mg·L-1，光照周期為12L∶12D。每天投喂人工飼料2次（海水魚配合飼料，廣東越群海洋生物研究開發有限公司），每次投喂量為魚體鮮重的3%，投喂時間是9∶00和17∶00，飼料營養成分：粗蛋白≥45%、粗脂肪≥6%、粗纖維≤5%、粗灰分≤18%、鈣≥2.5%、總磷≥1.2%、水分≤12%、賴氨酸≥2.2%，投喂1 h（可以完全吃完餌料）。

1.2 實驗裝置

本實驗采用的魚類循環水運動訓練裝置，為本課題組自行設計（專利公開號：CN107593525A）［5］。裝置分為上下兩部分區域。水流經下部潛水泵抽吸，沿兩條管道升至上部訓練區域，成180°水平分布，使管上出水口位于上部區域底部，可沿壁形成渦形水流，水流經中部管道排入下部凈化區域，給水中魚類造成環形泳道，以便其進行逆流游泳行為。水流在裝置內形成閉路循環通路，經凈化后水質安全穩定，且可通過與水泵相連管道的開關閥門調節流速以控制魚類游泳訓練的強度。

1.3 實驗方法

選健康的紫紅笛鯛幼魚［體長（7.57±0.33）cm，體質量（13.36±0.13）g］，通過預實驗確認在該環形泳道中，本規格紫紅笛鯛的臨界游泳速度，及其1/2和1/4/速度，設置0（對照組）、1.43、2.87、5.74體長·s-14個訓練強度組，每組3個平行，每個平行20尾魚（減少因空間和食物爭奪致使魚體受傷害）。分別于第7、14、28天進行3次取樣。為減小應激傷害，實驗正式開始前，進行24 h觀察并緩慢提高水流速度，作為紫紅笛鯛適應刺激的緩沖期。實驗開始后，每日訓練時間從8∶00到20∶00，投料時間為9∶00和17∶00，投喂時停止訓練，飽食投喂后1 h清理殘餌及糞便，并恢復訓練。日換水量約為15%，實驗水環境條件如前。

取樣前禁食24 h，取樣時用潔凈撈網在每個平行樣本中輕輕撈取3尾紫紅笛鯛，移至加有少量丁香酚麻醉劑的水中，以降低后續采樣對魚的刺激。麻醉后尾靜脈取血。全血室溫靜置2 h后3 000 r·min-1離心10 min，吸取上層血清，保存于-80℃。

1.4 血液生化指標測定

取凍存的血清樣品，4℃融化，使用全自動生化分析儀（7600型號，日本日立公司）檢測其基礎血清學指標：血糖（glucose，GLU）；總膽固醇（total cholesterol，TCHOL）；甘 油 三 酯（triglyceride，TG）；高密度脂蛋白（high density lupoprotein，HDL）；低密度脂蛋白（low density lupoprotein，LDL）；總蛋白（total protein，TP）；白蛋白（albumin，ALB）；球蛋白（globulin，GLB）；谷丙轉氨酶（glutamic pyruvic transaminase，GPT）；谷草轉氨酶（glutamic oxalacetic transaminase，GOT）。

1.5 免疫相關指標測定

使用試劑盒進行檢測，試劑盒信息如下：

酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）采用分光光度法檢測；堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）采用可見光比色法檢測；補體3（complement3）和補體4（complement 4）采用免疫比濁法檢測；溶菌酶（lysozyme，LYZ）采用比濁法檢測。皮質醇（cortisol，COR）采用酶聯免疫試劑盒檢測，用酶聯免疫分析法中的雙抗體夾心法測定血清中COR水平。免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）采用酶聯免疫試劑盒檢測，用酶聯免疫分析法中的雙抗體夾心法測定血清中IgM水平。上述指標所有試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。抗菌活性（antimicrobial，ANT）參考MACKINTOSH等方法［17］進行血清抗菌活性檢測。根據以下公式計算：Ua=（空白組菌落數-血清組菌落）/空白組菌落數。

1.6 抗氧化相關指標測定

抗氧化力指標采用試劑盒測定。丙二醛（malondialdehyde，MDA）測定試劑盒（TBA法），超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）分型測試盒（羥胺法），過氧化氫酶（catalase，CAT）測定試劑盒（可見光法），還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）測定試劑盒（分光光度法），谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPX）測定試劑盒（比色法），總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）檢測試劑盒（比色法），蛋白質羰基（protein carbonyl）含量測定試劑盒（紫外比色法），過氧化氫（hydrogen peroxide，H2O2）測定試劑盒（比色法），抑制羥自由基能力（inhibition of hydroxyl radicals，IHFRC）試劑盒（比色法），谷胱甘肽S轉移酶（glutathione S transferase，GSH-ST）試劑盒（比色法）。

1.7 統計分析

實驗數據用SPSS 17.0軟件進行雙因素方差分析（two-way ANOVA），統計值用平均值±標準誤差（Mean±SD）表示，顯著水平定為P＜0.05。

2 結果與分析

2.1 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚生長及存活率的影響

在訓練期間，紫紅笛鯛幼魚體質量均有增加（附表1）。成活率方面，在7 d內僅1.43體長·s-1組死亡1尾，經分析為意外死亡，其他組均達到100%成活率，因此成活率不具有統計學意義。特定生長率、增重率、肝體比、肥滿度在運動組與對照組之間差異不顯著，且各訓練組之間差異也不顯著；從訓練時間對上述指標的影響上看，對照組與訓練各組都有顯著變化（P＜0.05），即這些生長指標主要受時間影響。訓練與否，對紫紅笛鯛幼魚的以上生長指標影響甚微。

臟體比在訓練組與對照組之間有顯著差異（P＜0.05），且低強度1.43體長·s-1組的臟體比較高，而訓練時長對臟體比的影響不顯著。總體上，運動訓練對紫紅笛鯛幼魚的生長無顯著影響。

2.2 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚基礎血清生化指標的影響

如附表2所示，紫紅笛鯛幼魚的基礎血清生化水平在訓練組和對照組之間及不同強度的訓練組之間均差異顯著（P＜0.05）。血糖、總膽固醇、血脂、脂蛋白、轉氨酶（圖1-A，B，C，D，E，I，J）在訓練水平為1.43體長·s-1和2.87體長·s-1時顯著低于對照組，在訓練水平為5.74體長·s-1時則顯著高于對照組。總蛋白、白蛋白及球蛋白在訓練組1.43體長·s-1和2.87體長·s-1中顯著高于對照組，在訓練組5.74體長·s-1則顯著低于對照組（圖1）。

時間對紫紅笛鯛幼魚的各項基礎血清生化指標總體上也有顯著影響（P＜0.05），訓練7、14、28 d后的基礎血清生化水平總體上有顯著差異（P＜0.05）。總蛋白（圖1-F）隨訓練時間延長而升高，血糖、總膽固醇、血脂、脂蛋白、轉氨酶隨訓練時間延長而降低，但血糖、總膽固醇、總蛋白在14 d與28 d時差異不顯著（P＞0.05）。訓練強度和訓練時長兩個因素在對基礎血清生化指標的影響上具有顯著的交互作用（P＜0.05），隨著訓練時間的延長，訓練組與對照組的差距及各強度訓練組間差距增大。

圖1 紫紅笛鯛幼魚的基礎血清生化指標隨運動強度與時間變化趨勢Fig 1 Change of basic serological indicators along w ith exercise intensity and time

2.3 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清免疫力水平的影響

紫紅笛鯛幼魚的酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、補體C3＼補體C4、溶菌酶、抗菌活性、皮質醇、免疫球蛋白（圖2-A～H）在訓練后與對照組間均呈現出顯著差異（P＜0.05）（附表2），在1.43體長·s-1和2.87體長·s-1訓練后上述指標顯著高于對照組；在5.74體長·s-1訓練組，以上各項指標則顯著低于對照組。免疫指標各訓練組之間也有顯著差異（P＜0.05），在2.87體長·s-1訓練組達到相對較高水平。

訓練時間對紫紅笛鯛幼魚的免疫力總體上也有顯著影響（P＜0.05）。免疫球蛋白、磷酸酶、補體C3、溶菌酶、抗菌活性、皮質醇均隨訓練時間延長而升高，在訓練7、14、28 d后有顯著差異（P＜0.05）。補體C4則在訓練14 d中保持升高趨勢，然而在訓練28 d后回落至與訓練7 d時的相似水平。酸性磷酸酶和抗菌活性在訓練14 d與28 d差異不顯著（P＞0.05）。訓練強度和訓練時長兩個因素在對紫紅笛鯛免疫力的影響上具有顯著的交互作用（P＜0.05），隨訓練時間增長，訓練組與對照組的差距及各強度訓練組間差距增大。

2.4 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清抗氧化水平的影響

紫紅笛鯛幼魚的各項血清抗氧化指標在訓練組與對照組間均有顯著差異（P＜0.05）（圖3）。在不同訓練強度下，紫紅笛鯛幼魚的血清抗氧化水平在訓練組和對照組之間差異顯著（P＜0.05），在各強度組之間也具有顯著差異（P＜0.05）（附表2）；超氧化物酶、谷胱甘肽相關酶類、總抗氧化能力、過氧化氫、抑制羥自由基能力（圖3-C，D，E，F，H，I，J）在訓練強度為1.43體長·s-1和2.87體長·s-1時顯著高于對照組，其中在2.87體長·s-1訓練組達到相對較高水平，在強度為5.74體長·s-1時其水平則顯著低于對照組。丙二醛、超氧化物歧化酶（圖3-A，B）在1.43體長·s-1和2.87體長·s-1訓練組中的水平顯著低于對照組，在訓練強度為2.87體長·s-1達到相對較低水平，在5.74體長·s-1訓練組中的水平則顯著高于對照組。

訓練時長對血清抗氧化水平總體上也有顯著影響（P＜0.05）。訓練時間為7、14、28 d時，抗氧化水平總體上具有顯著差異（P＜0.05）。丙二醛與超氧化物酶在訓練14 d與28 d后差異不顯著（P＞0.05）。訓練強度和訓練時長兩個因素在對魚體抗氧化水平的影響上具有顯著的交互作用（P＜0.05），隨訓練時間延長，訓練組與對照組的差距及各強度訓練組間差距增大。

訓練時長對蛋白質羰基水平的影響不顯著（P＞0.05），訓練強度對于蛋白質羰基的影響也僅在對照組與低流速組之間具有顯著性差異（P＜0.05）。

3 討論

3.1 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清生化指標的影響

魚類應激的短期生理反應包括接受應激信號分泌腎上腺素、刺激頭腎組織釋放皮質醇、提供能量和涉及生理生化的代謝反應［33］。血漿皮質醇、血糖等指標被廣泛地用于評估魚類所受到的刺激［33］，如本研究中迫使其做逆流游泳運動的水流刺激。通過對紫紅笛鯛幼魚28 d的訓練研究發現，在水流速為1.43體長·s-1和2.87體長·s-1時魚體血清中血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、谷丙轉氨酶以及谷草轉氨酶均顯著低于對照組，總蛋白和白蛋白顯著高于對照組，表明適度的訓練有助于紫紅笛鯛幼魚降低體內血糖血脂和膽固醇，促進蛋白吸收，進而提高魚體的健康水平。對黑鯛（S.acrocephalus）［5］的研究發現適度的運動訓練（2.0體長·s-1）同樣具有調節血糖水平、降低血脂、提高免疫力、降低肝損傷的作用。其原因可能是長期或短期適宜的運動加強了魚體代謝能力，促進機體對糖和膽固醇的代謝和轉化以及蛋白質的合成［13］。另外，本研究發現5.74體長·s-1訓練組魚體在28 d訓練過程中，血液指標的變化與1.43體長·s-1和2.87體長·s-1訓練組的變化相反，表明過高的訓練強度和過長的訓練時間可能會降低紫紅笛鯛幼魚血清生化指標，進而損害了魚的健康。研究顯示，當魚體長期處在高強度的游泳運動時，不僅會過量消耗體內的能量儲備，增加運動性疲勞，還可造成轉氨酶的含量升高。轉氨酶主要存在于肝臟中，只有當肝臟受到損傷才會大量釋放到血液中，作用于糖類、脂肪和蛋白質的代謝和轉運［19］。當魚體長期處在高強度運動狀態，魚體中轉氨酶含量高于正常值，導致血糖和脂質代謝功能紊亂，血糖和血脂上升，機體免疫力下降［20-22］。另外，有研究認為水流在過低或過高時都有負面影響，僅適中的強度能帶來正面效果［26-27］，本研究結果呈現的趨勢與其一致。紫紅笛鯛幼魚在訓練28 d后的水平與訓練14 d水平相近，顯著優于訓練7 d的效果，即說明訓練效果隨時長增加而趨于穩定，選擇適當的訓練時長能在保持訓練效果達到相對較好水平的前提下，節約時間和訓練設施等成本。

圖2 紫紅笛鯛幼魚的免疫學血清生化指標隨運動強度與時間變化趨勢Fig 2 Changes of immunological serum indicators along w ith exercise intensity and time

圖3 抗氧化力血清生化指標隨運動強度與時間變化趨勢Fig 3 Change of serum indicators of antioxidation along w ith exercise intensity and time

3.2 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清免疫力水平的影響

魚體的生存環境決定了魚類的免疫功能受多方面因素的影響，如溫度、食物以及游泳運動［27］。硬骨魚的免疫功能由先天性免疫起主要作用。在抵御病原生物侵襲過程中，魚類的先天性免疫發揮著重要作用［25-26］。紫紅笛鯛幼魚經過28 d的訓練實驗，魚體血清中酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、補體C3、溶菌酶、抗菌活性、皮質醇以及免疫球蛋白含量在水流速為1.43體長·s-1和2.87體長·s-1時均顯著高于其在對照組的含量，其在流速為5.74體長·s-1時的含量則低于其在對照組的含量。補體C3含量及溶菌酶活性升高時，表明機體免疫機能增強［11，28］。血漿皮質醇含量升高常被用來衡量魚體承受的壓力水平適應情況［29-30］。堿性磷酸酶作為巨噬細胞溶酶體的標志性酶，具有殺死外來侵入病原微生物的能力，其濃度升高反映了魚類機體免疫應答增強［22］。因此，適當的水流刺激（1.43體長·s-1和2.87體長·s-1）訓練可以增強紫紅笛鯛幼魚免疫力，而當水流速較高（不低于5.74體長·s-1）時免疫能力下降。同樣，對紅鰭銀鯽（Barbodes schuanenfeldi）、斜帶石斑魚和黑鯛的研究發現，在水流速低于2體長·s-1時，魚體的免疫水平隨著流速的增加而增強，當流速高于2體長·s-1時，魚體的免疫水平隨著流速增加而降低，最終低于對照組［5-6，31］。這可能是過高的運動強度使機體產生了大量自由基，造成細胞損傷，從而使免疫機能下降，增加機體被病原菌感染的風險。另外，本研究顯示，魚類的免疫能力維持可能與持續時間有關［11，32］，呈現飽和曲線特征，即在1.43體長·s-1和2.87體長·s-1時魚體血清中酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、補體C3、溶菌酶、抗菌活性、皮質醇以及免疫球蛋白含量隨著訓練時間的增加趨于穩定，訓練組5.74體長·s-1的免疫力隨著時間的延長無顯著變化。王曉杰等［32］也證實了通過鹽度脅迫提升魚體的免疫能力時，其呈現先增加后穩定的變化趨勢。

3.3 運動強度和訓練時間對紫紅笛鯛幼魚血清抗氧化水平的影響

分析不同運動強度和訓練時間紫紅笛鯛幼魚的血清指標，結果顯示魚體還原型谷胱甘肽、谷胱甘肽過氧化物酶、總抗氧化能力、過氧化氫、抑制羥自由基能力、谷胱甘肽S轉移酶濃度或活性先隨著訓練強度的增加而上升，當訓練強度高于2.87體長·s-1時呈現降低的趨勢，而丙二醛和超氧化物歧化酶的變化則相反。谷胱甘肽S轉移酶具有消除生物體內自由基和解毒的雙重功能［37］，在生物體內起到抵抗外源物質入侵和細胞毒性防御的作用［38-41］。谷胱甘肽S轉移酶隨訓練強度上升而升高，表明機體代謝自由基的能力隨訓練強度加大而增強，在訓練強度達到5.74體長·s-1時又回落至低于對照組的魚體水平，說明雖然在一定范圍內的訓練顯著提升了紫紅笛鯛的抗氧化力，但過度訓練則使機體產生過量的自由基相關產物，且自由基清除系統中的相關酶含量降低，可能是訓練對于酶的生成、轉運、分泌過程產生了負面影響［34］。總抗氧化能力表示機體抗氧化酶系統和非酶系統的功能狀態，代表機體對刺激因素的代償能力以及反映自由基代謝的水平，是體內組織抗氧化功能的一個常用指標［34］。機體與抗氧化能力相關的酶包括過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽S轉移酶［35］。過氧化氫酶催化細胞內過氧化氫分解［36］，超氧化物歧化酶是超氧陰離子自由基的清除劑，通過歧化反應保護機體對抗活性氧自由基，超氧化物歧化酶活性的水平間接地反映了魚體活性氧水平高低［22］。當環境條件發生改變時，體內自由基的生成量會發生變化，抗氧化系統也會發生相應的變化來保護機體免受損傷。本研究中超氧化物歧化酶濃度隨運動強度加大而降低，可能是在運動機制中，歧化反應不作為主要的清除自由基途徑［18］。本研究中紫紅笛鯛幼魚的總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、還原型谷胱甘肽、谷胱甘肽過氧化物酶均隨訓練強度加大而升高，但當訓練強度高于5.74體長·s-1時則降低，甚至有低于對照組的情況。而訓練時間的增加對紫紅笛鯛幼魚的抗氧化能力的影響是持續升高的，但在訓練28 d后與訓練14 d后的水平，經統計學分析比較差異不顯著，說明適當強度的運動提高了紫紅笛鯛幼魚的抗氧化能力，而過度運動則反而有損害，且經過一段時間的訓練后，魚體的抗氧化力保持在一定水平，已經達到機體抗氧化系統新的平衡。

丙二醛是細胞脂質過氧化的最終產物，間接反應自由基對機體的損傷程度［39］。在本研究中，隨著運動強度提升，紫紅笛鯛幼魚血清中丙二醛水平顯著下降，證明自由基代謝水平得到明顯促進，而5.74體長·s-1訓練組的血清丙二醛含量高于對照組的現象說明，機體在過度訓練中產生大量自由基無法被及時清除。從時間變化上看，過度訓練使魚體內產生的丙二醛隨時間延長而增多，是機體受自由基損傷持續疊加的顯著證明。而2.87體長·s-1訓練組中，隨時間延長丙二醛逐漸減少，說明適當強度訓練能有效控制自由基對機體的損傷，利于魚體健康。自由基可導致多種生物大分子的損傷，其中包括蛋白質羰基的產生，即不可逆的氧化修飾。通過測定羰基含量可判斷蛋白質是否被氧化損傷。氧化的蛋白質與衰老及許多疾病都有關系，蛋白質羰基是機體氧化應激程度的一個重要指標［42-43］。但在本研究中，蛋白質羰基對訓練強度和時間變化并無明顯響應，可能牽涉更為復雜的機制，不適合作為觀察運動訓練能否提高成活率的指征之一。總之，適宜的運動強度和訓練時間可以增強紫紅笛鯛幼魚血清抗氧化水平，進而增強魚體的免疫能力。

4 小結與展望

通過對紫紅笛鯛幼魚在不同運動強度和訓練時間魚體血清生理生化指標變化特征的研究發現，適宜的運動強度（1.43體長·s-1和2.87體長·s-1）和訓練時間（14～28 d）均可以增加魚體的健康程度。運動提升魚體生長速率、代謝水平以及免疫能力，訓練時間的延長可使魚體保持健康狀態。紫紅笛鯛幼魚的適宜生長最高流速為1.43體長·s-1，而適宜代謝水平以及免疫能力最高的流速為2.87體長·s-1，表明水流速1.43～2.87體長·s-1可能會存在一個閾值既滿足紫紅笛鯛幼魚的快速增長，又能實現免疫能力最大限度的增加。另外，室內馴化水環境和野外的水環境差別很大，主要表現在溫度、鹽度、食物源以及生存空間的競爭，而模擬真實海域環境的中場實驗作為從室內實驗到野外實驗的過渡是一個必要的過程，后續工作應主要針對運動強度閾值的篩選以及增殖放流前的中場實驗展開，以期為紫紅笛鯛的增殖放流提供更精確的指導。

附表2 不同訓練強度及訓練時長下紫紅笛鯛血清生化指標雙因素方差分析結果Appendix 2 Two-way ANOVA analysis of serum indicators of juvenile Lutjanus argentimaculatus w ith different training intensities and time

續附表2