藥物分析中應(yīng)用超高效液相色譜法的效果探討

楊春根 盛玉青

（鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院藥劑科 江蘇 鎮(zhèn)江 212000）

高效液相色譜法是一種常用化學(xué)成分分析技術(shù)，可完成分析、分離等操作，近年來(lái)該技術(shù)進(jìn)一步優(yōu)化，形成了超高效液相色譜法檢驗(yàn)技術(shù)，為進(jìn)一步探明該技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用效果[1]。本次研究選擇氨芐西林膠囊50 粒和雙氯芬酸鈉緩釋片50 片作為待測(cè)樣品，分別采用超高效液相色譜法檢驗(yàn)和高效液相色譜法檢驗(yàn)，對(duì)比分析了超高效液相色譜法的檢驗(yàn)、分析優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1.儀器與方法

1.1 樣品與儀器

Waters UPLC H-Class 色譜儀；Acquity UPLC HSSC18 色譜柱；PDA 檢測(cè)器；液相色譜儀；氨芐西林膠囊（國(guó)藥準(zhǔn)字H23022658，0.25mg*20s）；雙氯芬酸鈉緩釋片（國(guó)藥準(zhǔn)字H10970209，0.1g*12s）。雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品10μg/ml于甲醇，1.1ml氨芐西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品，CAS 號(hào)69-52-3。

1.2 方法

2019 年10 月至2020 年6 月期間擇取氨芐西林膠囊50 粒和雙氯芬酸鈉緩釋片50 片作為待測(cè)樣品。將氨芐西林膠囊50 粒平均分成兩等份，分別采用超高效液相色譜法檢驗(yàn)和高效液相色譜法檢驗(yàn)。氨芐西林的高效液相色譜法檢測(cè)方法參照《中國(guó)藥典》收載的相關(guān)檢測(cè)方法[1]。超高效液相色譜法檢驗(yàn)：膠囊中藥物粉末完全倒出，對(duì)粉末加流動(dòng)相溶解，隨后稀釋、濾過(guò)，以含有冰醋酸、磷酸二氫鉀水溶液和乙睛的不同比例的混合液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫（流速0.5ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，柱溫為35℃），進(jìn)樣量為5μl，觀察并記錄色譜圖。

將雙氯芬酸鈉緩釋片50 片平均分成兩份，分別采用超高效液相色譜法檢驗(yàn)和高效液相色譜法檢驗(yàn)。雙氯芬酸鈉緩釋片的高效液相色譜法檢測(cè)方法參照《中國(guó)藥典》收載的相關(guān)檢測(cè)方法[2]。超高效液相色譜法檢驗(yàn)：雙氯芬酸鈉緩釋片磨成細(xì)粉，對(duì)粉末加流動(dòng)相溶解，隨后稀釋、濾過(guò)，流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液一甲醇毛睛（40:40:20），流速0.1ml/min，進(jìn)樣量1μl，波長(zhǎng)254nm，觀察并記錄色譜圖。本研究所用的超高效液相色譜法檢驗(yàn)方法已經(jīng)得到方法學(xué)驗(yàn)證，并按照相關(guān)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)指定的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行嚴(yán)格操作。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)2 種待測(cè)藥品通過(guò)超高效液相色譜法和高效液相色譜法檢驗(yàn)的的徹底分離率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析所有數(shù)據(jù)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 氨芐西林膠囊分離率比較

超高效液相色譜法檢測(cè)的徹底分離率顯著高于高效液相色譜法檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 雙氯芬酸鈉緩釋片分離率比較

超高效液相色譜法檢測(cè)的徹底分離率顯著高于高效液相色譜法檢測(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 雙氯芬酸鈉緩釋片藥物分析相關(guān)指標(biāo)比較

3.討論

近年來(lái)，隨著社會(huì)工業(yè)化的不斷推進(jìn)，對(duì)于檢驗(yàn)技術(shù)的要求不斷提高，液相色譜技術(shù)作為工業(yè)生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的常用分析技術(shù)，需要進(jìn)一步提高檢驗(yàn)效率，以滿足同時(shí)、快速檢驗(yàn)多種樣品的要求[3]。超高效液相色譜法采用了超高壓和小顆粒填料的液相色譜技術(shù)，該技術(shù)的運(yùn)動(dòng)使得各種成分的分離更佳準(zhǔn)確和快捷，與高效液相色譜法相比，具有樣品處理簡(jiǎn)便、組分吸收效果好、全檢測(cè)自動(dòng)化、分離效果好等優(yōu)勢(shì)，尤其適用于成分復(fù)雜、檢測(cè)精準(zhǔn)度較高的藥物分析工作，可進(jìn)行微量藥物檢驗(yàn)、藥品成分識(shí)別等復(fù)雜藥物分析工作[4]。

超高效液相色譜法在藥物分析中具有極佳的分離性能和快速檢測(cè)效果[5]。抗生素類藥物多為生物發(fā)酵而成，成分相對(duì)復(fù)雜，且藥品含量要求高，因而本次研究選擇生物發(fā)酵而成的抗生素——氨芐西林作為待測(cè)藥品，對(duì)超高效液相色譜法的藥物分析效果進(jìn)行了對(duì)比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn) 超高效液相色譜法檢測(cè)的徹底分離率（96.00%）顯著高于高效液相色譜法檢測(cè)（80.00%），進(jìn)一步對(duì)雙氯芬酸鈉緩釋片的分析也發(fā)現(xiàn)，超高效液相色譜法檢測(cè)的徹底分離率（100.00%）顯著高于高效液相色譜法檢測(cè)（76.00%），可知高效液相色譜法能夠高效完成雙氯芬酸鈉組分的分離，且樣品分離質(zhì)量較好，超高效液相色譜法對(duì)上述兩種藥品的分析效果均優(yōu)于高效液相色譜法。

綜上所述，超高效液相色譜法可進(jìn)一步提升藥物分析效率，并有助于提升分析質(zhì)量，保證藥物有效成分的可靠性。