電感耦合等離子體質譜法測定三大主產區金銀花中5種重金屬元素含量△

韓赟，沈夕坤，沈多榮，宋如珺

南京中醫藥大學 附屬蘇州市中醫醫院 藥學部，江蘇 蘇州 215009

近年來中藥材重金屬元素超標問題備受關注，中藥材中的重金屬元素及有害元素一般包括鉛(Pb)、汞(Hg)、鎘(Cd)、砷(As)、銅(Cu)等，作用于人體后可對神經系統、消化系統、造血系統、新陳代謝等產生危害。重金屬超標已成為影響中藥發展的主要問題之一，準確檢測和限定重金屬元素的含量是保障人民用藥安全有效的關鍵[1-3]。2015年，國家相繼發布了由中國中醫科學院主持制定的《中醫藥—中藥材重金屬限量》國際標準和國家中醫藥管理局的《國家中醫藥管理局關于進一步加強中藥飲片處方質量管理強化合理使用的通知》，可見國家對中藥材重金屬元素含量的重視。

金銀花為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花[4]，為清熱解毒之良藥，是臨床常用的大宗中藥材之一，尤其在新型冠狀病毒疫情期間，其市場需求量巨大。金銀花是《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)[4]2020年版規定檢測重金屬元素含量的唯一一種花類藥材，其重金屬元素含量超標問題一直廣受關注。根據國家商務部發布的近6年中藥材流通報告顯示[5]，我國金銀花平均產量為12 493.3 t，平均銷量為4892 t，最大的種植地為河南封丘、山東平邑和河北巨鹿[6]。因此，本研究選取河南、山東和河北產金銀花為調研對象，在前期研究的基礎上[7-8]，采用微波消解-電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)，進一步比較三大產區金銀花中5種重金屬元素Pb、Hg、Cd、As、Cu的含量，評價藥材的安全性，為保障金銀花臨床應用的安全有效性及提升飲片質量提供參考。

1 材料

1.1 儀器

PE350D型電感耦合等離子體質譜儀(美國PerkinElmer公司)；BT 125D型十萬分之一電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)；工業高純氬氣(南京天澤氣體有限責任公司)。

1.2 試劑

Pb、As、Cd、Cu、Hg標準溶液(1000 mg·L-1，國家有色金屬及電子材料分析測試中心，批號分別為GSB04-1742-2004、GSB04-1714-2004、GSB04-1721-2004、GSB04-1725-2004、GSB04-1729-2004)；內標溶液為鍺(72Ge)、銦(115In)、鉍(209Bi)，購自美國PerkinElmer公司，質量濃度均為10 μg·mL-1；65%硝酸和過氧化氫(優級純，德國Merck公司)；去離子水(電阻率≥18.2 MΩ·cm，25 ℃)，實驗室自制。

1.3 藥材

26批次金銀花藥材樣品分別采集于金銀花主產地山東省平邑縣、河南省封丘縣和河北省巨鹿縣金銀花種植基地，經南京中醫藥大學谷巍教授鑒定，均為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾，具體來源信息見表1，藥材樣本存放于蘇州市中醫醫院質檢室。

表1 26批次金銀花樣品信息

2 方法

2.1 ICP-MS測定條件

ICP-MS的參數設定值分別為射頻功率：1200 W，碰撞氣流量：3 mL·min-1，霧化氣流量：0.85 L·min-1，冷卻氣流量：15 L·min-1，輔助氣流量：1.2 L·min-1，積分時間：1 s，延遲時間：40 s，采樣錐孔徑：1.1 mm，截取錐孔徑：0.9 mm，超級截取錐孔徑：1.0 mm，掃描模式為跳峰，重復3次[9]。測定時Cu、As以72Ge作為內標，Cd以115In作為內標，Hg、Pb以209Bi作為內標。

2.2 對照品及內標溶液的制備

按照《中國藥典》2020年版四部通則2321項下方法制備相應溶液[9]。

2.2.1對照品儲備溶液的制備 分別精密量取Pb、Cd、As、Hg、Cu單元素標準溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成Pb、Cd、As、Hg、Cu質量濃度分別為1.0、0.5、1.0、1.0、10.0 μg·mL-1的溶液，即得。

2.2.2對照品溶液的制備 精密量取Pb、Cd、As、Hg、Cu對照品儲備液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成Pb、As質量濃度為0、1、5、10、20 ng·mL-1，Cd質量濃度為0、0.5、2.5、5.0、10.0 ng·mL-1，Cu質量濃度為0、50、100、200、500 ng·mL-1的系列混合溶液。另精密量取Hg對照品儲備液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成質量濃度分別為0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 ng·mL-1的溶液(現用現配)。

2.2.3內標溶液的制備 精密量取72Ge、115In、209Bi單元素標準溶液適量，用水稀釋制成質量濃度分別為1 μg·mL-1的混合溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密稱取各樣品粉末(過四號篩)0.200 g，置50 mL 聚四氟乙烯消解罐中，加入5.0 mL濃硝酸，室溫下放置過夜(12 h)，再加入2.0 mL H2O2，待反應緩和加蓋，消解(程序：5 min升溫至100 ℃，保持5 min；5 min升溫至130 ℃，保持5 min；5 min升溫至160 ℃，保持5 min；10 min升溫至190 ℃，保持20 min)；冷卻后轉入50 mL聚四氟乙烯量瓶中，用超純水定容，即得待測溶液[10]。以等量濃硝酸和過氧化氫作空白對照。

2.4 方法學考察

2.4.1標準曲線及檢測限 標準曲線以對照品濃度為橫坐標(X)，對照品分析峰響應值與內標元素參比峰響應值比值為縱坐標(Y)繪制，按2.1項下測定條件，連續檢測11份空白樣品溶液，以響應值的3倍標準偏差所對應的質量濃度為該元素的檢測限，見表2。

表2 線性回歸方程、相關系數及檢測限

2.4.2精密度、穩定性、重復性及加樣回收率考察 根據林麗等[11]方法學考察辦法，分別取內標溶液和金銀花供試品溶液，按2.1項下條件考察方法的重復性，結果顯示，每種元素每個項目的RSD均小于10%，且各元素的回收率均在80%～120%。

3 結果與分析

26批金銀花樣品中5種重金屬元素含量測定結果見表3和圖1。由表3可知，取自山東、河北和河南的26批金銀花樣品中Pb、Cd、As、Hg、Cu質量分數分別為0.176～4.059、0.037～0.238、0.076～0.471、0.003～0.068、6.154～10.192 mg·kg-1。所有樣品的重金屬元素含量均符合《中國藥典》2020年版規定和《藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》。

表3 26批金銀花樣品中5種重金屬元素含量測定結果(n=3) mg·kg-1

圖1 不同產區及河南產不同茬次金銀花樣品中5種重金屬含量

由圖1可知，3個產地金銀花樣品中，Pb含量以河南產最低，山東和河北產含量相近；Cd、As和Hg含量3個產地樣品基本相近；Cu含量以山東產樣品最低，河南產樣品最高，但3個產地間差異無統計學意義。河南產4個茬次的金銀花樣品中，頭茬花Pb含量最高，其余3個茬次相近；頭茬花Cu含量最低，其余3個茬次相近；Cd、As和Hg含量4個茬次相近。

4 結論與討論

ICP-MS技術為《中國藥典》2020年版規定的測定中藥材中重金屬及有害元素含量的技術之一，與傳統技術相比，其具有靈敏度、精密度和分析效率均較高的優點，被廣泛用于中藥材重金屬及有害元素含量的測定[11-16]。因此，本研究選用ICP-MS技術測定比較三大主產地金銀花藥材的重金屬含量。結果顯示，山東、河南和河北三大主產地26個金銀花樣品的Pb、Cd、Hg、As、Cu含量均未超過《中國藥典》2020年版及《藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》的規定，尤其是Hg、As和Cu的含量均遠低于國家限量標準。不同產地、不同茬次的金銀花樣品Pb和Cu的含量存在不同程度的差異，而Cd、Hg和As的含量在產地和采收茬次間均未體現差異。土壤和水質重金屬污染是造成中藥材重金屬超標的主要原因。趙連華等[3]統計了全國30個省、自治區、直轄市中藥材中5種重金屬的污染情況，結果顯示不同省份的中藥材重金屬超標率差異較大。因此，在醫院飲片采購中一定要明確產地來源，做到可追溯，以確保臨床用藥安全。

蘇州地區，古稱“吳中”，地處東南卑濕之地，是瘟疫、溫病的屢發地區，以吳有性、葉天士等為代表的一批吳中名醫，在大量的臨床實踐基礎上，創立戾氣學說與溫病學說，形成了“吳門醫派”，在診治急性傳染病、危重感染性疾病方面頗具特色。以金銀花為主藥的“抗病毒顆?！笔怯蓞情T醫派的代表方開發制成的，為蘇州市中醫醫院院內制劑，臨床應用廣泛，在本次蘇州地區新型冠狀病毒肺炎的預防與治療中發揮了重要的作用。本研究在前期比較三大主產區金銀花有效成分含量的基礎上[7]，對金銀花重金屬含量進行測定與比較，提高了臨床用藥的安全性，為金銀花的優質優價采購提供了數據參考。