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2019 年全國部分地區飼料及原料霉菌毒素污染狀況調查

2020-11-22 10:17:02作者侯楠楠謝全喜
廣東飼料 2020年10期
關鍵詞:污染檢測

◆作者:侯楠楠 謝全喜 王 梅 王 倩 谷 巍

◆單位:山東寶來利來生物工程股份有限公司,山東省動物微生態制劑省級重點實驗室

霉菌毒素又叫真菌毒素,是由曲霉菌、青霉菌以及鐮刀菌等不同類型真菌產生的一種能夠污染谷物及飼料的有毒次生代謝產物,目前已發現大約有300~400 種霉菌毒素。不同霉菌生長所需的環境不同,北方地區寒冷干燥,適合青霉菌、禾谷鐮刀菌等的生長;南方高溫高濕,通常容易滋生黃曲霉菌、煙曲霉菌等(張治成,2019)。采食霉菌毒素可能導致動物生長受阻、繁殖機能下降、組織壞死、免疫抑制、致癌及基因突變等。其中黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)被歸為國際一級致癌物;玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是一種類雌激素,主要損害畜禽生殖系統;嘔吐毒素(vomitoxin,DON)主要引起嘔吐綜合癥(黃鑫,2018)。Danicke 等研究發現,玉米赤霉烯酮及代謝產物的攝入會造成奶牛瘤胃發酵性能的改變并影響膽汁的形成;張立泰研究發現,日糧中黃曲霉毒素B1含量達到100 μg/kg 以上時,肥育豬生長性能下降,血液肝臟功能受到損害(張立泰,2018;DANICKE S,2014)

谷物飼料中霉菌毒素污染是國內外畜牧產業鏈中的重大危害。霉菌毒素超標會造成重大經濟損失,威脅動物及人類健康。國際糧農組織預測,全球25%的糧食作物,包括許多基本食物,會受到霉菌產生的霉菌毒素的影響,每年由此造成的經濟損失高達數千億美元(FINK-GRERNMELS J,1999)。霉菌毒素的污染對畜禽業和飼料工業發展的危害已是不容忽視的問題。本文分析了2019 年從市場上收集的飼料及原料霉菌毒素污染情況及變化趨勢,為同仁提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗樣品

2019 年1-11 月,寶來利來公司收檢的405 份樣品,樣品主要來自山東、河南、江蘇、東北等地區。

1.2 儀器與試劑

FW-100 型高速萬能粉碎機:北京永光明醫療器械有限公司;FA1004 電子分析天平:精密科學儀器有限公司;XK80-A 型漩渦混勻儀:江蘇新康;LD5-2A低速離心機:北京京立離心機有限公司;F50 酶標儀:上海肯帝;甲醇(分析純):北京化工廠;氯化鈉(分析純):天津博迪化工股份有限公司;黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素檢測試劑盒:河北伊萊莎生物技術有限公司。

1.3 試驗方法

結合飼料衛生標準并參照畜禽養殖業實際應用情況,本試驗采用酶聯免疫法。將樣品粉碎后,稱取適量質量樣品,加入提取液(甲醇水或去離子水)提取,震蕩10 min,4000 r/min 離心5 min,過濾,收集濾液備用,具體操作步驟參照霉菌毒素檢測試劑盒說明書進行。

1.4 統計分析

試驗數據用Excel 軟件進行初步處理后。以檢測試劑盒的檢出限為參照,黃曲霉毒素B1檢測限2.0 μg/kg,玉米赤霉烯酮20.0 μg/kg,嘔吐毒素100.0 μg/kg,以樣品毒素濃度超過檢測限判定為陽性;超標限參照GB 13078-2017《飼料衛生標準》要求,黃曲霉毒素B120.0 μg/kg;玉米赤霉烯酮500.0 μg/kg;原料中嘔吐毒素標準為3000.0 μg/kg,配合飼料中嘔吐毒素標準為1000.0 μg/kg。

2 結果與分析

2.1 樣品整體霉菌毒素檢測結果

由表1 可以看出,2019 收檢飼料及原料樣品黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素三種毒素檢出率分別是 89.00% 、90.71%、93.22%,表明飼料及原料受這3 種毒素污染的現象非常普遍,以嘔吐毒素檢出最為突出。被檢樣品毒素超標率是16.20%,其中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素三種毒素超標率分別是9.11%、13.62%、27.42%,同樣嘔吐毒素超標率最高。同時收檢樣品嘔吐毒素的均值為1025.20 μg/kg 高于GB 13078-2017《飼料衛生標準》(豬配合飼料≤1000 μg/kg)。

2.2 玉米霉菌毒素檢測結果

由表2 可以看出,玉米嘔吐毒素的檢出率為94.23%,超標率為23.08%,最高值2066.90 μg/kg。其次是黃曲霉毒素B1檢出率78.79%,超標率10.61%。但收檢玉米黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素三種毒素檢測均值分別為7.91、91.78、551.70 μg/kg,均在GB 13078-2017《飼料衛生標準》范圍內。

表1 2019 年(1-11 月)收檢飼料及原料霉菌毒素檢測結果

表2 2019 年(1-11 月)收檢玉米霉菌毒素檢測結果

2.3 玉米副產物霉菌毒素檢測結果

從表3 的檢測結果可知,玉米副產物中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素三種毒素檢出率均≥95.00%,黃曲霉毒素B1最高。三種毒素超標率分別是33.33%、39.53%、57.14%,嘔吐毒素最高。同時三種毒素的均值22.23、516.63、3203.55 μg/kg 均高于GB 13078-2017《飼料衛生標準》要求,嘔吐毒素最高是限量標準的3.2 倍。

2.4 配合飼料霉菌毒素檢測結果

由表4 可知,配合飼料中嘔吐毒素檢出率是98.62%,超標率23.45%,最高值7993.6 μg/kg。玉米赤霉烯酮檢出率較高96.84%,超 標 率9.49% , 均 值218.18 μg/kg符合GB 13078-2017《飼料衛生標準》要求(配合飼料≤500 μg/kg)。但個別樣品玉米赤霉烯酮超標嚴重,最高檢出結果3340.30 μg/kg,是 GB 13078-2017《飼料衛生標準》(配合飼料≤500 μg/kg)的6.68 倍。

2.5 發酵料霉菌毒素檢測結果

由表5 可知,2019 年收檢發酵飼料霉菌毒素檢出率為91.11%,超標率14.67%。其中嘔吐毒素檢出率86.76%低于平均值,但超標率26.47%遠高于平均值,與配合飼料的檢測結果相類似。玉米赤霉烯酮檢出率91.04%,超標率14.93%,樣品均值255.96 μg/kg,參照GB 13078-2017 《飼料衛生標準》要求作為豬用飼料使用時需謹慎。

表3 2019 年(1-11 月)收檢玉米副產物霉菌毒素檢測結果

表4 2019 年(1-11 月)收檢配合飼料霉菌毒素檢測結果

表5 2019 年(1-11 月)發酵飼料中三種毒素污染情況

3 討論

本研究共收檢了全國部分地區飼料及原料樣品405 份,毒素檢出率在90.85%左右,表明飼料及原料中霉菌毒素污染非常普遍,且存在多種霉菌毒素共存現象。嘔吐毒素檢出率為93.22%最高,表明2019 年飼料及原料中嘔吐毒素整體呈現污染面廣、污染程度高的現象,建議廣大飼料行業同仁警惕該毒素的污染情況,這也與周建川(2018)研究報道較一致。分析原因,飼料及原料在收獲前、儲存期間或飼喂期間都可能受到幾種真菌代謝物的污染。受污染的飼料會對家畜的生產性能和健康產生不利影響,并可能危害人體健康。因此做好霉菌毒素的消除工作,是目前學者迫切要解決的重要問題(黃鑫,2018)。

玉米含豐富的氨基酸、糖類、維生素等營養成分,在日糧中添加比例在50%~70%。分析發現,2019 年收檢玉米毒素檢出率為78.49%,低于2019 年飼料及原料平均檢出率。黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素三種毒素超標率均高于2018 年山東省玉米霉菌毒素的調查結果(朱鳳華,2019)。這可能與收檢樣品的產地有關,例如東北玉米一般水分偏高,東北玉米種植帶后期持續潮濕,這就導致在田間、在存儲過程中霉菌都有可能生長。梁琛(2017)也有報道玉米中嘔吐毒素的含量從山西北部到山西南部呈降低趨勢。

收檢玉米副產物主要有玉米蛋白粉、玉米皮、玉米胚芽粕、DDGS 等,毒素超標率是44.07%,遠高于其它樣品,表明玉米副產物霉菌毒素污染面積廣且污染嚴重,這與之前學者的研究結果也是比較一致的(李維,2018)。玉米DDGS 含有豐富的蛋白質、脂肪、氨基酸等,它經過發酵濃縮了3 倍的玉米營養成分的同時霉菌毒素也得到了濃縮,因此玉米副產物霉菌毒素的污染不但普遍而且檢出水平更高。為了保護動物的健康及動物性食品的安全,我們必須對其予以特別關注及嚴格監控。

配合飼料中嘔吐毒素檢出率是98.62%,超標率23.45%,最高 值 7993.6 μg/kg 是 GB 13078-2017《飼料衛生標準》(豬配合飼料≤1000 μg/kg)的7.99倍。這一檢測結果與2018 年相比,污染加重,建議廣大飼料行業同仁應重點把控嘔吐毒素污染(朱風華,2019)。

發酵飼料黃曲霉毒素B1檢出率92.22%,超標率5.56%,這與劉鳳芝2017 年研究結果相似。研究發現,飼料經過發酵不僅不會產生毒素,利用生物法反而會對原料中的毒素起到一定的降解作用(劉金海,2012)。李加友(2016)研究發現被黃曲霉毒素污染的玉米添加少量麩皮、尿素使用產朊假絲酵母菌發酵后,黃曲霉毒素由230 μg/kg 下降至8.7 μg/kg。但從檢測結果中發現,發酵料的毒素超標率反而高于配合飼料,可能與發酵料選擇的發酵原料有關。對發酵料的原料進行分析,發現以玉米副產物作為原料的發酵料,毒素更容易超標,因此推斷發酵料毒素更大可能是來自飼料原料本身。

生物降解法降解霉菌毒素,是可以通過微生物產生的胞內、胞外酶降解毒素分子,將毒素分子降解成為無毒產物的過程(LAHTINEN S J,2004)。周露等發現優化后的P.ostreatus P1 對黃曲霉毒素B1的降解高達82.43%(周露,2014);如Das 等將P.ostreatus GHBBF10 和P.ostreatus MTCC142 與黃曲霉在稻草中共培養,這兩種糙皮側耳均能抑制黃曲霉的生長,并能有效地降解黃曲霉毒素B1,最高降解率可達89.41 %(DAS A,2014)。生物降解霉菌毒素還可以依靠自身的吸附能力如細胞壁糖、酸等作用使菌體- 毒素復合物達到穩定狀態,起到降低毒素生物利用度的作用,使其不易被機體吸收,進而排出體外。據報道,很多乳酸菌、酵母菌的菌體都能夠結合黃曲霉,降低黃曲霉在體能的活性(黃巍,2019);Lahtinen 等的研究也表明,微生物細胞壁的肽聚糖對毒素的脫毒起到關鍵作用(LAHTINEN S J,2004);劉暢研究發現:酸處理后能夠增加細胞壁的凹凸程度,凹凸程度的增加一方面增加了細胞壁的通透性,細胞表面一些新的吸附位點暴露出來,另一方面增加了細胞與毒素的接觸面積,提高了吸附能力(劉暢,2010)。

4 結論

2019 年收檢霉菌毒素的檢測結果表明,飼料及原料普遍存在霉菌毒素污染的現象,毒素檢出 率 為90.85% , 超 標 率 為16.20%,其中嘔吐毒素超標率最高,其次是玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素B1。嘔吐毒素是近年來飼料行業超標率最嚴重的一種毒素,廣大飼料行業同仁需高度重視。收檢玉米副產物,三種毒素的均值均高于《飼料衛生標準》,使用時需嚴格把控添加量;發酵飼料中玉米赤霉烯酮含量較高,在用作豬配合飼料時需注意。

參考文獻:(略)

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