化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測受血者梅毒螺旋體特異性抗體的結果

劉彬，高克仁

（中國人民解放軍32280 部隊，四川 樂山 614100）

0 引言

我國的臨床用血主要來自于社會公民的自愿受血，受血者血液質量的保證是臨床安全用血的前提；隨著性意識的開放，梅毒的感染率逐漸升高，且在感染初期患者可無任何不適，此時可產(chǎn)生受血行為，梅毒感染是醫(yī)院進行血液質量篩查時報廢血液的最重要原因之一，不僅造成受血者的血液浪費，還降低了臨床用血的安全系數(shù)[1]；輸血感染是臨床較為嚴重的醫(yī)療事故。輸血前對患者進行感染指標檢測，明確受血者感染狀況，為臨床治療方案提供準確信息，同時也為輸血感染的原因提供準確數(shù)據(jù)，降低醫(yī)療糾紛的發(fā)生[2-3]。對于受血者而言，是后續(xù)輸血治療安全進行的前提。既往醫(yī)院對梅毒的判斷主要依靠梅毒USR、RPR、TPHA 試驗，但以上項目均為梅毒的非特異性抗體，后增加了梅毒螺旋體特異性抗體的檢測[4]。醫(yī)院常規(guī)應用酶聯(lián)免疫吸附試驗進行梅毒螺旋體特異性抗體的檢測，但是仍存在一定的漏檢病例，有學者[5]提出可應用化學發(fā)光免疫分析技術進行梅毒螺旋體特異性抗體的檢測，對于弱陽性的抗體亦能明確檢出。本文旨在比較化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料。在我院于2018 年1 月至2019 年1 月接受的110 例受血者血液樣本為觀察對象，受血者年齡19-50 歲，平均（35.63±3.32）歲，均仔細閱讀了受血注意事項，并簽字確認。

1.2 方法。將血液樣本先后進行化學發(fā)光法檢測及酶聯(lián)免疫吸附試驗，最終均經(jīng)過蒼白密螺旋體顆粒凝集實驗（TPPA）確診。選擇全自動化學發(fā)光微粒子免疫分析儀，儀器廠家提供的診斷試劑，進行化學發(fā)光法檢測。選擇全自動酶聯(lián)免疫處理系統(tǒng)及相應的梅毒抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑進行酶聯(lián)免疫吸附試驗。嚴格遵照說明書進行檢測，參與檢測的檢驗人員具有統(tǒng)一性。

1.3 觀察指標。以TPPA 檢驗結果為“金標準”，觀察化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出效能，并進行兩者間效能的比較。效能指標包括敏感度、特異度及準確度。敏感度計算方式為真陽性例數(shù)/（真陽性+假陰性）例數(shù)×100%；特異度計算公式：真陰性例數(shù)/（真陰性+假陰性）例數(shù)×100%；準確度計算方法：（真陽性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學處理。應用SPSS 22.0 軟件為本研究的計算工具，用百分比表示計數(shù)資料，進行χ2檢驗。檢驗結果：P＜0.05，表示正在比較的項目有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 觀察不同檢驗方法對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出效能。對110 份的受血者血液以TPPA 確診，確診梅毒者30例，即疾病陽性30 例，陰性80 例?；瘜W發(fā)光法對梅毒螺旋體特異性抗體陽性診斷例數(shù)31 例，陰性79 例，符合確診的例數(shù)為29 例，漏診1 例，誤診2 例，對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出敏感度為96.67%，特異度為97.50%，準確性為97.27%。酶聯(lián)免疫吸附試驗對梅毒螺旋體陽性診斷例數(shù)28 例，陰性84 例，符合確診的例數(shù)為24 例，漏診6 例，誤診4 例，對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出敏感度為80.00%，特異度為95.00%，準確性為90.91%。

2.2 比較化學發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗的檢驗效能。酶聯(lián)免疫吸附試驗法對梅毒螺旋體特異性抗體的檢驗敏感度、準確性、特異度分別為80.00%（24/30）、90.91%（100/110）、95.00%（76/80）?；瘜W發(fā)光法對梅毒螺旋體特異性抗體的檢驗敏感度、準確性、特異度分別為96.67%（29/30）、97.27%（107/110）、97.50%（78/80）。兩種檢驗方式對梅毒螺旋體特異性抗體的檢出特異度相差不大，對比結果不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。酶聯(lián)免疫吸附試驗法對梅毒螺旋體特異性抗體的檢驗敏感度、準確性均低于化學發(fā)光法對梅毒螺旋體特異性抗體檢驗的對應數(shù)值，結果有明顯的統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3 討論

酶聯(lián)免疫吸附實驗是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體的表面，使被酶標記的抗原抗體反應在固相表面，因其檢測靈敏、快速、穩(wěn)定，可進行大分子抗原、特異性抗體等的檢測，不僅適用于臨床，還適用于大批量的樣本檢測[6]。在酶聯(lián)免疫吸附試驗中，酶有很高的催化頻率，能將反應效果極大的放大，進而提高了此檢驗方法的敏感度，因此醫(yī)院檢驗科將酶聯(lián)免疫吸附試驗作為梅毒特異性抗體檢測的規(guī)定項目。但是在酶聯(lián)免疫吸附試驗的臨床操作中，較易受到干擾，出現(xiàn)假陽性，因此對于檢測陽性樣本須得再次行TPPA 法驗證[7]。且在進行酶聯(lián)免疫吸附實驗時，手工操作步驟較多，過程復雜，耗時較長。

化學發(fā)光法是在酶免疫、放射免疫、熒光免疫等方法后出現(xiàn)的新免疫測定技術，利用反應分子吸收物質在化學反應時產(chǎn)生的化學能，使得反應分子自基態(tài)升至激發(fā)態(tài)，進而使得其吸收的化學能憑借光的形式進行輻射[8]，在檢測過程中，無需外來光源輔助，避免了光散射，極大程度上避免了噪音信號干擾，線性動態(tài)范圍擴大，檢測靈敏度得到保證與提高[9]。需要的儀器簡單，檢測過程基本實現(xiàn)了自動化，降低了人為干擾因素[10]。同時化學發(fā)光是近年來研究較多的用于梅毒異性抗體檢驗的一種方法。因其采用自動化儀器檢測，消除了人為操作的系統(tǒng)誤差，且適合于臨床大樣本量的檢測，完全可以滿足醫(yī)院輸血人員的大量樣本檢測。

本文中，在化學發(fā)光法下進行梅毒螺旋體特異性抗體檢測，其檢測敏感度、準確性分別達到96.67%、97.27%，明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測效果。表明了對于受血者血液樣本的梅毒螺旋體特異性抗體采用化學發(fā)光法測定，對梅毒的判斷準確性、敏感性更高。

綜上所述，相較于酶聯(lián)免疫吸附試驗而言，采用化學發(fā)光法進行梅毒螺旋體特異性抗體檢測的效能更佳，能提高對梅毒的檢出概率，保證臨床用血安全。