王翔宇
(蘭考縣畜牧局,河南蘭考 475300)
膠體金免疫層析技術結合了酶聯免疫吸附試驗、膠體金技術、單克隆抗體技術以及免疫層析技術等各種技術,具備敏感與快速的優勢。膠體金免疫層析技術利用膠體金的顯色特點,結合免疫層析技術來獲得檢測結果,利用膠體金當做標記物,結合待測物獲得配體捕獲實現顯色,從而實現快速的檢測。
膠體金免疫層析技術主要是把膠體金標記技術、免疫檢測技術、蛋白層析技術等多項技術結合。利用硝酸纖維素膜當做固相載體,樣品溶液利用毛細作用原理處于層析條當中泳動。并且,樣品當中待測物品和層析材料當中針對待測物的抗原形成高特異性、高親和性的免疫反應,在層析的過程當中免疫復合物會被富集以及截留于層析材料當中的檢測帶,經由膠體金顆粒于短時間內實現聚集進而獲得直觀的實驗結果,游離標記物會越過檢測帶,實現與標記物之間自動化的分離。膠體金免疫層析技術主要利用了膠體金所具備的顯色特點,基于免疫層析技術進而完成相應的檢測操作,層析的過程中利用膠體金標記物,標記物和待測物的絡合物會被配體實現捕獲進而濃集顯色,利用纖維膜中顯色帶來快速檢測。因無需把結合標記物和游離標記物之間分離,所以省略了加樣與洗滌等各個步驟。膠體金免疫層析技術的特點是操作簡便快捷,對操作人員的專業技術要求較低,不用特殊的儀器設備,檢測結果直觀明了、便于保存,在現場的快速檢測中十分適用。在動物病毒、細菌以及寄生蟲等獸醫病原學檢測與臨床診斷當中應用廣泛。膠體金免疫層析技術是現階段獸醫動物疫病臨床診斷中最簡單且快速、特異的一項免疫學檢測技術[1]。
動物細菌性疫病的檢驗中,膠體金免疫層析技術屬于關鍵性技術。近年來,臨床診斷領域逐步研究并且投入使用了細菌性疾病膠體金診斷試紙。臨床診斷當中,部分基層地區的獸醫也大量使用膠體金免疫層析技術。如王友華闡述了在獸醫領域中膠體金免疫層析技術的應用原理,促使膠體金免疫層析技術應用獸醫領域得到全面發展[2]。目前,膠體金免疫層析技術已經變成了初篩的一種試驗,針對人工污染樣品進行實驗的時候,適用性非常的強,具備極高的推廣性與應用性。
在動物病毒性疫病的診斷過程中,廣泛應用了膠體金免疫層析技術。目前為止,在犬細小病毒病、狂犬病、傳染性支氣管炎病、口蹄疫以及豬繁殖與呼吸綜合征等各類疫病當中,都研制了針對性的膠體金診斷試紙,并且還具備一定的技術保障,推動了現代化動物疫病預防與監測工作的進一步發展。例如利用膠體金免疫層析技術來進行狂犬病毒抗原的特異性反應,針對48份有可能患有狂犬病的犬唾液樣品進行檢驗,能夠獲得88%左右的符合率。這就能夠看出,在野外環境中對于唾液以及動物大腦內狂犬病毒抗原進行檢測時,膠體金免疫層析診斷試紙非常適用。
目前已知的人畜共患病中有相當一部分是寄生蟲病,因此進行畜禽寄生蟲病的正確診斷,具有突出的公共衛生學意義。目前的旋毛蟲病以及豬囊蟲病等多種疫病的相應膠體金檢測試紙廣泛地應用于臨床檢測當中。例如利用膠體金試紙來進行家畜血腫內抗血吸蟲抗體的檢測。利用膠體金快速試紙來進行弓形蟲抗體與動物弓形蟲病血清抗體的檢測。通過研究表明,膠體金試紙具備極高的敏感度。相比于弓形蟲的IHA診斷試劑而言,前者的結果能夠早兩天獲得。目前,牛新孢子蟲病診斷中利用膠體金免疫層析技術,具備極為突出的臨床使用價值,非常適用于基層地區的獸醫工作[3]。
膠體金免疫層析技術所具備的簡便、快速、敏感以及特異等優勢,使其在獸醫臨床的快速檢測以及現場診斷當中得到了廣泛的應用,膠體金免疫層析技術的發展潛力非常巨大,且具備廣闊的應用前景。就現階段的實際情況而言,膠體金免疫層析技術成為了眾多領域當中的研究熱點。針對膠體金免疫層析技術的相關研究在不斷地深入,與此同時,膠體金免疫層析技術的檢測范圍同樣在不斷地擴展,其中涉及了病原體、激素、毒品、藥物以及重金屬等眾多方面。但是,就目前的膠體金免疫層析技術而言,依舊存在一定的不足之處,例如檢測時靈敏度還需要進一步的提高。隨著膠體金免疫層析技術在臨床醫學中的廣泛應用,必須不斷地提升膠體金免疫層析試驗的整體敏感性與特異性,讓其能夠完成多元檢測、定量與半定量檢測等,這也是膠體金免疫層析技術未來的發展方向。膠體金免疫層析技術提供給動物疫病診斷技術以全新的模式,促進了動物疫病診斷領域的進一步發展。隨著全新標記物以及制備方法的研制與使用,標記技術不斷地成熟,還有單克隆抗體技術以及分子生物學技術等被廣泛的應用,會進一步的拓寬膠體金免疫層析技術的應用范圍與價值。
綜上所述,膠體金免疫層析技術在臨床當中廣泛應用,其特異性與敏感性仍需進一步的提高,進而實現定量、半定量與多元檢測。利用膠體金免疫層析技術能夠實現病毒的快速準確的檢測,為動物疫病預防與治療提供幫助,促進我國基層獸醫領域的進一步發展,為我國畜牧養殖業的可持續發展奠定了堅實的物質條件。