基于液相色譜-質譜聯用的代謝組學技術研究Pokemon誘導的胞內脂代謝變化

金一寶,李上富,王 玨,高 丹,劉紅霞,蔣宇揚,殷 果,王鐵杰*

(1.深圳市藥品檢驗研究院,深圳市藥品質量標準研究重點實驗室,廣東 深圳 518057;2.清華大學深圳研究生院,廣東 深圳 518055)

Pokemon蛋白是由染色體19p13.3區帶ZBTB7A基因編碼的產物,作為一種轉錄抑制因子,能夠通過影響染色質的重組或直接與抑癌基因結合而抑制抑癌基因的轉錄,從而促使腫瘤形成[1,2]。2005年美國癌癥研究中心[3]提出Pokemon的調控機制可能是通過Pokemon-ARF(alternative reading frame)-MDM2(murine double minute2)-P53細胞信號傳導通路。Zu等[4]繪制了Pokemon介導的基因調控網絡,發現Pokemon的調控作用主要分布在代謝、基因轉錄調控和細胞信號轉導等生命活動中,其中有74個基因與機體代謝有關,涉及44條代謝途徑。但Pokemon在腫瘤基因調控代謝網絡中所起作用還不是十分清晰,需要進一步的研究。

代謝組學是近年來新的研究技術手段,是繼基因組學、轉錄組學、蛋白質組學后系統生物學的另一重要研究領域,主要研究生命體在受外界或自身改變的情況下小分子代謝物的變化[5,6]。代謝物處于基因組和蛋白質組的下游,通過研究代謝物的變化,反推基因和酶的調控過程。代謝組學作為一種新的組學方法在疾病機制研究方面具有廣闊的應用前景[7]。目前,代謝組學已在腫瘤發病機理、腫瘤標志物鑒定、疾病診斷、動物模型、藥物毒性和機理研究、基因功能的闡明等方面取得了突破和進展[8-12]。

本文利用代謝組學技術,比較了肝細胞HL7702瞬時轉染Pokemon基因所獲得的高表達細胞與對照組細胞的代謝途徑和代謝物質的變化,獲得了Pokemon介導的肝癌細胞代謝差異,探討肝細胞中Pokemon引發的小分子代謝物、酶和調控基因之間的相互關系,研究Pokemon作為原癌基因在肝癌發生發展中的作用機制和功能?！?br>