奶牛乳房炎診斷技術淺析

張紅秋

（遼寧省朝陽市凌源市動物衛生監督所遼寧朝陽 122500）

奶牛乳房炎又稱乳腺炎，這種炎癥的發病率比較高，并且發病范圍也比較廣，是一種由化學、物理或者微生物等刺激所產生的一種炎癥，給奶牛業造成巨大的經濟損失。防治乳房炎受到各國的普遍重視，有效控制奶牛乳房炎，對提高奶牛生產性能、減少經濟損失及促進奶業健康持續發展具有極其重要的意義。

1 奶牛乳房炎的主要致病菌

90%以上的奶牛患乳房炎都是由于大腸桿菌、鏈球菌以及金黃色葡萄球菌引起的。尤其是金黃色葡萄球菌對于奶牛乳房炎的影響最為強烈，普遍存在于全國各地的奶牛養殖場。金黃色葡萄球菌具有很強的免疫抑制力，通常在奶牛乳房炎發病的高峰期感染奶牛，被感染的個體大多數情況下發病較慢，并且具有復發率高以及治愈困難的特點，給奶牛的養殖企業造成了巨大的經濟損失。

真菌、細菌以及病毒等都是奶牛乳房炎的致病菌，其中細菌是最為主要的致病菌。根據相關報道，在奶牛乳房炎的病例中檢測出了除金黃葡萄球菌外的130 多種微生物，與奶牛乳房炎的發病有關的細菌可以被分為兩種類型：傳染型和環境型。傳染型細菌以化膿性假單胞菌、金黃的葡萄球菌、支原體以及無乳鏈球菌為主。環境型細菌主要是克雷伯氏菌、大腸桿菌以及綠膿桿菌。在奶牛養殖的過程中，為了獲得最大的經濟效益，要對奶牛的乳房炎疾病進行嚴格的防控，所以了解并鑒定其致病病原體是非常重要的一項工作，需要給予足夠的重視。

2 奶牛乳房炎相關診斷辦法

2.1 乳房炎相關診斷辦法概況

奶牛的乳房炎目前主要有兩種類型，分別是亞臨床型乳房炎和臨床型乳房炎，其中亞臨床型乳房炎也稱作隱性乳房炎。在奶牛的實際養殖過程中，臨床型的乳房炎是比較容易通過肉眼的觀察來實現診斷的，所以對于亞臨床乳房炎的診斷是研究的主要課題。目前，亞臨床型乳房炎檢測方式通常存在耗時較長、假陰性結果多并且靈敏度不高的特點。在實際投入應用的鑒定方式中，微生物培養是一項黃金標準，盡管抗生素對于生物體具有很多的優勢，但是對病原菌的鑒定并不穩定，這種方法具有較大的變異性，所以在培養乳房以及乳汁等樣品中，微生物培養的鑒定方式出現了25%～55%的假陰性。

目前，國內外一些學者針對傳統鑒定方法的缺點進行了許多深入研究，以期望實現對奶牛乳房炎進行更好的防控。比如大量關于納米技術、生物傳感技術以及紅外技術的研究相繼開展，并且陸續在該領域內應用。但是目前的檢測技術仍然存在缺點，需要更深入的研究與實踐才可以更好地在奶牛乳房炎的實際防控工作中發揮作用。在一些新興技術中，被獸醫以及人醫領域都受到重視的是實時熒光多重PCR 技術，該技術是目前診斷奶牛乳房炎最合適的替代方式，具有準確、快速、高靈敏度以及高特異的特點。

2.2 紅外技術診斷奶牛乳房炎

根據相關研究，證實了致病因子的毒力對乳房炎的炎癥反應具有一定的影響，但需要通過更深入的研究才能確定乳腺炎與相關促炎因子的具體作用原理。由相關報道可知基于對生物體DNA 識別，將已知物種的光譜與參考數據庫進行對照，可以將關系相近的物種區分開。除此之外，大量研究證明，傅里葉變換紅外光譜技術是調查流行病與污染源追蹤的一個有力手段。基于該系統的技術一旦被建立，就可以使用最低的成本準確地實現乳腺病原體的檢測，以此來實現對乳房炎進行及時的診斷。

2.3 生物傳感技術診斷奶牛乳房炎

奶牛在發病與治療前的行為變化也是診斷必不可少的關注因素，研究發現奶牛的總體活動與采食量在出現癥狀的前幾天會發生明顯的變化，所以可以將這些變化作為檢測的指標。目前有學者研發了一個自動監測系統，這種系統可以記錄反芻動物的自身健康與活動。另有一批學者也發明了一種智能監控方面的監測系統，這種系統可以實現在發病前幾天對奶牛的診斷，但是要大量應用于實際還需進一步提高其敏感性與特異性。

2.4 分子診斷技術檢測奶牛乳房炎

使用常規的檢測方法不能達到良好的效果時可以使用分子診斷技術，分子診斷技術包括PCR（聚合酶鏈式反應）和LAMP（環介導）等技術，這些技術都是基于檢測核酸以及病原體的基因組序列。PCR可以檢測病毒與霉菌，并且可以檢測出抗性基因。多重實時的PCR技術可以對DNA 進行定量分析，用50℃去污染3min，95℃預變性3min，95℃11s 擴增并且65℃42s 退火等進行40 多個循環。LAMP可以在一定溫度下將靶基因擴增，可以實現65min 內準確有效地檢測出病原體，特別適用于快速檢測金黃色葡萄球菌。

3 總結

近年來隨著奶牛養殖規模的不斷擴大，奶牛乳房炎的問題也在很大程度上給養殖企業的經濟效益造成了損失。在診斷奶牛乳房炎方面，許多學者進行了大量的研究，特別在蛋白重組與基因學方面取得了很大的進步。目前多重實時PCR 檢測是比較有效的檢測方式，但是對其推廣不夠，因此，有必要將這些有效技術進行推廣應用，以實現奶牛乳房炎的有效診斷。