羊布魯氏菌病的診斷與防治

高家登

（那曲市畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣總站西藏那曲 852000）

布魯氏菌病（Brucellosis）也被稱作馬爾他熱，由于馬耳爾他熱的發(fā)熱呈起伏波浪型，因此也叫波浪熱，是由布魯氏菌引起人獸共患的一種傳染病。布魯氏菌病在我國被列為二類動物疫病。主要危害牲畜的生殖系統(tǒng)，引起懷孕母畜流產(chǎn)、流產(chǎn)胎兒多為死胎或弱胎，公畜發(fā)生附睪炎和睪丸炎、觸之局部發(fā)熱。人主要是接觸病畜或流產(chǎn)物而感染布病，給人類的身體健康和畜牧業(yè)的健康發(fā)展帶來了嚴重威脅。

1 病原

該病的病原體為羊型布魯氏菌（Ovine type of Brucella），分有3 個生物型。該菌是需氧型革蘭氏陰性桿菌，大多數(shù)生活在動物的細胞內(nèi)。本菌在初代分離培養(yǎng)時，是在布魯氏菌屬中唯一保持球桿狀的一個種，大小約為0.6～1.5μm× 0.5～0.7μm，多數(shù)散在分布，極少數(shù)形成短鏈或成對出現(xiàn)[1]。該菌既無芽孢也無鞭毛，在極端的條件下有形成莢膜的能力。布魯氏菌沒有產(chǎn)生外毒素的能力，但是內(nèi)毒素的毒性比較強，一般情況下，在牛羊豬等牲畜布魯氏菌當(dāng)中羊布魯氏菌毒性是最強的。雖然說各種型的布魯氏菌都有主要的宿主，但是普遍存在羊布魯氏菌傳染其他動物的現(xiàn)象。該菌對外界環(huán)境的抵抗力較強，在水和泥土中能夠生存1～4 個月，在乳汁當(dāng)中能夠存活2 個月，存放在陰暗處的流產(chǎn)胎兒當(dāng)中可以存活180d。但該菌對濕熱比較敏感，60℃30min 或70℃5～10min 或太陽直射0.5～4h 可將其殺死，如果100℃可立刻死亡。0.1%苯扎溴銨或0.2%醋酸氯己定5min 可將其殺死，2%～3%甲酚皂液、1%～2%石炭酸可在1h 內(nèi)將本菌殺死[2]。

2 流行病學(xué)

該病在全球都有流行，全球170 多個國家和地區(qū)都曾經(jīng)報告過人畜布病的發(fā)生。我國布病的流行主要分為四個階段，第一階段是上個世紀50—70 年代我國布病曾大范圍流行，疫情比較嚴重的地方人畜感染率可達50%，即流行期。第二階段是80—90 年代，因防控力度的重視，布病得到了很好的控制，即控制期。第三階段是到了2000 年以后，因?qū)Σ疾》揽毓ぷ鞯膹?fù)雜性、長期性認識不到位以及養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展、動物及動物產(chǎn)品的頻繁流動等因素導(dǎo)致布病出現(xiàn)上升趨勢，即反彈上升期。第四階段是在2010 年以后布病出現(xiàn)了再次流行。2015 年，全國報告人間布病感染病例56,989 例；畜間布病感染比較嚴重的15 個省份，陽性率同比上升0.38%[3,4]。2005—2016 年，崔步云等人在全國感染布病的人群當(dāng)中分離出了276 株菌株，其中羊種布病菌株占74%[5]。

本病全年都可發(fā)病，但以春秋季多發(fā)。攜帶病菌的羊（包括野生羊）及患病羊是本病的主要傳染源。感染本病的懷孕母羊，在出現(xiàn)流產(chǎn)的時候，跟隨胎衣、胎兒及羊水等將會排除大量的病菌，排除的病原菌能夠污染圈舍、水源、土壤等。如果人員接觸患病羊生產(chǎn)的羔羊或流產(chǎn)物時防護不當(dāng)很容易發(fā)生自身感染。患有布魯氏菌病的羊可以在羊與羊之間傳播，也可由羊傳染給其他動物或者人，但是人與人之間不會相互傳播，同時也沒有人傳給動物的報告。患病的種公羊精液中也會攜帶布魯氏菌，在交配過程中將感染母羊。一般情況下，母羊的感染率高于公羊，成年羊比幼羊易發(fā)。母羊感染布魯氏菌后第一次流產(chǎn)的高達50%以上，而第二次很少發(fā)生流產(chǎn)[6]。

消化道是本病的主要傳播途徑。呼吸道、吸血昆蟲以及皮膚、黏膜的破損也可傳播本病。人的感染布病主要是職業(yè)人群占多數(shù)，但就目前情況看有向普通人群蔓延的趨勢。普通人群主要是由于吃病羊胎盤、生鮮羊肉、生鮮羊奶或接觸患病臟器而發(fā)病。

3 臨床癥狀

該病的潛伏期最短14d，長的可達180d。主要的癥狀就是母畜流產(chǎn)，一般在懷孕3～4 個月發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)前2～3d 出現(xiàn)即將分娩的癥狀，陰唇、乳房腫脹，陰道流出黃色分泌物，流產(chǎn)出的胎兒多為死胎或弱胎。公畜感染布病后主要出現(xiàn)睪丸或附睪炎癥，觸摸有發(fā)熱、堅硬的感覺，精液品質(zhì)質(zhì)量下降，嚴重的失去配種能力，有時可見陰莖潮紅腫脹。其他的癥狀也可見到關(guān)節(jié)腫脹、腱鞘炎、滑液炎、乳房炎、跛行等。

4 病理變化

該病無明顯的病理變化。可見妊娠母畜或流產(chǎn)母畜子宮內(nèi)膜和胎衣出現(xiàn)淺黃色的炎性浸潤、滲出、有的出現(xiàn)點狀出血。流產(chǎn)的胎兒胃內(nèi)可見淺黃色或白色絮狀物，在膀胱、胃腸的漿膜有出血點或條狀出血帶。肝臟、脾臟還有淋巴結(jié)出現(xiàn)腫脹或形成特征性肉芽腫，有的還會出現(xiàn)局部壞死灶。病公羊的精囊有點狀出血，睪丸和附睪出現(xiàn)化膿、壞死或結(jié)締組織增生。

5 診斷

通過病畜的流產(chǎn)，公畜的睪丸炎和附睪炎等癥狀有助于該病的初步診斷，如果需要確診必須進行實驗室檢測。

5.1 病原學(xué)診斷

該方法對實驗室的要求極高，采集流產(chǎn)的胎兒、胎衣或奶樣、血樣開展實驗室的分離純化，分離出病原體后進而確診，該方法是診斷布病的"金標(biāo)準"。該方法的缺點是分離率低，時間長，對生物安全要求高。

5.2 免疫學(xué)診斷

初步篩選時可選擇虎紅平板凝集試驗（RBT），也可采用熒光偏振試驗（FPA）和全乳環(huán)狀試驗（MRT）。確診時可以采用試管凝集試驗（SAT），也可采用補體結(jié)合試驗（CFT）、競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（cELISA）和間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（iELISA）。在初篩和確診時應(yīng)用RBT 和SAT 的方法較多，原因是操作簡單、使用儀器簡單、廉價，缺點是判斷結(jié)果時受人為因素影響較大、特異性和靈敏度都不高。iELISA常用于抗體檢測，cELISA 常用于小分子抗原檢測，ELISA 的優(yōu)點是靈敏度高、特異性強、快速、簡單，但是該實驗試劑昂貴，還需要特定的儀器和一定的專業(yè)技術(shù)人員才能開展實驗，在基層目前該方法難以推廣。CFT 特異性強，但是操作較為復(fù)雜，實驗條件要求苛刻，與ELISA 相比，大多數(shù)人員選擇后者開展實驗。很多研究人員根據(jù)試驗?zāi)康牡牟煌瑫Y(jié)合幾種檢測方法特性開展實驗[4,7]。

5.3 分子生物學(xué)診斷

應(yīng)用的方法有聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）和核酸探針檢測。這兩種方法雖然在布病的檢測當(dāng)中具有符合率高、結(jié)果良好等優(yōu)點，但目前處于實驗室研究層面[4]。

6 防治

6.1 防治策略

2016 年農(nóng)業(yè)部會同國家衛(wèi)生計生委根據(jù)畜間和人間布病發(fā)生和流行規(guī)律，綜合考慮家畜流動實際情況和布病防治的整片推進，將全國分區(qū)域進行防控，全國共劃分了三類區(qū)域。一類地區(qū)的防控策略是以免疫接種為主；二類地區(qū)的防控策略是以監(jiān)測凈化為主；三類地區(qū)的防控策略是以風(fēng)險防范為主，目前只有海南省。在全國，種用牲畜禁止免疫，實施監(jiān)測凈化；產(chǎn)奶牲畜原則上不免疫，實施檢測和撲殺為主的措施[3]。

6.2 免疫

我國目前使用的弱毒疫苗有S2 株和M5 株2 種。S2 株應(yīng)用范圍最廣，并且毒力穩(wěn)定、使用安全、免疫力好，且口服免疫不會引起母畜的流產(chǎn)，羊的免疫期為36 個月。另一種是馬耳他布魯菌5 號苗（M5 株），綿羊和山羊的免疫期也是36 個月，可用于氣霧免疫，懷孕羊禁用。

6.3 治療

對于檢測出的陽性羊只應(yīng)做好淘汰、無害化處理，不應(yīng)采取治療，采取治療將會增加同群羊和人的感染幾率，并且到目前為止尚無有效的治療藥物。