放射治療對人宮頸癌組織的增殖細胞核抗原表達的影響

吳曉葵

（吉林市中心醫院，吉林 吉林 132011）

在臨床治療中，宮頸癌是婦科疾病中較為常見的一種惡性腫瘤疾病[1]，以往患者的發病年齡在30歲以上，且該疾病在早期常無癥狀體征，發展后可能會出現陰道流血、排液等臨床癥狀的發生，近今年該疾病的趨勢在逐漸朝著年輕低齡女性身上發生。一般而言，這類疾病對患者造成的影響較大，不僅會影響患者的日常生活工作，還會給患者的心理造成極大的負擔。有研究表明，宮頸癌疾病能夠通過早期的預防和治療將其發病率有效的降低，而針對已發生的患者該疾病主要是采取手術和放療為主的方式進行治療。宮頸癌疾病早期多為接觸性出血，到中晚期則為不規則陰道流血。由于放射治療主要的適用于中晚期患者。對于該疾病患者而言，放射治療能夠提高患者的生存時間，對于延長患者的生命起著至關重要的作用。因此有效的提高放射療效能夠提高腫瘤的治療效果，本研究就針對深入的探討放射治療對人宮頸癌組織的增殖細胞核抗原表達的影響，現詳細報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取2017年6月～2018年11月收治的20例宮頸癌患者為研究對象，所有患者均經過診斷確診為鱗狀細胞癌，且患者的病例根據臨床癥狀的不同可以將其分為Ⅰ～Ⅱ，患者年齡34～60歲，平均（34.20±8.30）歲。

1.2 方法

參與研究的患者在放射前均接受盆腔照射30～40 Gy/15至20次，隨后采取活檢組織放置于溫度為4℃的40 g·L-1的多聚甲醛混合0.1 mol·L-1磷酸緩沖液中，靜置1～2天后放置于溫度為4℃的30g·L-1的蔗糖溶液中一晚，將其切成厚度為10 μm的30張切片，分成相應的3套保存在零下20℃下備用。取出切片后晾干進行染色，主要采取免疫組織化學染色法進行染色[2]，將切片分別放置在濃度為10 mmol·L-1的磷酸緩沖鹽水中清洗10分鐘、濃度為0.3 ml·L-1的雙氧水中清洗30分鐘，再將其放置入鼠抗PCNA單克隆抗體內，于室溫4℃下孵育2天，孵育后放置在biotin標記的兔抗鼠IgG溶液內，常溫靜置4小時后置于ABC復合液內，常溫孵育2小時，需要注意的是在每次孵育過程中均需要采用磷酸緩沖液進行沖洗10分鐘，沖洗完成后再放置于雙氧水中10分鐘。

1.3 觀察指標

在本次試驗中，通過采取半定量分析的方式，

1.4 統計學方法

使用SPSS 20.0軟件對放射前后患者的增殖細胞核抗原的內容做統計學分析。

2 結 果

2.1 PCNA免疫陽性反應

通過切片觀察發現，PCNA免疫陽性反應物主要是會在細胞核上呈現深棕色，在細胞核膜和核周上只存在少量的陽性物。

2.2 放射前和放射后患者的PCNA免疫陽性胞體細胞的分布情況

放射前患者的活檢組織呈現PCNA免疫陽性染色，并且癌細胞組織染色程度中等，且可見部分免疫染色物質不同程度的在細胞核膜和細胞質內展開；放射后患者的活檢組織中僅存的癌細胞不再呈現PCNA免疫陽性染色，相反在間質組織間出現較強的染色現象。

2.3 宮頸癌組織的病理學進行觀察

常規進行染色的切片在放射前后會出現不同的情況，即：（1）放射前：在切片的宮頸組織上能夠看見大量的癌細胞呈現巣狀、卵圓形或者不規則形狀分布，且其生長分裂速度較快，呈現病理性核分裂像，腫瘤的間質較少；（2）放射后：在切片的宮頸組織數量明顯減少，剩余的癌細胞僅呈現巣狀分布，間質之間有較為豐富增生的間質結締組織，且間質期間還具有較多數量的間質結締組織，且其白細胞本浸潤。

3 討 論

宮頸癌疾病是一種由于多種因素和不同階段原因形成的一種疾病，其在癌變的過程當中PCNA在對其細胞的形成和增殖具有十分重要的地位。而PCNA是一種只存在于正常增殖細胞和腫瘤細胞內的高度保守的蛋白分子，具有參與DNA復制和DNA修復的功能，其在細胞核中具有兩種形式，一種為可溶性PCNA，另一種為不可溶性PCNA[3]。不可溶性PCNA通常在G0-G1期間無明顯的表達性，而在G1晚期具有高表達性，因為該期間段內S期將會達到高峰，G2-M期則會出現下降，而這些的變化竟與DNA的合成具有一致性，這也使得其成為了細胞增殖狀態評價的一個標準。正常情況下，通過放射治療后會發現其PCNA具有明顯的表達性，即表明放射治療能夠對宮頸癌組織中的癌細胞和間質細胞增殖行為進行表達。本次研究中采用的放射治療能夠有效的降低宮頸癌內PCNA的表達能力，使其PCNA免疫呈現陰性，但是由于通過放射后，間質組織內的PCNA出現高表達，這從一定程度上表明放射治療會影響宮頸癌組織和間質組織，這主要還是由于PCNA的表達和DNA修復具有關聯性。由于PCNA是DHA合成中不可或缺的一種周期蛋白，也是合成G1和S期的一種輔助蛋白，因此其合成與表達與細胞增值狀態具有相關性。在人體細胞中，PCNA可以與多種DNA進行結合，從而參與進行復制與修復。雖然該方式能夠有效的抑制癌細胞，但還是會因為其相似性對間質細胞產生作用。并且從本次研究的數據結果顯示來看，放射治療對宮頸癌細胞具有極高的致死性，同時對宮頸癌細胞的增殖進行有效的抑制性，這也提示我們該治療方式對于治療宮頸癌具有較好的治療效果，我們可以從PCNA表達的變化中觀察出治療的有效性。因此PCNA的不同表達成為檢驗宮頸癌細胞增生的標志，也成為檢驗放射治療是否具有效果的檢驗標準。

綜上所述，放射治療中PCNA的高表達性，往往表示著癌細胞的增殖較快，因此該治療方式在對宮頸癌細胞治療中主要是通過組織的增殖細胞核抗原表達情況來作為效果好壞的評判標準。