正交試驗優(yōu)化暴馬丁香枝條中紫丁香苷提取了藝

李雯 邢躍 呂世存 秦佳梅

摘要：為了充分利用暴馬丁香資源，以暴馬丁香枝條為材料，通過正交試驗設(shè)計，優(yōu)化浸提液濃度、超聲功率、超聲時間的最佳提取工藝條件。結(jié)果為60%的乙醇、超聲頻率180w、超聲60min，提取率達2.268mg/g。

關(guān)鍵詞：暴馬丁香枝條;紫丁香苷;超聲;正交試驗

暴馬丁香為亞喬木，樹皮人藥，有清肺、祛痰、消炎、止咳、平喘、利尿等功效。中國藥典將紫丁香苷為藥材評價指標。紫丁香苷具有調(diào)節(jié)機體免疫、保肝、抗炎、降血壓、提高耐受能力等藥理活性。在藥材采收時大量的暴馬丁香枝條被修剪下來.造成了資源的浪費。而王化等研究表明，暴馬丁香樹干、枝條均含有紫丁香苷，故選擇暴馬丁香枝條為材料，通過正交設(shè)計法，探究超聲提取暴馬丁香中紫丁香苷的最佳工藝，為暴馬丁香資源的綜合利用提供參考。

1 材料與方法

1.1供試材料

于2018年春采自吉林省白山市臨江區(qū)，經(jīng)鑒定為暴馬丁香[Syringa reticulata，（BL）Hara var amureneis（Maxim.）Hara]枝條，烘干粉碎過40目篩，裝袋備用。

1.2方法

1.2.1標準曲線的繪制。準確稱量5mg紫丁香苷標準品（純度HPLC≥98）加純凈水定容得100ug/mL的標準液，準確移取2.5、5.0、7.5、10.0、12.5mL分別放置于5個50mL容量瓶中，用純凈水定容并搖勻，稀釋100倍，在265nm波長條件下測定吸光值，繪制標準曲線如圖1。標準線性方程為Y=0.0457X+0.0133（R²=0.9993），表明紫丁香苷濃度在5～25ug/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

1.2.2供試溶液的提取與測定。精確稱取暴馬丁香粗粉1g，以乙醇濃度、超聲時間、超聲頻率為考察因素，以紫丁香苷提取率為指標進行超聲波提取的正交優(yōu)化。選用L9（3）4正交表進行試驗，因素水平見表1。以純化水為溶劑配制成不同體積分數(shù)的乙醇，量取一定體積并浸泡1h，用KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器在不同功率下超聲提取一定時間，將得到提取液在轉(zhuǎn)速為12000r/min TGL-20bR離心機下離心25min，精密移取lmL提取液稀釋100倍后，用1.2.1方法測定吸光度，并計算含量。

1.3數(shù)據(jù)處理

運用IIV3.1正交設(shè)計助手對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 正交試驗設(shè)計、結(jié)果與分析

由表2中極差R可得到，各因素對紫丁香苷含量的影響順序為C>A>B，即超聲功率>乙醇濃度>超聲時間。綜合直觀分析3個因素的紫丁香苷含量的平均值K₁、K₂、K₃，確定最佳提取工藝的條件組合為A₂B₂C₂，即超聲提取正交試驗最佳提取工藝為：乙醇濃度60%、超聲時間60min、超聲頻率180w。由分析結(jié)果可知，超聲功率對紫丁香苷含量的影響較顯著，乙醇濃度和超聲時間對紫丁香苷含量的影響則不顯著。根據(jù)得出的最優(yōu)條件進行試驗驗證，經(jīng)3次平行試驗所得紫丁香苷提取率的平均值為2.268mg/g，紫丁香苷含量數(shù)據(jù)穩(wěn)定.提取工藝穩(wěn)定可靠。

3 結(jié)論與討論

通過考察的4個主要因素——料液比、乙醇濃度、超聲功率、超聲時間，其中料液比和乙醇濃度的結(jié)果與蔡恩博等的研究一致，而超聲功率的影響與文獻結(jié)果有差異，超聲時間的影響尚無資料可參閱，因此，本項目確定液料比為1：20（mg/mL），正交實驗設(shè)計考察乙醇濃度45%、60%、75%;超聲功率120w、180w、240w、超聲時間45min、60min、75min的交互作用對超聲輔助提取暴馬丁香枝條中紫丁香苷的影響，結(jié)果影響順序為超聲功率>浸提液濃度>超聲時間，最佳提取工藝為乙醇濃度60%、超聲時間60min、超聲頻率180w。其中超聲條件認為時間延長可使提取物溶解到溶劑的總量在不斷增多，過長會導(dǎo)致部分提取物結(jié)構(gòu)被破壞。超聲功率較低不足以使物料充分受到超聲波的作用，而過高則可能對紫丁香苷產(chǎn)生破壞作用。

正交試驗法是根據(jù)正交性從全面試驗中挑選出部分有代表性的點進行試驗，當(dāng)試驗涉及的因素在3個或3個以上，而且因素間可能有交互作用時，試驗工作量就會變得很大甚至難以實施，針對這個困擾，正交試驗設(shè)計無疑是一種好的選擇，其優(yōu)點是高效率、快速、經(jīng)濟。