微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全問題探討

汪梅青

（安徽中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，安徽 蕪湖 41000）

0 引言

生物安全即是由現(xiàn)代的生物技術(shù)造成的對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生的潛在性危害，以及對(duì)產(chǎn)生危害采取的行之有效的預(yù)防及控制措施[1]。生物安全防護(hù)，是實(shí)驗(yàn)室日常工作中的基礎(chǔ)和重點(diǎn)內(nèi)容。其目的，是采取相關(guān)措施防止實(shí)驗(yàn)室發(fā)生病原體或毒素的意外暴露和釋放，對(duì)危險(xiǎn)生物因素的產(chǎn)生進(jìn)行有效預(yù)防和控制，將實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)降低到可控范圍，確保實(shí)驗(yàn)活動(dòng)在安全、穩(wěn)定的狀態(tài)下有序進(jìn)行。

病原微生物的感染途徑可分為自然感染途徑和其他感染途徑。其中自然感染途徑指病原微生物通過自然途徑感染，其他感染途徑指的是通過實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)、醫(yī)院診治等造成的感染[2]。在自然界中，病原微生物可以通過水、空氣、食物、媒介等途徑感染，而在實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)院等場(chǎng)所，職業(yè)暴露和意外暴露是主要的感染途徑，比如吸入、割傷、刺傷、接觸等都是導(dǎo)致暴露的直接因素。因此，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該按照國家要求的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范進(jìn)行設(shè)計(jì)和建造，實(shí)驗(yàn)室在給排水、通風(fēng)、消毒和滅菌、布局等方面根據(jù)不同風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，選擇不同的設(shè)計(jì)要求，滿足不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)對(duì)象的防護(hù)要求。以生物安全的建設(shè)為核心，確保實(shí)驗(yàn)室人員的安全以及實(shí)驗(yàn)室外部環(huán)境的安全，并同時(shí)兼顧經(jīng)濟(jì)和實(shí)用性原則。

1 生物安全實(shí)驗(yàn)室水平分級(jí)

根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》[3]可以將生物安全類實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)等級(jí)：

1.1 一級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-1）

為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室，處理對(duì)象為對(duì)群體和個(gè)體危害較低，不具有對(duì)成人致病的致病因子，但包括一些可能會(huì)對(duì)免疫力低下，如兒童、老人和免疫缺陷性疾病患者造成感染的條件致病菌。在遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程的前提下可以進(jìn)行開放式操作。

1.2 二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）

處理對(duì)象為對(duì)個(gè)體有中等危害，可引起不同程度的感染，對(duì)群體危害較低，有致病性，但對(duì)健康成人不會(huì)造成嚴(yán)重危害，已經(jīng)具備有效的防控和治療措施。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備生物安全柜和密封的離心管，防止氣溶膠的產(chǎn)生和泄漏事件。這些病原菌可能通過破損的皮膚和黏膜發(fā)生感染，當(dāng)戴手套、面罩、隔離衣等防護(hù)下可在開放的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。

1.3 三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）

處理對(duì)象為對(duì)個(gè)體有高度危害，對(duì)群體亦有較高危害，通過直接接觸或氣溶膠可使人感染上嚴(yán)重甚至是致命性的疾病，通常有預(yù)防和治療措施。BSL-3實(shí)驗(yàn)室通過嚴(yán)格的防護(hù)屏障來保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員避免受到有害氣溶膠的感染。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有獨(dú)立的負(fù)壓保護(hù)排風(fēng)系統(tǒng)，即氣流按清潔區(qū)→半污染區(qū)→污染區(qū)方向流動(dòng)，最后經(jīng)高效過濾系統(tǒng)由專用排風(fēng)管道排出。應(yīng)配備有II 級(jí)和III 級(jí)生物安全柜，其位置要避開頻繁走動(dòng)的區(qū)域和污染區(qū)入口。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止安裝地漏，下水應(yīng)直接通往獨(dú)立的液體消毒裝置系統(tǒng)，集中消毒以后再排放。

1.4 四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-4）

屬最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，處理對(duì)象為對(duì)個(gè)體和群體具有高度危險(xiǎn)性，能引起人類致死性感染，可通過氣溶膠或不明途徑進(jìn)行傳播，尚無預(yù)防和治療措施。實(shí)驗(yàn)室要遠(yuǎn)離人口密集區(qū)，選擇獨(dú)立的建筑物或者建筑物中獨(dú)立的安全隔離區(qū)域，周圍有封閉的安全隔離帶，排風(fēng)系統(tǒng)采用雙重過濾裝置。通過使用II級(jí)和III 級(jí)生物安全柜和正壓防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室工作人員與感染性物質(zhì)完全隔離。

2 實(shí)驗(yàn)室布局

為有效防止實(shí)驗(yàn)室獲得性感染和交叉感染，保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的布局必須符合生物安全規(guī)定，至少劃分成三個(gè)區(qū)域。

2.1 清潔區(qū)

即沒有被病原微生物污染的區(qū)域，包括辦公室、休息室、試劑儲(chǔ)存室等，此區(qū)域禁止帶入用以檢測(cè)細(xì)菌的標(biāo)本。

2.2 半污染區(qū)

為有可能被病原微生物污染到的區(qū)域，如內(nèi)走廊、緩沖間、工作服放置室等。

2.3 污染區(qū)

為已經(jīng)被病原微生物污染到的區(qū)域，用于接收標(biāo)本、標(biāo)本的接種、培養(yǎng)鑒定、藥敏試驗(yàn)等。污染區(qū)內(nèi)可根據(jù)檢驗(yàn)流程細(xì)分為。

3 實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備

3.1 生物安全柜

即通過負(fù)壓進(jìn)行過濾的排風(fēng)柜，可防止實(shí)驗(yàn)室工作人員暴露于操作過程中產(chǎn)生的具有感染性的氣溶膠環(huán)境中。有可能產(chǎn)生致病性氣溶膠的實(shí)驗(yàn)、處理高濃度化學(xué)品和感染性物質(zhì)時(shí)均應(yīng)該在生物安全柜中進(jìn)行[4]。在室內(nèi)人員走動(dòng)少、氣流流動(dòng)小、離門較遠(yuǎn)的地方。實(shí)驗(yàn)室工作人員要接受相關(guān)的操作和維護(hù)培訓(xùn)，日常操作應(yīng)該嚴(yán)格按照使用說明書和操作規(guī)程進(jìn)行，每年要由具有檢測(cè)資質(zhì)的機(jī)構(gòu)對(duì)生物安全柜進(jìn)行氣流、風(fēng)速、紫外線等方面的檢測(cè)，一旦出現(xiàn)了污染，要及時(shí)消毒處理。當(dāng)生物安全柜出現(xiàn)持續(xù)正壓的情況時(shí)應(yīng)立即停止操作，采取相應(yīng)措施恢復(fù)負(fù)壓環(huán)境，發(fā)生此類情況或者遭遇意外停電，造成感染性物質(zhì)暴露和污染時(shí)，應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行全面消毒。

3.2 高壓蒸汽滅菌器

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器，下排式可防止氣溶膠的污染，按照規(guī)范操作，定期維護(hù)，確保滅菌器的正常使用。按期檢查和驗(yàn)證，并做好各項(xiàng)記錄，操作人員應(yīng)該經(jīng)過專門的培訓(xùn)，持證上崗，經(jīng)常進(jìn)行滅菌效果的監(jiān)測(cè)。若不按照操作規(guī)程其效果會(huì)大打折扣，甚至失去滅菌作用。如果長時(shí)間使用而沒有定期監(jiān)測(cè)滅菌效果，可能導(dǎo)致功能下降，存在滅菌不徹底而引起污染的隱患[5]。長期不用的時(shí)候，若內(nèi)部水分沒有排干，會(huì)導(dǎo)致內(nèi)部零件老化損壞而失去正常的功能。

3.3 個(gè)人防護(hù)用品

在處理危險(xiǎn)性物質(zhì)時(shí)應(yīng)戴上安全護(hù)目鏡、面部防護(hù)罩、呼吸保護(hù)用品等。當(dāng)手部可能接觸到感染材料和設(shè)備時(shí)應(yīng)戴上手套，手套可防止化學(xué)污染、生物危害、刺傷割傷、過冷過熱性刺激等。最常使用的是乳膠手套，操作前應(yīng)檢查手套是否有破損，如果可能發(fā)生感染性危險(xiǎn)品濺出或溢出的情況下可戴兩副手套，手套要完全遮蓋至腕部，一旦受污染后要立即更換，不得帶出實(shí)驗(yàn)室，用完后應(yīng)消毒或安全廢棄，一次性醫(yī)用手套不能再次使用。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不論時(shí)間長短都必須穿著防護(hù)服，離開前應(yīng)立即脫去并留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，消毒后統(tǒng)一洗滌或者丟棄。

3.4 應(yīng)急救治設(shè)施

洗眼器應(yīng)該安裝在靠近出口的水池旁，并配備應(yīng)急噴淋裝置。配備應(yīng)急藥箱，急救物品與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)，注意使用有效期，由專人負(fù)責(zé)管理，定期清理和更新。

4 生物安全應(yīng)急處理辦法

4.1 離心管破裂

如果運(yùn)行中的含有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂，應(yīng)立即關(guān)閉電源，待離心機(jī)停止工作后靜止30分鐘，氣溶膠沉降后開蓋，玻璃碎片用鑷子取出，離心桶、轉(zhuǎn)子、十字軸等均應(yīng)放在消毒劑內(nèi)消毒30分鐘，離心機(jī)內(nèi)壁用消毒液反復(fù)消毒。清理時(shí)應(yīng)戴上手套，全部物質(zhì)都要按照感染性物質(zhì)處理。

4.2 發(fā)生空氣污染

發(fā)生潛在感染性氣溶膠的釋放時(shí)，所有實(shí)驗(yàn)室工作人員立即撤離現(xiàn)場(chǎng)并接受醫(yī)學(xué)檢查，穿戴防護(hù)裝備清理污染，可用低溫甲醛氣體進(jìn)行消毒，因甲醛有致癌作用，因而不能用于實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。

4.3 感染物質(zhì)灑出

當(dāng)發(fā)生感染物質(zhì)漏出或?yàn)⒊觯瑧?yīng)立即用吸水紙等覆蓋住污染處，由外圍向中心方向倒上消毒液，作用30 分鐘以上后清理掉，丟入專門放置污染性廢棄物的容器內(nèi)統(tǒng)一處理，然后用消毒液再次擦拭消毒污染區(qū)域，操作全程都要做好防護(hù)措施。

5 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)室的工作人員在日常工作中容易接觸到各種危險(xiǎn)因素，在操作過程中存在著各種已知或未知的風(fēng)險(xiǎn)，如果這類風(fēng)險(xiǎn)不能得到有效的預(yù)防和控制，不僅威脅實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)＜吧２≡⑸镞€可能擴(kuò)散到外界環(huán)境中，導(dǎo)致疾病的流行和爆發(fā)，危害公眾健康，威脅社會(huì)安定。據(jù)統(tǒng)計(jì)，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員感染傳染病的幾率比普通人高5-7 倍，因此，實(shí)驗(yàn)室生物安全問題不容忽視。