不同加工方法對陜西地區引種五味子木脂素的影響

靳 淼，劉金娜，劉 慧，黑育榮，劉玉蘭

(1.楊凌職業技術學院，陜西 楊凌 712100；2.陜西云嶺生態科技有限公司，陜西 西安 710075)

五味子為常用中藥材，又被稱為“北五味子”，是木蘭科五味子屬植物五味子 Schisandra chinensis ( Turcz．) Baill.的干燥成熟果實。具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心的作用，用于久嗽虛喘、夢遺滑精、遺尿尿頻、久瀉不止、自汗盜汗、津傷口渴、內熱消渴、心悸失眠等癥狀[1]。目前針對五味子化學成分研究表明，其果實中存在多種化學成分，例如木脂素類、有機酸類、揮發油類、黃酮類等，木脂素為五味子中最主要成分，含有量最高[2]，其中的五味子醇甲亦作為藥典中五味子含量的測定依據。

五味子主產地在東北，傳統的產地加工方式主要為曬干，目前有研究表明不同加工方式對五味子質量有所影響[3～4]，但研究對象全部針對東北產五味子。五味子這幾年在陜西南部引種成功，長勢良好，產量高，成為當地特色產業，但對于引種地來說，五味子最適加工方法尚缺乏系統研究。筆者以陜西引種五味子為研究對象，通過測定五味子中木脂素類成分，對五味子的不同干燥方法進行了初步研究，以期為陜產五味子建立規范化加工方法提供依據。

1 材料與儀器

1.1 材料

五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子醇乙、五味子丙素、五味子乙素標品均購自上海源葉生物科技有限公司，批號分別為Y14F10H80840、P13O8S45575、R12O8F45508、P05J9S52197、P28J8F36961、P29J8F38066，純度均大于98%；乙腈、甲醇均為色譜純；水為純凈水(品牌：娃哈哈)。

五味子樣品來自從東北引種到陜西省柞水縣營盤鎮藥材種植基地的五味子“紅珍珠”種苗。

1.2 儀器

液相色譜儀( 美國賽默飛公司；Thermo U3000)；電熱鼓風干燥箱( 北京科偉永興儀器有限公司；101-3型)；電子分析天平( 上海舜宇恒平科學儀器有限公司；FA2004型)；超聲波清洗器( 昆山超聲儀器有限公司；KQ -100DE型；超聲功率600 W，40 kHz)。

2 方法與結果

2.1 加工方法

選擇五味子成熟果實，均勻分為8份，分別進行不同加工處理。具體處理方法見表1。

表1 五味子不同加工方法

2.2 不同加工方法處理后五味子外觀品質對比

不同加工方法處理后的五味子，外觀性狀見表2、圖1。

表2 不同加工方法五味子外觀特征

2.3 木脂素含量測定

2.3.1 色譜條件 WondaCract ODS-2 C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5μm)；流動相是乙腈(A)-水(B)，梯度洗脫：0～18min，A為50%；18～25min，A為50%～65%；25～30min，A為65%～75%；30～40min，A為75%～65%；40～45min，A為65%～50%；45～55min，A為50%。進樣量為20 μL；流速為1.0 mL·min-1；檢測波長218 nm；柱溫30 ℃。

2.3.2 制備供試品溶液 不同處理的五味子打粉，過3號篩，稱取0.5g粉末，記錄重量，將粉末置具塞錐形瓶中，再加40mL甲醇，稱重并記錄。超聲35min，提取結束后放置室溫，稱重，滴加甲醇補足到初始測定重量，搖勻并進行第一次過濾，第一次過濾后濾液再次通過0.45μm微孔濾膜進行第二次過濾，最終得供試品溶液。

2.3.3 制備對照品溶液 精密稱取六種對照品，甲醇溶解，配制成 1.18 mg·mL-1(五味子醇甲)、0.51 mg·mL-1(五味子酯甲)、0.55 mg·mL-1(五味子甲素)、0.933 mg·mL-1(五味子醇乙)、0.46 mg·mL-1(五味子丙素)、0.75 mg ·mL-1五味子乙素)對照品溶液。

2.3.4 線性關系考察 精密量取上述對照品溶液0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1 mL、1.2 mL加入10 mL容量瓶內，甲醇定容后搖勻測定，色譜條件參照“2.3.1”。橫坐標(X)為對照品溶液不同濃度，縱坐標(Y)為所測得峰面積，作標準曲線，進行線性回歸，結果見表3。

表3 五味子中6種木脂素類成分線性關系

2.3.5 精密度試驗 依據上述色譜條件，連續6次測定對照品溶液，比對峰面積并計算RSD值。最終測得RSD均≤1.34%，表明儀器的精密度良好。

2.3.6 重復性試驗 精密稱取6份，每份0.5g的五味子粉末，制備溶液進行分析，制備方法參照“2.3.2”，色譜條件依照“2.3.1”，記錄峰面積，計算6種成分含量，結果表明RSD均≤2.28%，說明此方法重復性良好。

2.3.7 穩定性試驗 吸取上述方法制成的五味子供試品溶液，分別于放置的第0、2、4、8、14、24 h進樣分析檢測，色譜條件依照“2.3.1”，記錄各時間節點所測峰面積，結果各待測組分峰面積RSD均≤1.73%，說明樣品溶液24 h內有良好的穩定性。

2.3.8 加樣回收率試驗 精密稱取每份0.25 g已知含有量五味子樣品5份，加“2.3.3”制備好的對照品溶液，不同對照品加入的量與樣品中該成分含量基本一致。通過對結果的計算，得出加樣回收率為：五味子醇甲98.81%、五味子酯甲102.15%、五味子甲素101.46%、五味子醇乙99.32%、五味子丙素102.48%、五味子乙素102.24%，RSD分別為1.35%、1.52%、2.03%、0.97%、1.08%、0.87%。

2.3.9 樣品測定 取五味子樣品，制備供試品溶液進行分析測定，制備方法依照“2.3.2”，色譜條件依照“2.3.1”，每批樣品重復3次。結果見圖2、表4。

表4 不同加工方法五味子藥材中木脂素類成分含量(n=3)

3 討論

五味子中木脂素類成分含量最高，具有保護心肌損傷、保肝、抗腫瘤等作用[5～8]，且2015版《中國藥典》將五味子醇甲納入藥材評價指標，對五味子醇甲含量有著明確規定，故而選擇木脂素類成分作為不同加工方法的參考指標。從表4可以看到，引種到陜西的五味子經過不同加工方式處理后，五味子醇甲含量最高，且符合藥典0.4%規定。除五味子醇甲外，五味子酯甲、五味子乙素、五味子醇乙含量均較高，五味子丙素含量最少。

不同溫度烘干的五味子六種木脂素類成分隨著烘干溫度增高逐漸增加，在50℃達到峰值后，逐漸降低。曬后稍蒸再陰干較直接曬干、稍蒸后曬干所測木脂素類成分含量均較高，這可能是曬干蒸制中成分發生了改變，具體原因有待進一步研究。

不同加工方法對五味子外觀性狀影響較大，曬干后成品顏色不好，整體干癟；而熱風烘干成品顏色較曬干好。曬干后顏色與東北產地曬干后顏色并不相同[9]，這可能與引種地氣候采收時間有關。引種到陜西的五味子采收時間為8月初陸續采收，而原產地東北五味子采收期大多在9月上中旬[10]。因引種地曬干時環境溫度整體較高，造成曬干后成品性狀較差。

綜合來看熱風50℃烘干木脂素類成分較高，外觀性狀較好，為引種地適宜的干燥方法。