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禽白血病檢測診治綜述

2020-12-21 05:01:59姜久華
新農業 2020年13期
關鍵詞:檢測方法

姜久華

(鐵嶺市現代農業服務中心,遼寧 鐵嶺 112000)

禽白血病,又稱為禽白細胞增生病,是一類由禽肉瘤病病毒群和禽白血病病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病的統稱。該病能引起許多種具有傳染性的良性和惡性腫瘤,在自然條件下,主要表現為淋巴細胞性白血病,其次是成紅細胞性白血病、成髓細胞性白血病、骨髓細胞瘤等生長抑制、免疫抑制性疾病。自1868年Rolo報道淋巴肉瘤以來,禽白血病己分布于世界各地。我國1999年首次在江蘇和內蒙古等地肉雞群中發現有髓細胞性白血病。2009年至今,全國各地養禽場(主要為蛋雞場)陸續暴發禽白血病,經查主要為J亞型ALV感染,給養殖業帶來嚴重的生產和經濟損失。

1 形態結構與物理特性

禽白血病病毒(ALV)隸屬于禽反轉錄病毒科α型反轉錄病毒屬,根據ALV囊膜蛋白抗原的結構特征,可分為A、B、C、D、E和J等6個亞型。在電鏡下觀察ALV病毒粒子呈球形,半徑為40~60納米,呈正二十面體對稱分布,有囊膜。在蔗糖中的浮力密度區間為1.15~1.17克/米。對脂溶劑和去污劑敏感,紫外線對ALV影響不大,pH對病毒的保存有一定的影響,pH超出5~9時病毒易被滅活,對溫度非常敏感,50℃8分鐘或60℃30秒即可滅活,-80℃低溫可長時間保存,因此病毒常保存在低溫冰箱或液氮中。

2 化學組成

A L V 成分主要包括30%~35%脂類、60%~65%蛋白質(其中5%~7%為糖蛋白)、2.2%RNA等。禽白血病病毒基因編碼區為gag/pro、pol和env基因。gag/pro基因編碼前體蛋白經過加工以后可以成為基質蛋白p19、衣殼蛋白p27、核衣殼蛋白p12、蛋白酶p15和部分多肽物質。p19作為一種基質蛋白,氨基酸序列高度保守,與病毒出芽之間存在緊密聯系。p27是病毒核心衣殼蛋白的主要成分,有許多易于檢測的病毒抗原位點,是ALV的群特異性抗原。p12是一種堿性蛋白,保守性較高,和基因組RNA相關。p15N端的7個氨基酸組成的區域能夠增加病毒的裝配效率。

3 流行病學

該病自然宿主包括雞、鵪鶉、雉雞、鷓鴣等多種禽類。傳染源為病雞、帶毒雞、感染的種蛋,帶毒雞為本病主要的傳染源。母雞較公雞易感,以4~8月齡發病率最高。一年四季均易感。

4 臨床病變

根據病變形態不同可分為3類,結節型、彌散型和粟粒型。病雞多呈現嗜睡、精神萎靡、厭食、雞冠肉髯蒼白皺縮等癥狀。翅、頸、背部皮膚有出血點。腹部膨大,可觸摸到腫大的肝、腎、法氏囊,生產性能下降、腿部變粗等。剖檢可見灰白色腫瘤和結節狀病灶,肝臟腫大呈彌漫性,法氏囊腫大出血等。

5 檢測診斷

可通過雞胚分離培養或細胞培養等方法進行病毒分離,然后進行實驗室檢測是病毒檢測可靠度最高的方法,但該方法操作復雜,耗時較長。同時結合ELISA法、PCR法、免疫膠體金檢測技術等多種檢測手段相結合才能正常開展病毒檢測工作。ELISA因其簡便快速,敏感性強,適宜大規模篩查等優點,在實際檢測中較為常用。郭艷等針對gp85基因,進行原核表達后作為抗原,建立了ELISA抗體診斷方法。

PCR、RT-PCR、qPCR等分子生物學檢測方法進一步豐富了實驗室的檢測手段。Smith等從pol基因片段中選取引物片段建立了檢測ALV-J的PCR方法。但由于病毒變異等原因,需要時常對引物進行重新設計。

6 免疫與治療

目前,市面還缺少有效的的ALV商用疫苗。Salter等針對樣本開展病毒滅活實驗的過程中發現疫苗的免疫性會喪失。YuC等觀察到,泰山馬尾松花粉多糖與病毒感染源之間的連接切斷以后能夠在短時間內提高機體的免疫力。Wang等研制出的新型ALV-J多變種抗原全價疫苗免疫后42天,抗體滴度可達到1∶64000,可維持126天以上免疫保護期。養殖場一旦發現有ALV陽性家禽,應該立即淘汰凈化。故而,構建科學的防控體系,做好消毒和凈化,防患于未然是防控該病的有效措施。

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