膠原凝膠性質影響因素的研究進展

趙改名 茹昂 張桂艷 田瑋 祝超智 賈玉堂

摘 要：為解決畜禽及魚類副產物利用率不高以及膠原凝膠類食品品類單一的問題，本文介紹膠原的概念、來源和結構，簡述膠原的凝膠性質，綜述膠原濃度、膠原溶液pH值、加熱溫度等環境因素對膠原凝膠性質的影響和γ-聚谷氨酸、卡拉膠、天然植物多元酚、醇類、鹽、谷氨酰胺轉氨酶和聚丙烯酸鈉7 種添加物對膠原凝膠性質改良的研究進展，指出目前膠原凝膠研究的不足之處和未來研究的可能方向，旨在為利用此類副產物進行膠原凝膠類食品研發以及更好地將膠原凝膠應用于食品工業等領域提供思路和依據。

關鍵詞：膠原;凝膠性質;性質改良

Abstract： Considering that by-products of livestock， poultry and fish have low utilization rate and low added value and there are monotonous collagen gel foods available in the market， this article outlines the concept， source and structure of collagen， summarizes the influence of environmental factors such as collagen concentration， pH value， and heating temperature on the gel properties of collagen， and reviews the current progress in applying seven additives such as γ-polyglutamic acid， carrageenan， natural plant polyphenols， alcohols， salts， glutamine transaminase and sodium polyacrylate to improve the gel properties of collagen. This article points out the shortcomings of the current studies on collagen gels and possible future research directions， in order to provide ideas and evidence for the development of collagen gel foods from livestock， poultry and fish by-products and for improved application of collagen gels in the food industry and other fields.

Keywords： collagen; gel properties; properties improvement

DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20200703-167

中圖分類號：TS251.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標志碼：A 文章編號：1001-8123（2020）10-0070-06

膠原是動物體內含量最多、分布最廣的蛋白質，是肉中一種重要蛋白質，也是動物結締組織的主要成分。膠原含有一個或幾個由α-鏈組成的三螺旋結構，是結構上既有共同點又有差異的蛋白質的統稱[1]，人們根據膠原中3 段肽鏈組成的不同及發現的先后順序，定義了20多種不同類型的膠原[2-3]。膠原三肽結構中重復性含有豐富的甘氨酸、脯氨酸及羥脯氨酸（甘氨酸-脯氨酸-Y和甘氨酸-X-羥脯氨酸，其中X、Y可以是任何氨基酸）。一般蛋白質含有20 種氨基酸，膠原含有18 種氨基酸，主要是甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸，其中羥脯氨酸是膠原的特征氨基酸[4]，不同動物來源的膠原所含羥脯氨酸含量不同，且羥脯氨酸含量會直接影響膠原的三螺旋空間結構穩定性[5]。膠原是動物體含量最高的蛋白質，約占動物體總蛋白含量的30%[6]，其來源廣泛，畜禽副產物（皮、骨及筋腱等）及魚類副產物（骨、魚皮及魚鱗等）中含量較高，但目前在畜禽加工及魚類加工中，副產物的利用率并不高[7-8]，造成資源的極大浪費。為避免此類副產物的浪費并且實現高價值化利用，可利用膠原的凝膠特性生產膠原食品，以提高副產物附加值。本文介紹膠原及膠原凝膠性質，綜述環境因素對膠原凝膠特性的影響及現階段在改良膠原凝膠性質方面較為重要的幾種添加物的研究情況，初步總結了膠原凝膠特性改良的研究進展。

1 膠原的凝膠性質及膠原凝膠影響因素

膠原是高分子化合物，其分子表面有許多極性側基，如氨基、羧基、羥基和酰胺基等，都可以與水分子以氫鍵結合，水在膠原分子表面形成水膜，使膠原膨脹，提高溫度可使膠原分子變性伸展，隨后有規律地排列形成三維網狀結構，可以固定大量的水，形成凝膠[4，9]。

對膠原本身而言，除羥脯氨酸外，如果膠原組成中含有較多的α1亞基[10]或較少的疏水性氨基酸[11]，此類膠原便可形成穩定、致密的凝膠。除膠原自身因素外，不同環境條件及添加物均會影響膠原的凝膠性質。目前膠原在食品領域的應用主要是膠原食品、功能保健品和食品添加劑，其來源廣泛，營養價值高，且具有良好的生物相容性、低免疫原性和保健功能。膠原的凝膠性質可應用于膠原凝膠軟糖、膠原果凍和肉凍類等產品的開發。但是單純的天然膠原易生物降解，且存在熱穩定性差、水溶性不良、流動性不好和凝膠強度不佳等缺點，使其應用受到一定的限制[12]。因此，本文對影響膠原凝膠性質的環境因素和改良膠原凝膠性質的外源添加物相關研究進展進行總結，使其可以更好應用于膠原凝膠食品研發和生產中。

2 環境條件對膠原凝膠性質的影響

2.1 膠原質量濃度對膠原凝膠性質的影響

膠原溶液黏彈性與膠原質量濃度有關，隨著膠原質量濃度的增加，膠原溶液的彈性模量（G）和黏性模量（G）也會隨之增加，但G增加更為迅速并最終出現G和G曲線的交匯，交匯點的膠原質量濃度即為膠原從溶膠向凝膠轉變的臨界點質量濃度[13]。1950年，已有學者經大量實驗發現膠原的凝膠強度幾乎與膠原質量濃度的平方成正比[14]。國內學者的實驗研究也印證了這一觀點。張聯英[15]以鳙魚、鱸魚和鯽魚的魚皮為原料提取膠原，結果表明，膠原質量濃度1～3 g/100 mL時，形成的凝膠強度與膠原質量濃度呈正相關。刁雪洋[16]研究豬皮膠原凝膠時也有相似發現，膠原質量濃度3.0～12.5 g/100 mL時，膠原凝膠強度隨膠原質量濃度上升而增強，且當膠原質量濃度達到12.5 g/100 mL后，凝膠強度達到495.9 g/cm2，上升趨勢減弱。這可能是由于隨著膠原質量濃度的增加，膠原疏水作用增強，膠原之間更易交聯，更容易進一步形成聚集體，膠原溶液分子內和分子間的氫鍵作用增強，更易與水結合形成凝膠。

2.2 膠原溶液pH值對膠原凝膠性質的影響

有學者研究認為，pH值通過影響極性殘基和非極性殘基的平衡對熱致膠凝反應產生顯著影響[17]。當膠原溶液pH值在等電點附近，膠原多聚體對外顯示中性，可形成強度更高的凝膠[15]，當溶液pH值偏離等電點，凝膠保水性會有所增加[18]，但凝膠強度有所下降。膠原的來源及提取方式不同，導致其分子中極性基團與非極性基團數量及比例不同，等電點也有所不同[19-22]。張聯英[15]以鳙魚、鱸魚和鯽魚魚皮膠原為原料，研究發現，所制得凝膠在pH 6時凝膠強度最大。王艷[23]以草魚魚鱗膠原為原料，研究發現，所制得凝膠在越接近中性pH值處硬度越高。曾名勇等[24]以鳙魚、鱸魚和鯽魚魚皮膠原為原料，研究發現，所制得凝膠在pH 6.5時凝膠強度最大。可見制備強度較高凝膠的最適pH值不同。

2.3 加熱對膠原凝膠性質的影響

當溶液溫度較低時，膠原分子依靠其三螺旋結構可發生自聚集行為[25]，可呈凝膠態，升溫可使膠原分子間氫鍵作用減弱，疏水相互作用明顯增強，使分子聚集成球狀[26]，繼續升溫可使膠原溶液處于非凝膠態，此時再經冷卻之后形成的膠原凝膠網絡結構會更加有序，凝膠品質也有所提高。當溫度超過變性溫度，溶液中膠原分子三螺旋結構發生松散，繼續升溫會使三螺旋結構變得松散，甚至被完全破壞[27-28]，生成明膠凝膠。從整體升溫過程來說，升溫可使所形成的凝膠強度先升高后降低[29-30]。從改善膠原凝膠性質方面來說，當加熱溫度低于其變性溫度，降溫冷卻會使膠原分子發生有效重排，形成更有序的凝膠結構，有助于提高膠原凝膠品質[13]。

不同膠原根據其來源和提取方法等的不同，變性溫度會有所不同，一般情況下畜禽膠原的變性溫度在40 ℃左右[16，31-33]，魚皮及魚鱗膠原的變性溫度在30 ℃左右[15，34-36]，也有研究發現以牛骨為原料提取的膠原，其變性溫度可達70.3 ℃[37]，所以在相同溫度下，不同膠原所形成的凝膠強度不盡相同。

2.4 凝膠形成時間對膠原凝膠性質的影響

凝膠形成時間可影響膠原凝膠的形成。張聯英[15]發現，膠原凝膠強度也與凝膠形成時間有關，在凝膠形成的前4 h內，隨著時間的延長，凝膠強度逐漸增大，當凝膠形成時間超過18 h后，凝膠強度不再隨形成時間變化而明顯變化。焦坤[38]也有類似發現，在凝膠形成的前8 h內，羊肩胛軟骨Ⅱ型膠原的凝膠強度隨時間的延長增幅較大，8～12 h后增幅逐漸變緩，16 h之后趨于穩定。可見膠原凝膠強度會隨凝膠形成時間的延長而逐漸增強，達到最高點后隨時間延長凝膠強度不再增強并趨于穩定。原因可能是隨時間延長膠原分子肽鏈之間的交聯程度增加，或者殘基之間形成了新的交聯，使得多個肽鏈之間由無序變得有序，從而使凝膠強度增加，之后由于膠原分子基本處于穩定狀態，凝膠強度不再增加。

3 不同添加物對膠原凝膠的影響

添加物可作為改性劑與膠原發生交聯、接枝或對其側鏈進行修飾等，對膠原進行改性，以提高膠原的水溶性、膠原纖維強度，以及改善膠原的凝膠強度和熱穩定性等[39]。常見的添加物包括γ-聚谷氨酸、谷氨酰胺轉氨酶和鹽類等。

3.1 γ-聚谷氨酸

γ-聚谷氨酸能夠影響膠原纖維的致密度，可作為膳食纖維、食品增稠劑應用于食品生產中[40]，也可以通過促進唾液分泌來刺激味覺、改善口感、增進食欲，并可以結合食物中的鞣質，去除澀味，是一種很好的食品矯味劑，也有延緩食品變質的作用[41]。閆鳴艷等[42]研究發現，當γ-聚谷氨酸添加量為膠原含量的80%時，膠原凝膠網絡致密度表現出增加趨勢，當添加量進一步增加到100%時，網絡致密度顯著下降，相對應的膠原凝膠強度也表現出先增加后減弱的趨勢。但γ-聚谷氨酸并不能顯著提高膠原凝膠的耐酶性和熱穩定性。目前γ-聚谷氨酸對膠原凝膠性質影響方面的研究較少，是未來的一個研究方向。

3.2 谷氨酰胺轉氨酶

酶法交聯原理是蛋白質酶催化蛋白質形成分子內或分子間交聯，從而改善蛋白質的功能特性[43]。目前用于蛋白質酶法交聯的酶主要包括谷氨酰胺轉氨酶、過氧化酶及多酚氧化酶等[44]。2005年，Chau等[45]證明谷氨酰胺轉氨酶可以作為Ⅰ型膠原的交聯劑，后來有學者研究發現，在凝膠化過程中，由于膠原三螺旋結構的破壞，水分子得以進入膠原三螺旋結構中形成溶液，為谷氨酰胺轉氨酶交聯提供交聯位點[46-47]。到目前為止，谷氨酰胺轉氨酶在改良膠原凝膠性質中研究較多。

谷氨酰胺轉氨酶可以有效提高膠原溶液的黏度[48]，有助于提高膠原膜的機械強度[49-50]，也有助于膠原凝膠的形成與穩定。

Fortunati等[51]對比天然膠原凝膠和谷氨酰胺轉氨酶交聯Ⅰ型膠原凝膠的剪切模量和黏性模量，結果表明，交聯凝膠的剪切模量最大為1.6 kPa，相比之下，天然膠原最大剪切模量為1 kPa，表明交聯可以得到硬度更高的凝膠。Zhao Leilei等[52]以類人膠原為原材料，研究谷氨酰胺轉氨酶對膠原水凝膠膠凝時間、吸水性、凝膠強度和凝膠結構的影響，結果表明，在酶活力20～60 U/g范圍內，谷氨酰胺轉氨酶可縮短膠原膠凝時間，提高其吸水性，增強凝膠強度，使凝膠結構變得致密有序。黃雨琳等[53]發現，當谷氨酰胺轉氨酶活力達到0.04 U/mL時，改性后膠原凝膠的性能最優，經紅外光譜分析發現，改性后的凝膠膠原三螺旋結構未被破壞，且與未改性膠原相比，改性后的膠原耐熱分解能力、抗體外酶降解能力、凝膠強度及吸水膨脹率提高，熱變性溫度略有增加。

3.3 卡拉膠

卡拉膠作為一種增稠劑和膠凝劑已廣泛應用于食品工業[54]，且卡拉膠在膠原食品研發中已有較多應用[55-58]，卡拉膠添加量0.0%～0.4%時，膠原產品感官評分與卡拉膠添加量呈正相關[55]。目前有關卡拉膠對膠原凝膠性質影響的報道較少，但卡拉膠對明膠凝膠體系凝膠特性的研究比較深入，可為其在改良膠原凝膠特性研究方面提供參考。例如，關于明膠與卡拉膠交互作用機理有學者推測：當卡拉膠與明膠混合后，除氫鍵、疏水相互作用、范德華力、靜電相互作用之外，還可能有2 種作用機理，一種為當體系pH值低于明膠等電點時，明膠帶正電荷，這時明膠分子可與卡拉膠分子上的硫酸基發生靜電相互作用，形成靜電絡合體，并形成網絡結構;另一種是在體系pH值大于明膠等電點時，雖然明膠帶負電荷，但從局部某一段分子來看，仍有正電荷的存在，因此明膠與卡拉膠的鏈段之間可通過局部靜電相互作用相互搭結形成一定的網絡結構[59]。且有研究證明，明膠凝膠網絡結構和凝膠強度隨體系中卡拉膠添加量增加而增加[60-62]。

3.4 天然植物多元酚

天然植物多元酚可作為抗氧化劑和防腐劑應用在肉制品中[63]，多元酚由于分子中羥基含量較高，可與膠原發生氫鍵交聯，對膠原進行化學改性[39]。花青素有助于提高膠原的機械性能和熱變性溫度[64-65]。但目前花青素對膠原凝膠特性影響的研究也較少，僅有部分學者發現，低添加量原花青素有助于明膠凝膠的形成，高添加量原花青素可與明膠形成沉淀，其可能原因是低添加量原花青素與明膠可形成具有多分枝網狀結構的水凝膠，但該凝膠體系熱穩定性較差，其結合力較弱，高添加量原花青素與明膠之間形成氫鍵，故原花青素-明膠沉淀的熱穩定性較明膠有很大提高[66]。這部分研究可為花青素等天然植物多元酚在膠原凝膠中的研究與應用提供參考。

3.5 醇類

醇類，如丙三醇可以結合到膠原分子表面，與膠原競爭水分子，促進膠原分子聚集體溶解，穩定膠原分子，提高其變性溫度[67]。Li Jiheng[68]、楊維[69]、劉文濤[70]等也有相似的結論，醇類可以提高膠原的熱穩定性和膠原溶液黏彈性。添加醇類對膠原凝膠強度的影響總體呈先下降后增高的趨勢。在低添加量下（一般為6%）凝膠強度會下降，而隨著添加量繼續增大，膠原凝膠強度會有所上升，其中當醇類添加量大于10%后，膠原凝膠強度較未添加醇類時有所上升[71-72]。原因可能是剛開始添加醇類時，醇類會提升膠原的熱穩定性，使膠原分子無法充分展開，膠原分子間的交聯程度較低，故凝膠強度會有所下降[73]，隨著添加量的增大，醇類中的羥基會與膠原分子形成氫鍵，從而提升膠原凝膠強度[74]。

3.6 鹽

鹽的種類繁多，對膠原凝膠性質的影響也有所不同，有些鹽可促進膠原凝膠的形成，提高膠原凝膠強度，而有些鹽卻會產生相反的影響，且同一種鹽在不同濃度下對膠原凝膠的影響也是不同的。

不同陽離子對膠原分子的聚集性和溶解度有不同影響。膠原發生自聚集后溶解度降低，較難形成凝膠，且凝膠強度降低。邢建宇等[75]研究發現，不同金屬離子對膠原自聚集作用影響不同，影響能力大小為Cu2+>Fe3+>Zn2+>K+。王志煒[76]研究K+、Na+、Mg2+和Ca2+ 4 種陽離子基團在膠原自聚集過程中的特殊離子效應，結果發現，K+會降低膠原的溶解度，而Na+和Mg2+會提高膠原的溶解度，在中低濃度的Ca2+溶液中，膠原溶解度較大。除了對膠原溶解度的影響外，一些金屬陽離子還可提高膠原的熱穩定性[77]和抗氧化活性[78]。目前，關于膠原與陰離子相互作用的研究較少。Collins[79]發現，對水合能力較強的陰離子，如硫酸鹽、磷酸鹽主要與蛋白質通過中間水分子產生間接相互作用，且高濃度強水合陰離子可使蛋白質結構穩定。在鹽溶液離子濃度較高時，膠原自聚集結構受陰離子影響明顯，例如高濃度的SO42-會促使膠原分子凝集穩定，對膠原自聚集影響較強，而CH3COO-對于膠原蛋白自聚集結構的影響較弱[80]。

高金龍[81]的研究結果與此相符，他發現與未添加CaCl2、MgSO4的膠原溶液相比，CaCl2和MgSO4的添加會使膠原凝膠強度下降。

鹽與膠原分子間的作用主要是靜電相互作用，靜電相互作用可調節膠原構象，隨著離子強度增強，膠原熱穩定性會有所提高[82]，且膠原熱變性溫度也會呈先降低后增高的趨勢[83]。鹽的添加也會使膠原凝膠強度發生改變，例如NaCl添加量0%～1%時，在NaCl添加量0.5%條件下，膠原蛋白凝膠強度最高，而在NaCl添加量1%條件下，由于鹽離子可以直接破壞膠原溶液中的水合鍵和氫鍵，改變凝膠形成區域周圍水的狀態，破壞膠原交聯部位的穩定性，從而導致膠原溶液凝膠強度降低[29-30，38]。

3.7 聚丙烯酸鈉

聚丙烯酸鈉是我國批準使用的食品添加劑，可用作增塑劑、乳化劑、賦形劑及膨化劑等。聚丙烯酸鈉是一類帶有陰性電荷的電解質，而膠原蛋白在酸性條件下帶有正電荷[84]，因此在一定條件下，聚丙烯酸鈉與膠原分子之間可以產生靜電相互作用，但是目前聚丙烯酸鈉在膠原凝膠方面的研究很少，其改善肌原纖維蛋白凝膠特性方面有一些研究[85-86]。王亞斌[87]研究發現，在制備膠原膜時加入聚丙烯酸鈉，復合膜的拉伸強度逐漸增大，最高達到純膠原膜的1.49 倍，且復合膜降解溫度提高、膜更致密。這說明聚丙烯酸鈉可以使膠原形成更緊密的結構，可能有助于提高膠原凝膠的強度及穩定性。

4 結 語

現階段畜禽、魚類副產物用于膠原凝膠類食品研發有望成為未來食品企業研發的一個新方向。但當前對膠原凝膠的研究仍有不足，有以下問題待解決：部分食品添加劑（如卡拉膠和γ-聚谷氨酸）在膠原類食品研發及生產中有所應用，但其改良膠原凝膠特性機理方面的研究很少;部分添加物（如聚丙烯酸鈉和酚類）在膠原性質改良方面有所研究，但并未應用于膠原凝膠產品的研發及膠原凝膠性質改良研究。因此以上幾類添加物對膠原凝膠性質改良的機理研究可作為未來的研究方向。

參考文獻：

[1] RAMACHANDRAN G N， KARTHA G. Structure of collagen[J]. Nature， 1955， 176： 593-595. DOI：10.1038/176593a0.

[2] 李八方. 水生生物膠原蛋白理論與應用[M]. 北京： 化學工業出版社， 2015.

[3] LI Peng， WU Guoyao. Roles of dietary glycine， proline， and hydroxyproline in collagen synthesis and animal growth[J]. Amino Acids， 2018， 50（1）： 29-38. DOI：10.1007/s00726-017-2490-6.

[4] 蔣挺大. 膠原與膠原蛋白[M]. 北京： 化工出版社， 2006.

[5] SITTHIPONG N， SOOTTAWAT B， HIDEKI K， et al. Type I collagen from the skin of ornate threadfin bream （Nemipterus herodom）： characteristics and effect of pepsin hydrolysis[J]. Food Chemistry， 2011， 125（2）： 500-507. DOI：10.1016/j.foodchem.2010.09.040.

[6] 周倩， 羅志剛， 何小維. 膠原蛋白的應用研究[J]. 現代食品科技， 2008， 24（3）： 285-289. DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2008.03.029.

[7] 彭靜， 李思圖， 梁雨軒， 等. 淺述畜禽骨副產物開發肉味調味基料的賦香工藝[J]. 肉類工業， 2020（1）： 49-53. DOI：10.3969/j.issn.1008-5467.2020.01.011.

[8] 蔡路昀， 馬帥， 張賓， 等. 魚類加工副產物的研究進展及應用前景[J].?食品與發酵科技， 2016， 52（5）： 108-113. DOI：10.3969/j.issn.1674-506X.2016.05-024.

[9] 胡坤， 方少瑛， 王秀霞， 等. 蛋白質凝膠機理的研究進展[J].?食品工業科技， 2006， 27（6）： 202-205. DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2006.06.066.

[10] PENG Bixian. A microgelometer study of physicomechanical properties of collagen fragments[J]. Journal of Imaging Science and Technology， 1992， 36（6）： 544-549.

[11] GUDMUNDSSON M， HAFSTEINSSON H. Gelatin from cod skins as affected by chemical treatments[J]. Food Science， 1997， 62： 37-39. DOI：10.1111/j.1365-2621.1997.tb04363.x.

[12] 閆婷婷， 鄭學晶， 劉捷， 等. 膠原大分子自組裝研究進展[J]. 高分子通報， 2016（8）： 18-28. DOI：10.14028/j.cnki.1003-3726.2016.08.003.

[13] 汪海波， 汪海嬰， 梁艷萍， 等. 草魚魚鱗膠原蛋白的凝膠性能研究[J]. 功能材料， 2012， 43（4）： 433-437; 441. DOI：10.3321/j.issn：1002-6630.2009.23.030.

[14] SAWYER W M， FERRY J D. Mechanical properties of substances of high molecular weight. VII. Rigidities of polyvinyl acetate solutions in various solvents[J]. Journal of the American Chemical Society， 1950， 72（11）： 5030-5034. DOI：10.1021/ja01167a057.

[15] 張聯英. 幾種主要淡水魚膠原蛋白的制備及其特性研究[D]. 青島： 中國海洋大學， 2004. DOI：10.7666/d.y647258.

[16] 刁雪洋. 豬皮膠原蛋白提取及理化特性的研究[D]. 重慶： 西南大學， 2010： 47-48. DOI：10.7666/d.y1670859.

[17] ADEBOWALE K O， LAWAL O S. Foaming， gelation and electrophoretic characteristics of mucuna bean （Mucuna pruriens） protein concentrates[J]. Food Chemistry， 2003， 83： 237-246. DOI：10.1016/S0308-8146（03）00086-4.

[18] 韓敏義， 費英， 徐幸蓮， 等. 低場NMR研究pH對肌原纖維蛋白熱誘導凝膠的影響[J]. 中國農業科學， 2009， 42（6）： 2098-2104. DOI：10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.028.

[19] 步紅紅. 膠原的提取、結構表征及分散體系流變性研究[D]. 濟南： 齊魯工業大學， 2016： 43-44. DOI：10.7666/d.D01061524.

[20] 郝淑賢， 林婉玲， 李來好， 等. 不同提取方法對羅非魚皮膠原蛋白理化特性的影響[J]. 食品科學， 2014， 35（15）： 59-62. DOI：10.7506/spkx1002-6630-201415012.

[21] 曹少謙， 夏珊珊， 劉亮， 等. 馬面魚皮膠原蛋白的提取及其特性研究[J]. 中國食品學報， 2014， 14（10）： 117-123. DOI：10.16429/j.1009-7848.2014.10.024.

[22] 劉鳳鳴， 李八方， 侯虎. 等電點法純化太平洋鱈魚皮膠原蛋白及其結構特性研究[J]. 食品工業科技， 2019， 40（10）： 201-206. DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2019.10.033.

[23] 王艷. 草魚魚鱗膠原蛋白的若干生物學性能研究[D]. 武漢： 武漢工業學院， 2011： 30-34.

[24] 曾名勇， 張聯英， 劉尊英， 等. 幾種魚皮膠原蛋白的理化特性及其影響因素[J]. 中國海洋大學學報（自然科學版）， 2005， 35（4）： 608-612. DOI：10.3969/j.issn.1672-5174.2005.04.018.

[25] 王光宇， 肖美添， 趙鵬， 等. 膠原聚集體及其聚集行為研究進展[J].?生物技術進展， 2017， 7（6）： 587-593. DOI：10.19586/j.2095-2341.2017.0058.

[26] 鐘朝輝， 李春美， 顧海峰， 等. 原子力顯微鏡研究魚鱗膠原蛋白的溶液聚集行為[J]. 精細化工， 2006， 23（10）： 983-987. DOI：10.3321/j.issn：1003-5214.2006.10.012.

[27] 吳萬燁， 武昆， 李國英. 利用二維同步熒光相關光譜研究溫度對膠原溶液中分子聚集行為的影響[J]. 光譜學與光譜分析， 2015， 35（2）： 409-414. DOI：10.3964/j.issn.1000-0593（2015）02-0409-06.

[28] 王香梅， 高建峰， 蔡中婷. 溫度對牛膠原聚集態的影響[J]. 高分子通報， 2010（6）： 82-86. DOI：10.14028/j.cnki.1003-3726.2010.06.012.

[29] 邵昆. 魚鱗膠原蛋白的提取及凝膠性質的研究[D]. 南昌： 江西農業大學， 2012： 35-36.

[30] 范春梅， 劉學文. 鳳爪膠原蛋白凝膠強度的研究[J]. 食品工業， 2012， 33（5）： 37-39.

[31] 王雪蒙， 于瑋， 馬良， 等. 兔皮膠原蛋白的提取及其結構鑒定[J]. 食品與發酵工業， 2016， 42（4）： 209-213. DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201604038.

[32] 劉迪. 豬跟腱膠原蛋白的提取及蛋白基包裝材料的研究[D]. 無錫： 江南大學， 2017： 19-20.

[33] 王杉杉， 羅學剛， 蘇峰丙， 等. 牦牛皮膠原蛋白的提取及性能分析[J]. 精細化工， 2018， 35（5）： 830-837. DOI：10.13550/j.jxhg.20170573.

[34] 楊平， 劉影， 公麗艷， 等. 酸法和酶法提取草魚魚鱗膠原蛋白的特性分析[J]. 食品工業， 2018， 39（7）： 129-132.

[35] 靳書杰. 日本黃姑魚皮膠原蛋白理化特性及其膠原蛋白肽活性研究[D]. 舟山： 浙江海洋大學， 2019： 24-25. DOI：10.27747/d.cnki.gzjhy.2019.000042.

[36] 沈校， 龔明， 鄒崢嶸， 等. 巴沙魚皮膠原蛋白的提取、組成及變性溫度研究[J]. 中國海洋藥物， 2017， 36（4）： 41-46. DOI：10.13400/j.cnki.cjmd.2017.04.008.

[37] 劉麗莉， 尹光俊， 康懷彬， 等. 氨基酸及溶劑環境對牛骨膠原熱穩定性的影響[J]. 河南科技大學學報（自然科學版）， 2016， 37（3）： 73-77. DOI：10.15926/j.cnki.issn1672-6871.2016.03.016.

[38] 焦坤. 羊肩胛軟骨Ⅱ型膠原的提取及其理化特性研究[D]. 呼和浩特： 內蒙古農業大學， 2012： 27-29.

[39] 楊俊暉. 膠原化學改性研究進展[J]. 云南化工， 2018， 45（9）： 1-3. DOI：10.3969/j.issn.1004-275X.2018.09.001.

[40] 黃金， 陳寧. γ-聚谷氨酸的性質與生產方法[J]. 氨基酸和生物資源， 2004， 26（4）： 44-48. DOI：10.3969/j.issn.1006-8376.2004.04.016.

[41] 王衛國， 王衛， 趙永亮， 等. γ-聚谷氨酸的研究及應用進展[J]. 河南工業大學學報（自然科學版）， 2016， 37（2）： 117-122. DOI：10.16433/j.cnki.issn1673-2383.2016.02.021.

[42] 閆鳴艷， 趙曉晨， 楊蕭， 等. γ-聚谷氨酸對羅非魚皮酶促溶性膠原自聚集性的影響[J]. 食品科學， 2019， 40（16）： 25-29. DOI：10.7506/spkx1002-6630-20180617-341.

[43] MATHEIS G， WHITAKEER J R. A review： enzymatic cross-linking of proteins applicable to food[J]. Journal of Food Biochemistry， 1987， 11（4）： 309-327. DOI：10.1111/j.1745-4514.1987.tb00129.x.

[44] 周瑞寶， 周兵. 蛋白質的生物和化學改性[J]. 中國油脂， 2000， 25（6）： 181-185. DOI：10.3321/j.issn：1003-7969.2000.06.055.

[45] CHAU D Y S， COLLIGHAN R J， VERDERIO E A M， et al.?The cellular response to transglutaminase-cross-linked collagen[J]. Biomaterials， 2005， 26（33）： 6518-6529. DOI：10.1016/j.biomaterials.2005.04.017.

[46] STACHEL I， SCHWARZENBOLZ U， HENLE T， et al. Cross-linking of type Ⅰ collagen with microbial transglutaminase： identification of cross-linking sites[J]. Biomacromolecules， 2010， 11（3）： 698-705. DOI：10.1021/bm901284x.

[47] WANG Yuemeng， LIU Anjun， YE Ran， et al. Transglutaminase-induced crosslinking of gelatin-calcium carbonate composite films[J]. Food Chemistry， 2015， 166： 414-422. DOI：10.1016/j.foodchem.2014.06.062.

[48] CHEN R N， HO H O， SHEU M T. Characterization of collagen matrices crosslinked using microbial transglutaminase[J]. Biomaterials， 2005， 26： 4229-4235. DOI：10.1016/j.biomaterials.2004.11.012.

[49] WU Xiaomeng， LIU Yaowei， LIU Anjun， et al. Improved thermal-stability and mechanical properties of type Ⅰ collagen by crosslinking with casein， keratin and soy protein isolate using transglutaminase[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2017， 98：?292-301. DOI：10.1016/j.ijbiomac.2017.01.127.

[50] CHENG Shan， WANG Wenhang， LI Yu， et al. Cross-linking and film-forming properties of transglutaminase-modified collagen fibers tailored by denaturation temperature[J]. Food Chemistry， 2019， 271： 527-535. DOI：10.1016/j.foodchem.2018.07.223.

[51] FORTUNATI D， CHAU D Y S， WANG Zhuo， et al. Cross-linking of collagen Ⅰ by tissue transglutaminase provides a promising biomaterial for promoting bone healing[J]. Amino Acids， 2014， 46（7）： 1751-1761. DOI：10.1007/s00726-014-1732-0.

[52] ZHAO Leilei， LI Xian， ZHAO Jiaqi， et al. A novel smart injectable hydrogel prepared by microbial transglutaminase and human-like collagen： its characterization and biocompatibility[J]. Materials Science and Engineering C， 2016， 68： 317-326. DOI：10.1016/j.msec.2016.05.108.

[53] 黃雨琳， 李國英. 基于轉谷氨酰胺酶交聯膠原凝膠的結構與性能研究[J]. 皮革科學與工程， 2019， 29（5）： 5-10. DOI：10.19677/j.issn.1004-7964.2019.05.001.

[54] 李鳳林， 黃聰亮， 余蕾. 食品添加劑[M]. 北京： 化學工業出版社， 2008.

[55] 程雨晴， 解萬翠， 楊錫洪， 等. 魚鱗膠原蛋白凝凍休閑食品的制備及其優化[J]. 農產品加工（學刊）， 2014（3）： 12-14. DOI：10.3969/jissn.1671-9646（X）.2014.03.004.

[56] 易翠平， 祝波， 鐘春梅. 鳡魚副產品制備魚凍的研究[J].?食品工業科技， 2014， 35（15）： 193-195; 199. DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2014.15.033.

[57] 劉貫勇， 馬相杰， 孟少華. 新型肉凍技術研究[J]. 肉類工業， 2019（9）： 10-12; 20. DOI：10.3969/j.issn.1008-5467.2019.09.004.

[58] 李俊宏， 李洪軍， 胡欣穎， 等. D-最優混料設計優化水晶皮凍配方[J].?食品與發酵工業， 2019， 45（20）： 149-156. DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021158.

[59] 孫哲浩. 明膠與卡拉膠共凝膠體的熱力學特性及微觀結構的研究[J]. 現代食品科技， 2008， 24（7）： 649-651; 663. DOI：10.3969/j.issn.1673-9078.2008.07.009.

[60] 曹祥薇. 明膠/多糖類膠體復配膠的凝膠特性及應用[D]. 武漢： 湖北工業大學， 2011： 21-23.

[61] 郭琦， 王欣， 劉寶林. κ-卡拉膠比例對明膠凝膠體系凝膠特性、水分分布及微觀結構的影響[J]. 食品與發酵工業， 2019， 45（9）： 81-88. DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017043.

[62] 王曉婧. 卡拉膠-明膠凝膠特性及其復配的研究與應用[D]. 天津： 天津科技大學， 2017： 55-56.

[63] 費鵬， 趙勝娟， 陳曦， 等. 植物多酚抑菌活性、作用機理及應用研究進展[J]. 食品與機械， 2019， 35（7）： 226-230. DOI：10.13652/j.issn.1003-5788.2019.07.043.

[64] BEDRAN-RUSSO A K B， CASTELLAN C S， SHINOHARA M S， et al. Characterization of biomodified dentin matrices for potential preventive and reparative therapies[J]. Acta Biomaterialia， 2011， 7（4）： 1735-1741. DOI：10.1016/j.actbio.2010.12.013.

[65] CASTELLAN C S， BEDRAN-RUSSO A K， KAROL S， et al. Long-term stability of dentin matrix following treatment with various natural collagen cross-linkers[J]. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials， 2011， 4（7）： 1343-1350. DOI：10.1016/j.jmbbm.2011.05.003.

[66] 張倩， 穆暢道， 李麗英， 等. 原花青素誘導明膠水凝膠的形成與穩定[J]. 皮革科學與工程， 2008， 18（3）： 20-25. DOI：10.3969/j.issn.1004-7964.2008.03.004.

[67] PENKOVA R， GOSHEV I， GORINSTEIN S， et al. Stabilizing effect of glycerol on collagen type Ⅰ isolated from different species[J]. Food Chemistry， 1999， 66： 483-487. DOI：10.1016/S0308-8146（99）00097-7.

[68] LI Jiheng， LI Guoying. The thermal behavior of collagen in solution： effect of glycerol and 2-propanol[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2011， 48： 364-368. DOI：10.1016/j.ijbiomac.2010.12.013.

[69] 楊維， 李季衡， 李國英. 甘油對膠原溶液黏彈性和熱穩定性的影響[J].?中國皮革， 2009， 38（3）： 15-18. DOI：10.13536/j.cnki.issn1001-6813.2009.03.006.

[70] 劉文濤， 王超. 膠原/甘油與膠原/異丙醇共混溶液的熱行為比較（Ⅰ）： 基于多重升溫速率的“無模式函數法”動力學分析[J]. 中國皮革， 2019， 48（11）： 1-6. DOI：10.13536/j.cnki.issn1001-6813.2019-011-000.

[71] 鐘朝輝， 李春美， 竇宏亮， 等. 草魚魚鱗酶溶性膠原蛋白的凝膠化特性研究[J]. 中國食品學報， 2007， 7（5）： 47-51. DOI：10.3969/j.issn.1009-7848.2007.05.009.

[72] LI Jiheng， LIU Wentao， LI Guoying. The effect of glycerol and 2-propanol on the molecular aggregation of collagen in solution[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2015， 72： 1097-1103. DOI：10.1016/j.ijbiomac.2014.10.032.

[73] USHA R， MAHESHWARI R， DHATHATHREYAN A， et al. Structural influence of mono and polyhydric alcohols on the stabilization of collagen[J]. Colloids and Surfaces B， 2006， 48：?101-105. DOI：10.1016/j.colsurfb.2006.01.015.

[74] USHA R， RAMASAMI T. Stability of collagen with polyols against guanidine denaturation [J]. Colloids and Surfaces B， 2008， 61： 39-42. DOI：10.1016/j.colsurfb.2007.07.005.

[75] 邢建宇， 白波， 李宇亮， 等. 不同金屬離子在膠原蛋白自聚集過程中的影響研究[J]. 應用化工， 2015， 44（6）： 1041-1044. DOI：10.13536/j.cnki.issn1001-6813.2009.03.006.

[76] 王志煒. 膠原和殼聚糖復合食用膜的制備與表征[D]. 楊凌： 西北農林科技大學， 2018： 10-19.

[77] 趙仁英. 鋅鐵雙金屬與膠原蛋白螯合規律的研究[D]. 天津： 天津科技大學， 2017： 12-42.

[78] 呼和木其爾. 羊軟骨膠原蛋白水解物抗氧化特性及其應用研究[D]. 呼和浩特： 內蒙古農業大學， 2016： 27-29.

[79] COLLINS K D. Ions from the Hofmeister series and osmolytes： effects on proteins in solution and in the crystallization process[J]. Methods， 2004， 34： 300-311. DOI：10.1016/j.ymeth.2004.03.021.

[80] 李鵬程. 膠原蛋白自組裝結構及其離子效應的研究[D]. 南昌： 江西師范大學， 2013： 33-39.

[81] 高金龍. 山羊皮中膠原蛋白的提取及理化特性研究[D]. 呼和浩特： 內蒙古農業大學， 2010： 21-23.

[82] FREUDENBERG U， BEHRENS S H， WELZEL P B， et al. Electrostatic interactions modulate the conformation of collagen Ⅰ[J]. Biophysical Journal， 2007， 29： 2108-2119. DOI：10.1529/biophysj.106.094284.

[83] 康俊霞， 康永鋒， 包斌， 等. Na+、Ca2+和pH值對鯨鯊皮膠原蛋白熱變性溫度的影響[J]. 食品科學， 2011， 32（13）： 66-70.

[84] 陳靜靜， 楊濤， 楊明陽. 聚丙烯酸鈉在低溫肉制品中的應用性研究[J]. 肉類工業， 2017（11）： 34-36. DOI：10.3969/j.issn.1008-5467.2017.11.010.

[85] 儀淑敏， 馬興勝， 勵建榮， 等. 聚丙烯酸鈉與面筋蛋白相結合對鰱魚魚糜凝膠特性的影響[J]. 中國食品學報， 2016， 16（4）： 43-50. DOI：10.16429/j.1009-7848.2016.04.007.

[86] 李鈺金， 馬興勝， 勵建榮， 等. 聚丙烯酸鈉對鰱魚魚糜凝膠特性的影響[J]. 食品研究與開發， 2017， 38（2）： 23-28. DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2017.02.005.

[87] 王亞斌. 膠原蛋白-聚丙烯酸鈉螯合金屬離子膜的制備與評價[D]. 天津： 天津科技大學， 2018： 18-41.